本發(fā)明涉及醫(yī)療衛(wèi)生,具體為一種單精子冷凍載體。
背景技術(shù):
1、單精子冷凍技術(shù)于1997年被首次提出,并從冷凍載體、冷凍程序和冷凍保護(hù)劑配方的角度進(jìn)行了探索和改進(jìn)。在這些方法中,冷凍載體的進(jìn)步直接提高了單精子冷凍技術(shù)。
2、現(xiàn)有的非生物型冷凍載體較多,常見如cell?sleeper,cryotop,cryoleaf,cryopiece,spermvd等。
3、cell?sleeper是一種基于凍存管的細(xì)胞凍存容器,配有內(nèi)托盤。將單個(gè)精子加入托盤上的液滴(0.5-3.5μl)中。將托盤放入小瓶中并用螺帽密封。將樣品瓶置于液氮蒸氣上方4–5cm(-115℃–-130℃)處熏蒸2min,然后于液氮內(nèi)中儲(chǔ)存。缺點(diǎn)是托盤有一定高度,單精子顯微操作時(shí)需要不斷大幅度的提升和降低icsi針,導(dǎo)致斷針的風(fēng)險(xiǎn)較高。
4、cryotop是一種成熟的商業(yè)化冷凍載體。由細(xì)聚丙烯條、塑料手柄和外套管組成,主要應(yīng)用與胚胎和卵母細(xì)胞的冷凍儲(chǔ)存。隨后也作為一種微量精子冷凍保存的方法被引用。將單個(gè)精子轉(zhuǎn)移到cryotop細(xì)聚丙烯條上的冷凍微滴(1μl)中,并立即將cryotop置于液氮蒸氣上方4–5cm(-115℃–-130℃)處熏蒸2min,然后于液氮內(nèi)儲(chǔ)存。缺點(diǎn)是cryotop較長(zhǎng),需要在較大的培養(yǎng)皿中進(jìn)行顯微操作,對(duì)實(shí)際尤其時(shí)礦物質(zhì)油浪費(fèi)較嚴(yán)重;其次聚丙烯條極薄位于中央位置,不能與皿底貼合,在顯微操作時(shí),聚丙烯條容易發(fā)生移動(dòng),影響顯微操作。
5、cryoleaf主要由透明聚苯乙烯冷凍薄片、固定手柄和保護(hù)套管組成。冷凍薄片是通過將falcon培養(yǎng)皿(falcon?353001,bd?biosciences)切成小方片,加熱后手工拉至長(zhǎng)約22mm,寬約3mm的小葉片。再將冷凍薄片固定在手柄上進(jìn)行顯微操作和冷凍復(fù)蘇。該方法缺點(diǎn)時(shí)使用培養(yǎng)皿手工拉至而成,制備過程繁瑣,難以保證冷凍薄片的結(jié)晶程度和平整度。復(fù)蘇時(shí)需將冷凍薄片剪下,由于薄片過輕,需用小銅塊沉于皿底后方可進(jìn)行顯微操作。
6、cryopiece是一種超薄冷凍載片,可以將微滴加在冷凍載片,直接置于培養(yǎng)皿中進(jìn)行顯微操作,相較于之前的單精子冷凍載體更加方便實(shí)用。但載片重量較輕,在移動(dòng)載物臺(tái)時(shí)載片容易發(fā)生移動(dòng),影響顯微操作,其次每個(gè)凍存管僅能裝載一個(gè)載片,儲(chǔ)存量較小。
7、改進(jìn)后的cryopiece2.0載片更加厚重穩(wěn)定,可鑲嵌固定于配套培養(yǎng)皿的凹槽內(nèi),然后再進(jìn)行顯微操作,隨后用鑷子夾取載片,瀝干礦物質(zhì)油后進(jìn)行液氮整齊熏蒸冷凍,再放于凍存管內(nèi)冷凍儲(chǔ)存。cryopiece2.0較1.0有所改進(jìn),但是一個(gè)凍存管僅能裝載一個(gè)載片,儲(chǔ)存量較小。
8、spermvd于上面的cryopiece類似,精子可以轉(zhuǎn)移到spermvd上的0.8–1μl微滴中,再將spermvd轉(zhuǎn)入到3.6ml冷凍管內(nèi),浸入液氮凍存中。但載片較大,需要3.6ml冷凍管,雖可以一次冷凍3個(gè)微滴,但是均在一個(gè)載片上,復(fù)蘇時(shí)只能全部解凍,不能分批次解凍,僅能一次解凍使用。
9、因此,如何提供一種微型化、簡(jiǎn)約化,集成化的單精子冷凍載體,成為了本領(lǐng)域技術(shù)人員急需解決的技術(shù)問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)以上情況,本發(fā)明的目的在于提出一種單精子冷凍載體,具有微型化、簡(jiǎn)約化,集成化的特點(diǎn),在不增加病人冷凍收費(fèi)的前提下,增加冷凍的支數(shù)和使用次數(shù)。
2、為達(dá)上述目的,本發(fā)明提供了一種單精子冷凍載體,包括:凍存管、冷凍載片和連接手柄;所述冷凍載片和連接手柄采用一體化灌注成型,多個(gè)所述冷凍載片儲(chǔ)存在一個(gè)凍存管。
3、進(jìn)一步地,所述凍存管采用2.0ml的凍存管。
4、進(jìn)一步地,每個(gè)冷凍載片僅裝載1個(gè)0.5~1μl的微滴。
5、進(jìn)一步地,所述連接手柄一端設(shè)置有夾取部。
6、進(jìn)一步地,所述連接手柄底面平整,與冷凍載片齊平。
7、進(jìn)一步地,所述凍存管上可拆卸連接有管帽。
8、本發(fā)明的有益效果在于:
9、本發(fā)明提出了一種單精子冷凍載體,微型化、簡(jiǎn)約化,集成化的特點(diǎn),結(jié)合上述冷凍載體的優(yōu)勢(shì),可以將多個(gè)冷凍載片儲(chǔ)存再一個(gè)凍存管內(nèi),在不增加病人冷凍收費(fèi)的前提下,增加冷凍的支數(shù)和使用次數(shù)。
1.一種單精子冷凍載體,其特征在于,包括:凍存管、冷凍載片和連接手柄;所述冷凍載片和連接手柄采用一體化灌注成型,多個(gè)所述冷凍載片儲(chǔ)存在一個(gè)凍存管。
2.如權(quán)利要求1所述的一種單精子冷凍載體,其特征在于,所述凍存管采用2.0ml的凍存管。
3.如權(quán)利要求1所述的一種單精子冷凍載體,其特征在于,每個(gè)冷凍載片僅裝載1個(gè)0.5~1μl的微滴。
4.如權(quán)利要求1或3所述的一種單精子冷凍載體,其特征在于,所述連接手柄一端設(shè)置有夾取部。
5.如權(quán)利要求4所述的一種單精子冷凍載體,其特征在于,所述連接手柄底面平整,與冷凍載片齊平。
6.如權(quán)利要求1所述的一種單精子冷凍載體,其特征在于,所述凍存管上可拆卸連接有管帽。