提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液及方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物試管苗的光合自養(yǎng)生根方法，具體涉及一種提高甘蔗試管苗光合 自養(yǎng)生根效率的生長促進液配方及方法。
【背景技術】
[0002] 植物組織培養(yǎng)一般要經(jīng)過四個階段，即初代培養(yǎng)(或建立無菌培養(yǎng)體系)、繼代增 殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽。目前，已在生產(chǎn)上大規(guī)模應用的甘蔗試管苗快速繁育技術也 包括了以上四個階段。然而這種傳統(tǒng)的甘蔗試管苗生產(chǎn)過程復雜，且對培養(yǎng)環(huán)境條件高，致 使甘蔗組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)試管苗的成本居高不下，已經(jīng)不能為市場所接受，限制了甘蔗 健康種苗的種植和推廣。因而，簡化甘蔗試管苗生產(chǎn)程序，降低生產(chǎn)成本，是解決制約甘蔗 健康種苗大規(guī)模生產(chǎn)推廣這一難題的最有效途徑。
[0003] 研宄表明，在植物組織培養(yǎng)過程中，試管苗的生根成本占整個試管苗生產(chǎn)成本的 35°/『75%，因此簡化試管苗生根技術可使植物試管苗生產(chǎn)成本大幅度下降。試管苗瓶外生根 技術是近年研宄成功的一項先進的組培生根技術，是植物試管苗簡化生產(chǎn)技術的重要組成 部分。試管苗瓶外生根技術是將無根試管苗直接栽培于溫室苗圃中進行生根，將傳統(tǒng)的生 根和馴化兩個階段結合起來，省去了無根試管苗的試管內(nèi)生根的傳統(tǒng)程序，用自養(yǎng)生根代 替?zhèn)鹘y(tǒng)的異養(yǎng)生根，縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本。同時，植物組織培養(yǎng)技術的發(fā)展非常迅 速，國內(nèi)外對滿天星、羅漢果、牡丹、甘蔗、草莓等一大批植物試管苗瓶外生根技術進行了研 宄，并獲得了成功。
[0004] 促進自養(yǎng)生根的生長調(diào)節(jié)劑是影響試管苗存活率的關鍵因素，良好的生長調(diào)節(jié)劑 配方可以有效提高試管苗的抗逆性和存活率。然而目前很多生長調(diào)節(jié)劑配方成分復雜，缺 乏科學合理的搭配，調(diào)節(jié)機理不明確，反而容易對試管苗產(chǎn)生損害，不利于試管苗的生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是克服傳統(tǒng)甘蔗試管苗生長調(diào)節(jié)劑不理想，生產(chǎn)過程復雜，培養(yǎng)環(huán) 境要求嚴格，成本高的難題，提供一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液配 方及方法。
[0006] 本發(fā)明是通過如下方式實現(xiàn)的： 一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液，其特征在于，包括生長促進液 1:吲哚丁酸5~200 mg/L + 6-芐氨基腺嘌呤0.025~20 mg/L + L-脯氨酸28~230 mg/L +吐溫-80 2. 5 ml/L，或生長促進液2 :萘乙酸5~300 mg/L + L-脯氨酸28~230 mg/L +吐溫-80 2.5 ml/L。6-芐氨基腺嘌呤和L-脯氨酸可以延緩甘蔗試管苗葉片衰老 和增強試管苗抗環(huán)境脅迫的能力；在生長促進液中加入表面活性劑吐溫-80,可以增強生 長促進液的滲透效果。
[0007] 優(yōu)選的，所述生長促進液1中，吲哚丁酸與6-芐氨基腺嘌呤的重量比為10~ 200:1。在此比例下，吲哚丁酸與6-芐氨基腺嘌呤對試管苗生根的協(xié)同促進作用最好。
[0008] 優(yōu)選的，所述生長促進液1為吲哚丁酸200 mg/L + 6-芐氨基腺嘌呤5 mg/L + L-脯氨酸56 mg/L +吐溫-80 2.5 ml/L。在此比例下，生長促進液1處理的甘蔗試管苗 存活率最高，達92%。
[0009] 優(yōu)選的，所述生長促進液2為萘乙酸100 mg/L + L-脯氨酸115 mg/L +吐溫-80 2. 5 ml/L。在此比例下，生長促進液2處理的甘蔗試管苗存活率最高，達88%。
[0010] 一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 煉苗：將完成繼代增殖培養(yǎng)周期，且含繼代增殖培養(yǎng)基的無根甘蔗苗瓶放于陰涼、 避風處，打開瓶蓋，噴施生長促進液1 :吲哚丁酸5~200 mg/L + 6-芐氨基腺嘌呤0.025~ 20 mg/L + L-脯氨酸28~230 mg/L +吐溫-80 2. 5 ml/L，或生長促進液2 :萘乙酸5~ 300 mg/L + L-脯氨酸 28 ~230 mg/L + 吐溫-80 2.5 ml/L，在溫度 20 ~30°C，濕度 65 ~ 80%，光照強度2000~10000 Iux下，煉苗24-48小時； (2) 分割試管苗：煉苗后從瓶中取出試管苗，高度大于I cm的試管苗單株分割，高度小 于I cm的試管苗按2~3株連體分割，用清水洗凈培養(yǎng)基，清除老葉； (3) 消毒：將分割清潔后的試管苗用0. 2~0. 3%的高錳酸鉀溶液浸泡消毒3~6分鐘； (4) 種植：將消毒后的試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中，澆足定 根水； (5) 生根培育管理：將帶有試管苗的種植盆移入自動調(diào)節(jié)溫度濕度的育苗溫室，蓋上遮 陽網(wǎng)，調(diào)節(jié)育苗溫室環(huán)境：種植后的12天內(nèi)，溫室濕度控制在80%以上，光照強度2000~ 10000 Iux ;種植12天后，溫室濕度控制在70%以上，光照強度2000~10000 Iux ;當90% 的甘蔗試管苗長出新葉后，揭開遮陽網(wǎng)，溫室濕度控制為70%，每間隔30分鐘淋水30秒，直 到試管苗出圃；試管苗長出新葉后，開始施液體肥和除草，苗圃管理與常規(guī)甘蔗試管苗育苗 方法相同。
[0011] 優(yōu)選的，所述繼代增殖培養(yǎng)基為MS + 6-芐氨基腺嘌呤I mg/L +萘乙酸0.01 mg/ L + 鹿糖 20 g/L。
[0012] 優(yōu)選的，所述栽培基質(zhì)為體積比1:1的育苗蛭石與有機營養(yǎng)土混合物，或風化的 田園土，或體積比1:1的黃泥與河沙混合物。
[0013] 優(yōu)選的，所述有機營養(yǎng)土的成分包括：有機質(zhì)彡30%，腐植酸彡5%，N + P2O5 + K2O 彡 3% 〇
[0014] 優(yōu)選的，所述甘蔗其品種為桂糖44號。
[0015] 本發(fā)明的有益效果是： 1.本發(fā)明的生長促進液配方滲透效果好，可以顯著提高甘蔗試管苗存活率，延緩葉片 衰老和增強抗環(huán)境脅迫的能力，甘蔗試管苗的存活率最高達90%以上，達到有根試管苗圃 移栽存活率水平，且增強了甘蔗試管苗的抗逆性，品質(zhì)得到明顯提高。
[0016] 2.本發(fā)明的生長促進液成本低廉、配制簡單、使用方便，利于大規(guī)模生產(chǎn)和應用。
[0017] 3.本發(fā)明的生長促進液處理過的甘蔗試管苗消毒后可直接用于種植，省去了生 長素浸泡的操作，簡化了操作流程，節(jié)約了試劑成本。
[0018] 4.本發(fā)明的方法將甘蔗無根試管苗直接栽培于日光溫室中進行自養(yǎng)生根，用自 養(yǎng)生根方法代替了傳統(tǒng)的試管內(nèi)生根或異養(yǎng)生根方法，甘蔗試管苗組織培養(yǎng)過程由傳統(tǒng) 的四個階段簡化為三個階段，節(jié)省培養(yǎng)室占用空間、勞動力、生根培養(yǎng)基化學試劑和能源投 入，顯著地提高了生產(chǎn)效率。
[0019] 5本發(fā)明的方法在溫室培育生根過程中不要求無菌環(huán)境，操作簡單，節(jié)省能源及 勞動力投入。
[0020] 6.本發(fā)明的方法中試管苗生根栽培基質(zhì)為價格較為低廉且營養(yǎng)較豐富的育苗蛭 石與有機營養(yǎng)土混合物，或風化的田園土，或黃泥與河沙混合物，代替昂貴的MS生根培養(yǎng) 基，利于降低成本。
[0021] 7.本發(fā)明的方法由于試管苗生根與苗圃馴化進行有機結合，生產(chǎn)周期比傳統(tǒng)方 法縮短12_15天。
[0022] 8.本發(fā)明的一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液配方，加之 方法中甘蔗試管苗組織培養(yǎng)過程由傳統(tǒng)的四個階段簡化為三個階段，方法操作簡單，與 傳統(tǒng)苗圃移栽及管理方法沒有太大差異，甘蔗試管苗生產(chǎn)成本比傳統(tǒng)方法生產(chǎn)成本降低 35-40%，經(jīng)濟效益顯著。
【具體實施方式】
[0023] 下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步描述，但不限制本發(fā)明的保護范圍和應用 范圍。
[0024] 實施例1 一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液配方，為生長促進液1 :吲哚丁 酸200 mg/L + 6-芐氨基腺嘌呤5 mg/L + L-脯氨酸56 mg/L +吐溫-80 2. 5 ml/L。
[0025] 相應的提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的方法，包括以下步驟： (1) 煉苗：甘蔗品種選擇桂糖44號，將完成繼代增殖培養(yǎng)周期，且含繼代增殖培養(yǎng)基的 無根甘蔗苗瓶放于陰涼、避風處，打開瓶蓋，噴施生長促進液1 :吲哚丁酸200 mg/L + 6-芐 氨基腺嘌呤5 mg/L + L-脯氨酸56 mg/L +吐溫-80 2.5 ml/L，在溫度25°C，濕度80%，光 照強度5000 Iux下，煉苗24小時； (2) 分割試管苗：煉苗后從瓶中取出試管苗，高度大于I cm的試管苗單株分割，高度小 于I cm的試管苗按2株連體分割，用清水洗凈培養(yǎng)基，清除老葉； (3) 消毒：將分割清潔后的試管苗用0. 2%的高錳酸鉀溶液浸泡消毒4分鐘； (4) 種植：將消毒后的試管苗分成單株或小叢種植于放有栽培基質(zhì)的種植盆中，澆足定 根水； (5) 生根培育管理：將帶有試管苗的種植盆移入自動調(diào)節(jié)溫度濕度的育苗溫室，蓋上遮 陽網(wǎng)，調(diào)節(jié)育苗溫室環(huán)境：種植后的12天內(nèi)，溫室濕度控制在80%以上，光照強度2000 Iux ; 種植12天后，溫室濕度控制在70%以上，光照強度2000 Iux ;當90%的甘蔗試管苗長出新 葉后，揭開遮陽網(wǎng)，溫室濕度控制為70%，每間隔30分鐘淋水30秒，直到試管苗出圃；試管 苗長出新葉后，開始施液體肥和除草，苗圃管理與常規(guī)甘蔗試管苗育苗方法相同。
[0026] 其中，所述繼代增殖培養(yǎng)基為MS + 6-芐氨基腺嘌呤I mg/L +萘乙酸0.01 mg/L +蔗糖20 g/L;所述栽培基質(zhì)為體積比為1:1的育苗蛭石與有機營養(yǎng)土混合物，有機營養(yǎng) 土的成分包括：有機質(zhì)彡30%，腐植酸彡5%，N + P2O5 + K2O彡3%。
[0027] 種植第20天對試管苗進行統(tǒng)計，種植50株，存活46株，存活率為92%。
[0028] 實施例2 一種提高甘蔗試管苗光合自養(yǎng)生根效率的生長促進液配方，為生長促進液2 :萘乙酸5 mg/L + L-脯氨酸 230 mg/L + 吐溫-80 2. 5 ml