一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別設(shè)及一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的 增殖培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002] 藏紅花是一種名貴的中草藥，由于其只是柱頭入藥，產(chǎn)量極低，同時(shí)又因?yàn)槠滟Y源 極其有限，但用途廣泛，致使其價(jià)格昂貴，一直被譽(yù)為"植物黃金"，所W對(duì)藏紅花的快速繁 殖研究極其重要。
[0003] 目前的藏紅花快速繁殖方法多數(shù)采用組織培養(yǎng)，但是目前的組織培養(yǎng)中愈傷組織 增殖速度慢，越來(lái)越難W滿足市場(chǎng)、科研和物種保護(hù)的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 基于現(xiàn)有技術(shù)存在上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖 培養(yǎng)基，其WBs培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加6-BA(6-芐基腺嚷嶺）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙 酸）、蛋白腺、瓊脂粉和薦糖，本發(fā)明提供的增殖培養(yǎng)基具有增值率高的優(yōu)點(diǎn)。
[000引一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基，其WBs培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并 添加6-BA( 6-芐基腺嚷嶺）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、蛋白腺、瓊脂粉和薦糖。
[0006] 6-BA(6-芐基腺嚷嶺）的濃度為l-5mg/L、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為0.5-2mg/L、蛋白腺的濃度為l-4g/L、瓊脂粉的濃度為5-8g/L、薦糖的濃度為30-90g/L。
[0007] 6-BA(6-芐基腺嚷嶺）的濃度為1.5-2.5111旨/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為 0.75-1.25mg/L、蛋白腺的濃度為1.5-2.5g/L、瓊脂粉的濃度為6-7g/L、薦糖的濃度為40-70g/L〇
[000引所述的提高藏紅花愈傷組織誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基的pH值是5.5-6.5。
[0009] 本發(fā)明的有益效果是:在培養(yǎng)基中添加了蛋白腺，蛋白腺多用于微生物培養(yǎng)基，具 有大量的天然蛋白質(zhì)和一些維生素和糖類(lèi)，用于藏紅花的組織培養(yǎng)中也可W提供多種生長(zhǎng) 因子，可W促進(jìn)藏紅花愈傷組織的增殖，提高增殖率。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0011] 實(shí)施例一:配制一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基。
[0012] 根據(jù)表1所示的Bs培養(yǎng)基配方W及表2所示的提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖 培養(yǎng)基配方，制備本發(fā)明所述的提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基。
[001引用天平分別稱取Bs培養(yǎng)基中的各成分W及6-BA(6-芐基腺嚷嶺）、2,4-0(2,4-二氯 苯氧乙酸）、蛋白腺、瓊脂粉和薦糖，置于=角瓶中，加入適量純化水，攬拌溶解，定容至 1000 mL,并使用HCL或者KOH調(diào)節(jié)pH值至6.0。將S角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121°C滅 菌21min，然后于超凈工作臺(tái)中，將提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基分裝至組織培 養(yǎng)瓶中，自然冷卻，將組織培養(yǎng)瓶封口，備用。
[0014] 表1 Bs培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0015] 表2提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0016] 實(shí)施例二:本發(fā)明所述的提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基的測(cè)試。
[0017] 按照實(shí)施例一所述的培養(yǎng)基制備方法，制備提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培 養(yǎng)基,備用。
[0018] 從誘導(dǎo)培養(yǎng)基中選擇沒(méi)有污染、生長(zhǎng)正常、沒(méi)有褐化和玻璃化的藏紅花愈傷組織， 在超凈臺(tái)中取出愈傷組織，用無(wú)菌手術(shù)刀將愈傷組織切成1立方米左右大小的愈傷組織塊， 接種到上述制備好的提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基中，每塊外植體相互間隔 1.2厘米。
[0019] 接種結(jié)束后將藏紅花愈傷組織塊置于人工氣候箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件如下：光 照/黑暗時(shí)間：14/10小時(shí)，光照強(qiáng)度是20001UX，培養(yǎng)溫度是23°C。，培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)增殖系 數(shù)，增殖系數(shù)達(dá)到5.21，與對(duì)照組的藏紅花愈傷組織的增殖系數(shù)相比提高了 2.21，大大提高 增殖速度。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基，其特征在于，其以出培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培 養(yǎng)基，并添加6-BA( 6-芐基腺嘌呤）、2，4-D( 2，4-二氯苯氧乙酸）、蛋白胨、瓊脂粉和蔗糖。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基，其特征在于， 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為1-51^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸）的濃度為0.5-211^/1、蛋 白胨的濃度為l_4g/L、瓊脂粉的濃度為5-8g/L、蔗糖的濃度為30-90g/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基，其特征在于， 6-BA(6-芐基腺嘌呤）的濃度為1.5-2.5mg/L、2，4-D(2，4_二氯苯氧乙酸）的濃度為0.75-1.25mg/L、蛋白胨的濃度為1.5-2.5g/L、瓊脂粉的濃度為6-7g/L、蔗糖的濃度為40-70g/L。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3其中之一所述的一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基， 其特征在于，所述的提高藏紅花愈傷組織誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基的pH值是5.5-6.5。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供一種提高藏紅花愈傷組織增殖率的增殖培養(yǎng)基，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，其以B5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，并添加6-BA（6-芐基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、蛋白胨、瓊脂粉和蔗糖，本發(fā)明提供的增殖培養(yǎng)基具有增值率高的優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類(lèi)】A01H4/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105475142
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610011323
【發(fā)明人】何志鏗
【申請(qǐng)人】佛山市金藍(lán)領(lǐng)教育科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2016年1月9日