一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物及其制備和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種具有延緩衰老的星油藤（ Plukenetia Volubilis L.）莖葉提取物，制備方法及其在化妝品、保健食品等方面的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及化妝品組合物，該組合物用于抗氧化、皮膚衰老防護(hù)和改善皺紋，并且含有作為有效成分的星油藤莖葉提取物。本發(fā)明是基于該提取物對(duì)彈性蛋白酶、膠原蛋白酶、透明質(zhì)酸酶的抑制活性和促膠原蛋白分泌實(shí)驗(yàn)中顯示有意義的效果而得以確認(rèn)。該提取物在保健食品或抗衰老化妝品中的使用量可占0.01%~100%重量比。
【專利說(shuō)明】一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物及其制備和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種具有抗衰老的植物提取物(粗提物，萃取物，精提物)，及其制備 方法和應(yīng)用。具體涉及具有抗衰老活性的星油藤莖葉提取物，以及涉及含有作為有效成分 的該提取物的制備方法和健康、保健食品或護(hù)膚、抗衰老美容化妝品組合物，該組合物可用 于防護(hù)衰老和改善皮膚皺紋。

【背景技術(shù)】
[0002] 我國(guó)是世界上老齡化發(fā)展速度最快的國(guó)家之一，也是老齡人口最多的國(guó)家之一。 衰老是一種復(fù)雜的生命現(xiàn)象，是指隨著時(shí)間的推移所有個(gè)體都將發(fā)生的功能性和器質(zhì)性衰 退的漸進(jìn)過(guò)程。皮膚作為人體最大的器官覆蓋人體全身，在起到保護(hù)作用的同時(shí)，也最易受 到外界的侵害。其衰老可分為自然衰老和光老化兩種形式，所謂自然衰老系指由于機(jī)體內(nèi) 在因素的作用（主要為遺傳因素）引起，見(jiàn)于暴露部位和非暴露部位，明顯特征為皺紋的出 現(xiàn)和皮膚的松弛。而光老化則指皮膚衰老過(guò)程紫外線損害的積累，是自然老化和紫外線輻 射共同作用的結(jié)果。皮膚包括表皮，真皮和皮下組織。表皮衰老過(guò)程中由于自由基及過(guò)氧 化作用使膠原表面形成AGE(終末糖化產(chǎn)物）而過(guò)度交聯(lián)，使皮膚半橋粒結(jié)構(gòu)失去彈性，表 皮與真皮連接變平，皮膚變得松弛、失去彈力。真皮衰老表現(xiàn)為真皮對(duì)外來(lái)化學(xué)物清除力 下降，真皮厚度變薄、膠原蛋白和彈性蛋白合成減少、分解增加，分解酶活性增強(qiáng)。真皮厚度 變薄，膠原含量減少，特別是可溶性膠原含量下降明顯，彈性蛋白含量上升；胞外基質(zhì)中透 明質(zhì)酸和硫酸皮膚素含量明顯下降，糖胺多糖總含量下降。此外，膠原纖維和彈性纖維排列 也漸趨紊亂。其生理結(jié)局使皮膚失去增殖能力，其抗剪切力減弱。而細(xì)胞外基質(zhì)提供皮膚 正確定向所需的三維支架的基本組成主要是膠原蛋白和彈性蛋白。皺紋的產(chǎn)生，部分是由 于基質(zhì)內(nèi)纖維狀蛋白質(zhì)(例如膠原蛋白或彈性蛋白)結(jié)構(gòu)完整性的破壞。故抑制彈性蛋白和 膠原蛋白的破壞和增加膠原蛋白的分泌對(duì)延緩皺紋生成是有利的。
[0003] 星油藤L.)，又稱印加果、印加花生、美藤果、南美油藤， 印加語(yǔ)稱SachaInchi，為大戟科（Euphorbiaceae)多年生木質(zhì)藤本植物，原生長(zhǎng)在海拔 80-1700m的南美洲安第斯山脈地區(qū)。2006年引入中國(guó)，在云南省如中國(guó)科學(xué)院西雙版納熱 帶植物園和廣東省如中國(guó)科學(xué)院華南植物園等地試種，2008年試種成功。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì) 于星油藤的研究主要是油脂的開(kāi)發(fā)利用，星油藤油具有護(hù)養(yǎng)肌膚、延緩衰老、調(diào)節(jié)血脂等功 效；而對(duì)莖葉的研究甚少，僅有一篇報(bào)道稱其葉的提取物有抗氧化和促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖 作用（Nascimento,Melo-Silveiraetal.2013)。星油藤作為剛引種成功的木本油料植 物，2013年衛(wèi)生部已批準(zhǔn)為新食品原料，其副產(chǎn)物莖葉抗氧化、延緩衰老的特點(diǎn)，使其在保 健食品和化妝品方面具有很大的開(kāi)發(fā)價(jià)值。
[0004] 目前對(duì)星油藤葉抗氧化作用已有報(bào)道，但對(duì)其抗衰老作用未見(jiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明目的：針對(duì)國(guó)內(nèi)外對(duì)于星油藤莖葉研究的空白，本發(fā)明的目的是提供了一種 具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取物，本發(fā)明的另一目的是提供該提取物的制備和應(yīng) 用。
[0006] 技術(shù)方案：為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供的具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取 物，是通過(guò)以下方法制備得到。
[0007] (1)取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加1至10倍量濃度為1% 至100%的有機(jī)溶劑，提取1至10次，每次提取1至15日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓 濃縮，蒸干，得星油藤莖葉粗取物，備用。
[0008] (2)取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用有機(jī)溶劑多 次萃取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用。
[0009] (3)取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得 到星油藤精提物。
[0010] 作為優(yōu)選方案，以上所述的具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其步驟（1)所述的 提取方法為溶劑浸提法。
[0011] 本發(fā)明提供的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物的制備方法，其包括以下步 驟。
[0012] (1)取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加1至10倍量濃度為1% 至100%的有機(jī)溶劑，提取1至10次，每次提取1至15日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓 濃縮，蒸干，得星油藤莖葉粗取物，備用。
[0013] (2)取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用有機(jī)溶劑多 次萃取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用。
[0014] (3)取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得 到星油藤精提物。
[0015] 作為優(yōu)選方案，以上所述的具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其步驟（2)所用的 萃取溶劑為水和有機(jī)溶劑如石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、三氯甲烷等按不同比例的組合。
[0016] 作為優(yōu)選方案，以上所述的具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，步驟（3)所述的洗 脫以梯度洗脫為主。
[0017] 本發(fā)明還提供了一種抗衰老的保健食品或化妝品組合物，它是由有效量的星油藤 莖葉提取物為活性成分，加入食品上或化妝品上可接受的輔料或輔助性成分制備而成。

【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，以下實(shí)施例是為了更好地闡述本發(fā) 明，而不是用來(lái)限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0019] 實(shí)施例1。
[0020] 一種具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取物，它通過(guò)以下方法制備得到。
[0021] (1)取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加10倍量濃度為50%的 甲醇溶劑，提取10次，每次提取1日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓濃縮，蒸干，得星油藤 莖葉粗取物，備用。
[0022] (2)取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用石油醚多次 萃取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用。
[0023] (3)取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得 到星油藤精提物。
[0024] 實(shí)施例2。
[0025] -種具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取物，它通過(guò)以下方法制備得到。
[0026] (1)取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加3倍量濃度為70%的乙 醇溶劑，提取4次，每次提取2日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓濃縮，蒸干，得星油藤莖葉 粗取物，備用。
[0027] (2)取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用石油醚溶劑 多次萃取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用。
[0028] (3)取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得 到星油藤精提物。
[0029] 實(shí)施例3。
[0030] 人體白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)。
[0031] 在人體白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制實(shí)驗(yàn)測(cè)試實(shí)施例2的星油藤莖葉的提取物。測(cè)試中 的陽(yáng)性活性證實(shí)提取物的抗衰老活性。
[0032] 實(shí)驗(yàn)方法：96孔板中，實(shí)驗(yàn)組分別加入25 yl的0. 1 M HEPES緩沖液，樣品（2 mg/ml)和彈性蛋白酶（lun/ml);空白組加入75 yl HEPES緩沖液，陰性對(duì)照組加入25 U 1彈性蛋白酶和50 yl的HEPES緩沖液；陽(yáng)性對(duì)照組分別加入25 yl的彈性蛋白酶、 HEPES緩沖液和彈力素（10 iig/ml);溶劑對(duì)照組分別加入25 ill的彈性蛋白酶，HEPES 緩沖液和溶解樣品的溶劑；樣品顏色對(duì)照組包含150 yl HEPES緩沖液和25 ill樣品。 96孔板在室溫下培養(yǎng)20分鐘后，分別加入100 的底物，再在25°下培養(yǎng)40分鐘。多 功能熒光酶標(biāo)儀測(cè)吸光度A，檢測(cè)波長(zhǎng)為405nm。一式三份。計(jì)算得到彈性蛋白酶抑制率。
[0033]彈性蛋白酶抑制率（％) = (Ac-At/ Ac) X 100%。
[0034] 此處Ac為溶劑對(duì)照組的吸光值，At為陽(yáng)性對(duì)照或?qū)嶒?yàn)組的吸光值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果取 平均值，如表1.所顯示。

【權(quán)利要求】
1. 一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其特征在于，它是通過(guò)以下方法制備得 到： (1) 取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加1至10倍量濃度為1%至 100%的有機(jī)溶劑，提取1至10次，每次提取1至15日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓濃 縮，蒸干，得星油藤莖葉粗取物，備用； (2) 取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用有機(jī)溶劑多次萃 取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用； (3) 取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得到星 油藤精提物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其特征在于，提取 物包括步驟（1)所得的粗提物，步驟（2)所得的萃取物和步驟（3)所得的精提物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其特征在于，步驟 (1)所用的提取方法為溶劑浸提法，所用的提取溶劑為各種有機(jī)溶劑及不同有機(jī)混合溶劑 和水的混合溶劑，其濃度為1%-1〇〇%。
4. 一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物的制備方法，其特征在于，它是通過(guò)以下方 法制備得到： (1) 取星油藤莖葉，凈選，去除雜質(zhì)，陰干，置提取容器內(nèi)，加1至10倍量濃度為1%至 100%的有機(jī)溶劑，提取1至10次，每次提取1至15日，合并提取液，過(guò)濾，得濾液，減壓濃 縮，蒸干，得星油藤莖葉粗取物，備用； (2) 取上步驟（1)制備得到的星油藤莖葉粗取物，加適量水混懸后，用有機(jī)溶劑多次萃 取，得到萃取液，濃縮，得星油藤莖葉的萃取物，備用； (3) 取步驟（2)制備得到的萃取物進(jìn)行層析，收集不同層析洗脫液，濃縮、干燥，得到星 油藤精提物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物的制備方法，其特征 在于，步驟（1)所用的提取方法為溶劑浸提法，所用的提取溶劑為各種有機(jī)溶劑及不同有 機(jī)混合溶劑和水的混合溶劑，其濃度為1%-1〇〇%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物的制備方法，其特征 在于，步驟（2)所用的萃取方法包括人工及儀器設(shè)備萃取，所用萃取溶劑包括水和有機(jī)溶 劑如乙醚、乙酸乙酯、石油醚、三氯甲烷、正丁醇、正己烷等及各種不同溶劑的組合。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有延緩衰老的星油藤莖葉提取物，其特征在于，步驟 (3)所用的層析材料為各種層析材料包括硅膠、凝膠、反相08、(：-18、10、各種樹(shù)脂等，其 洗脫液包括各種有機(jī)溶劑、水和它們酸、堿溶液及各種比例的組合；層析方法包括人工和各 種設(shè)備如常壓、中壓、高壓和超高壓及高速逆流等多種層析方法。
8. 權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所述的具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取物作為活性成分 在護(hù)膚、抗衰老美容化妝產(chǎn)品的應(yīng)用。
9. 權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所述的具有延緩衰老作用的星油藤莖葉提取物作為活性成分 在延緩衰老健康和保健食品中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A23L1/30GK104382980SQ201410643321
【公開(kāi)日】2015年3月4日 申請(qǐng)日期:2014年11月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月14日
【發(fā)明者】鄭小玲, 許又凱 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院西雙版納熱帶植物園