一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液及其制備方法。其目的是為解決生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液丟棄處理，浪費(fèi)資源、能源、人力、物力和財(cái)力，且存在對周圍水體及土壤污染的問題，滿足市場對富含冬蟲夏草胞外多糖成分產(chǎn)品的需求。其技術(shù)方案：菌種采集、菌種培養(yǎng)、無菌分離、低溫培養(yǎng)、純化、菌種鑒定、原始菌種保藏、發(fā)酵性能測定、液體發(fā)酵、菌液分離、發(fā)酵液濃縮、提取精制冬蟲夏草胞外粗多糖；取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖相關(guān)輔料，純化水溶解；定容、均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。本發(fā)明產(chǎn)品具有抗腫瘤、抗氧化、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高血清IgG的含量、促進(jìn)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和抗輻射等作用。
【專利說明】
一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液及其制備方法，具體來說，是指對發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖進(jìn)行分離純化添加輔料制得的口服液及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]發(fā)酵冬蟲夏草菌粉足經(jīng)菌種采集、菌種培養(yǎng)、無菌分離、低溫培養(yǎng)、純化、菌種鑒定、原始菌種保藏、發(fā)酵性能測定、液體發(fā)酵、菌液分離、菌絲體干燥等工藝制得。而發(fā)酵液常被作為廢液進(jìn)行處理，由于發(fā)酵液中含有大量微生物和其他功效成分，直接排放會(huì)對周圍水體及土壤發(fā)生污染，需要經(jīng)過高溫高壓滅菌處理才可以排放，不僅浪費(fèi)了大量資源、能源、人力、物力和財(cái)力，而且對周圍環(huán)境存在安全隱患。
[0003]試驗(yàn)表明，發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖具有抗腫瘤、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、抗氧化、提高血清中IgG的含量、促進(jìn)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和抗輻射等作用。而冬蟲夏草發(fā)酵液也含有多種功能性有效成分，如對病菌有抑制作用的多糖、蟲草菌素、多肽類、甘露醇、單糖、有機(jī)酸、多胺、磷脂酰膽堿、微量元素及VB12等成分。它們的生理活性極其豐富多彩，可抗菌、抗癌、抗血小板凝結(jié)、抗福射、改善和提高記憶力、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫能力、媽離子措抗、對腦和心臟在常壓缺氧下有保護(hù)作用、鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛等。
[0004]目前，對于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的研究和生產(chǎn)屬于空白。
[0005]在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明的實(shí)施，不僅提供了具有抗腫瘤、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高小鼠血清中IgG的含量、對體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化有促進(jìn)作用和抗輻射等作用的胞外多糖顆粒劑產(chǎn)品，最大限度的利用了冬蟲夏草發(fā)酵液，變廢為寶，還達(dá)到了節(jié)約資源、能源、人力、物力和財(cái)力，降低環(huán)境污染的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]鑒于人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液丟棄處理，浪費(fèi)資源、能源、人力、物力和財(cái)力，且存在對周圍水體及土壤污染的問題，并為滿足市場的需求，本發(fā)明的目的在于提供一種利用人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液生產(chǎn)冬蟲夏草胞外多糖口服液及其制備方法。
[0007]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種利用人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液生產(chǎn)冬蟲夏草胞外多糖口服液，包括有:含量介于7.5%至15%重量百分比的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖、含量介于79%至91.2%重量百分比的純化水、含量介于0.1%至5.0%重量百分比的甜味劑、含量介于0.1%至0.5%重量百分比的矯味劑以及含量介于
0.1 %至0.5%重量百分比的穩(wěn)定劑。
[0008]所述的甜味劑選自甜菊苷或阿斯巴甜或木糖醇中的一種或多種混合物；所述的矯味劑選自檸檬酸或乳酸或蘋果酸中的一種或多種混合物；所述的穩(wěn)定劑選自羧甲基纖維素鈉或黃原膠或瓜爾膠或刺槐豆膠或魔芋精粉或環(huán)狀糊精或六偏磷酸鈉或三聚磷酸鈉中的一種或多種混合物。
[0009]優(yōu)選的，用于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液包括有:
[0010]含量為10%重量百分比的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖；
[0011]含量為84.4%重量百分比的純化水；
[0012]含量為5%重量百分比的甜味劑，所述甜味劑是白砂糖；
[0013]含量為0.1 %重量百分比的矯味劑，所述粘合劑是梓檬酸；以及
[0014]含量為0.3%重量百分比的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑是將0.1 %重量百分比的羧甲基纖維素鈉和0.2%重量百分比的黃原膠的混合物。
[0015]本發(fā)明亦有關(guān)于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的提取方法。
[0016]本發(fā)明的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的提取方法，包括有:利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02?-0.04MPa, 70?90 °C ;二效-0.04?-0.06MPa，60?80°C;三效-0.06?-0.08MPa，50?70°C，發(fā)酵液濃縮至相對密度1.20?1.35 ;將濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至6.5?8.5，常溫靜置I?4h，3000r/min?10000r/min離心5?20min去除沉淀；將75%?95%的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速貼容器壁加入40r/min?500r/min的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%?75%時(shí)停止加入，停止攪拌，O?20°C靜置8?12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖；對所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0017]優(yōu)選的，用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的方法包括有:
[0018]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0019]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.025MPa，80°C ;二效-0.05MPa，70°C ;三效-0.07MPa，60°C，發(fā)酵液濃縮至相對密度1.28 ;
[0020]將濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至7.0，常溫靜置1.5h，5000r/min離心1min去除沉淀；
[0021 ] 將95 %的食用乙醇以6L/min的流速貼容器壁加入100r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%時(shí)停止加入，停止攪拌，4°C靜置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖；
[0022]對所得的粗多糖進(jìn)行常規(guī)提純，干燥，粉碎過篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0023]本發(fā)明還有關(guān)于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液的制備方法。
[0024]本發(fā)明的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液的制備方法，包括有:將重量百分比
7.5%?15.0%發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖用純化水完全溶解，依次加入重量百分比0.1%?5.0%甜味劑，重量百分比0.1 %?0.5%矯味劑，重量百分比0.1 %?0.5%穩(wěn)定劑，溶解后的混合溶液定容后，經(jīng)均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。
[0025]優(yōu)選的，用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液的方法包括有:
[0026]將10g發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖用純化水完全溶解；
[0027]依次加入:50g白砂糖，1g檸檬酸，1g羧甲基纖維素鈉，20g黃原膠；
[0028]溶解后的混合溶液加入純化水至100g ；
[0029]經(jīng)均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得100瓶1mL/瓶的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。
[0030]由本發(fā)明可以利用適合商業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，進(jìn)而提供發(fā)酵冬蟲夏草深加工產(chǎn)品滿足市場需求，達(dá)到本發(fā)明的目的。
【具體實(shí)施方式】
[0031]以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0032](一 )冬蟲夏草胞外多糖口服液
[0033]實(shí)施例1
[0034]10.0kg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液包括有:
[0035]0.75kg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖；
[0036]9.1Okg 的純化水；
[0037]0.05kg 白砂糖；
[0038]0.05kg檸檬酸；以及
[0039]含量為0.05kg的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑是將0.015kg羧甲基纖維素鈉和0.035kg黃原膠的混合物。
[0040]所述冬蟲夏草產(chǎn)物具有8.26IU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0041]實(shí)施例2
[0042]10.0kg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液包括有:
[0043]1.5kg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖；
[0044]8.46kg 的純化水；
[0045]0.02kg 白砂糖；
[0046]0.0Ikg檸檬酸；以及
[0047]含量為0.0lkg的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑是將0.004kg羧甲基纖維素鈉和0.006kg黃原膠的混合物。
[0048]所述冬蟲夏草產(chǎn)物具有17.llIU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0049]( 二)用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的方法
[0050]實(shí)施例3
[0051]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0052]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.04MPa，70°C ;二效-0.06MPa，60°C ;三效-0.08MPa，50°C，發(fā)酵液濃縮至相對密度1.22 ;
[0053]將50L濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至6.5，常溫靜置1.5h，3000r/min離心20min去除沉淀；
[0054]將75%的食用乙醇以lL/min的流速貼容器壁加入40r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%時(shí)停止加入，停止攪拌，0°C靜置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖，得粗多糖3.62kg ;
[0055]對所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0056]實(shí)施例4
[0057]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0058]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02MPa，90°C ;二效-0.04MPa，80°C ;三效-0.06MPa，80°C，發(fā)酵液濃縮至相對密度1.31 ;
[0059]將50L濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至8.5，常溫靜置4h，10000r/min離心5min去除沉淀；
[0060]將95%的食用乙醇以10L/min的流速貼容器壁加入500 r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到75%時(shí)停止加入，停止攪拌，20°C靜置12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖，得粗多糖4.28kg ;
[0061]對所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0062](三)用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液的方法
[0063]實(shí)施例5
[0064]將75g發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖用純化水完全溶解；
[0065]依次加入50g白砂糖，50g梓檬酸，1g羧甲基纖維素鈉，20g黃原膠；
[0066]溶解后的混合溶液加入純化水至100g ；
[0067]經(jīng)均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得100瓶1mL/瓶的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。
[0068]實(shí)施例6
[0069]將150g發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖用純化水完全溶解；
[0070]依次加入20g白砂糖，1g檸檬酸，4g羧甲基纖維素鈉，6g黃原膠；
[0071]溶解后的混合溶液加入純化水至100g ；
[0072]經(jīng)均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得100瓶1mL/瓶的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。
[0073]由上述可知本發(fā)明的具體制造及實(shí)施方法，確實(shí)可以解決目前人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液處理方法的弊端。由于發(fā)酵液中含有大量微生物，直接排放會(huì)對周圍水體及土壤發(fā)生污染，需要經(jīng)過高溫高壓滅菌處理才可以排放，不僅浪費(fèi)了大量資源、能源、人力、物力和財(cái)力，而且對周圍環(huán)境存在安全隱患。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于其所采用的活性成分為發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，輔以其他藥用輔料，其原料組分如下，各組重量百分比為:發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖7.5%?15.0%、純化水79%?91.2%，甜味劑0.1%?5.0%，矯味劑0.1%?0.5%,穩(wěn)定劑0.1%?0.5%。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于:所述的甜味劑選自甜菊苷或阿斯巴甜或木糖醇中的一種或多種混合物。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于:所述的矯味劑選自檸檬酸或乳酸或蘋果酸中的一種或多種混合物。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于:所述的穩(wěn)定劑選自羧甲基纖維素鈉或黃原膠或瓜爾膠或刺槐豆膠或魔芋精粉或環(huán)狀糊精或六偏磷酸鈉或三聚磷酸鈉中的一種或多種混合物。5.根據(jù)權(quán)利要求1?4所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于:所述的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖通過以下步驟制得: (1)利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)菌絲體； (2)發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液； (3)發(fā)酵液5000r/min離心lOmin，收集上清液； (4)上清液用外加熱式三效濃縮罐濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02 ?-0.04MPa，70 ?90 °C ； 二 效-0.04 ?-0.06MPa，60 ?80 °C ；三效-0.06?-0.08MPa，50?70°C，發(fā)酵液濃縮至相對密度1.20?1.35 ; (4)將75%?95 %的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速貼壁加入40r/min?200r/min的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%?75%時(shí)停止加入，停止攪拌，O?20°C靜置8?12h后收集沉淀得到粗多糖； (5)對粗多糖進(jìn)行常規(guī)提純，干燥，粉碎后即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液，其特征在于:其制備方法如下:將重量百分比7.5%?15.0%發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖用純化水完全溶解，依次加入重量百分比0.1 %?5.0 %甜味劑，重量百分比0.1%?0.5%矯味劑，重量百分比.0.1%?0.5%穩(wěn)定劑，溶解后的混合溶液定容后，經(jīng)均質(zhì)、脫氣、灌裝、滅菌后，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖口服液。
【文檔編號】C12P19/04GK105876405SQ201410618233
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年11月6日
【發(fā)明人】王玉花, 王輝
【申請人】王輝