本發(fā)明屬于生物與醫(yī)藥，具體涉及一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在高糖誘導(dǎo)的秀麗隱桿線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用及作為緩解高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的食品和日化產(chǎn)品。

背景技術(shù)：

1、秀麗隱桿線蟲（ caenorhabditis?elegans）作為一種模式生物，在評價高葡萄糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老研究中具有顯著優(yōu)勢。首先，線蟲生命周期短（約2-3周），且衰老過程與哺乳動物高度相似，能夠快速反映高糖環(huán)境對衰老的影響。其次，線蟲的遺傳背景清晰，基因組完全測序，便于通過基因編輯技術(shù)研究特定基因在代謝紊亂和衰老中的作用。此外，高糖誘導(dǎo)的線蟲模型能夠模擬人類高糖飲食導(dǎo)致的代謝紊亂狀態(tài)，如胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝異常和氧化應(yīng)激增加等，為研究代謝相關(guān)型衰老的分子機制提供了理想平臺。

2、枸杞作為一種傳統(tǒng)中藥材，具有抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性，近年來在抗衰老和代謝調(diào)節(jié)領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。然而，枸杞的功效驗證并未涉及高糖應(yīng)激場景，這可能是因為枸杞的高含糖量（還原糖≥15?%）限制了其在高葡萄糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老模型中的應(yīng)用。高糖環(huán)境本身會加劇代謝紊亂狀態(tài)，而枸杞中的高糖成分可能進(jìn)一步加重模型的代謝負(fù)擔(dān)，干擾實驗結(jié)果。此外，目前大多數(shù)研究聚焦于枸杞中的單一活性成分，而缺乏對枸杞整體活性成分群的系統(tǒng)性研究。因此，本發(fā)明通過發(fā)酵的手段開發(fā)低糖的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉產(chǎn)品，并使用高葡萄糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的秀麗隱桿線蟲模型對其進(jìn)行功效驗證，為發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在緩解高糖誘導(dǎo)的線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用提供更全面的技術(shù)支撐。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方法如下：

2、本發(fā)明提供一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在緩解高糖誘導(dǎo)的秀麗隱桿線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用。

3、優(yōu)選的，通過馬克斯克魯維酵母菌發(fā)酵工藝，排除鮮枸杞原漿中糖分干擾問題，保留核心抗衰活性成分。

4、優(yōu)選的，給藥濃度為1.53-7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液延長了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲的壽命。

5、優(yōu)選的，給藥濃度為1.53-7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液減少了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲體內(nèi)的脂褐素積累。

6、優(yōu)選的，給藥濃度為1.53-7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液降低了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲體內(nèi)的ros水平。

7、優(yōu)選的，給藥濃度為7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液增加了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲體內(nèi)的sod含量。

8、優(yōu)選的，給藥濃度為7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液抑制了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲iis通路的異常激活，并下調(diào)與壽命相關(guān)的 age-1和 sir-2.1基因表達(dá)。

9、因此，本發(fā)明采用上述的一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在緩解高糖誘導(dǎo)的秀麗隱桿線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用，具有以下有益效果：

10、通過馬克斯克魯維酵母菌發(fā)酵工藝制備的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉中還原糖含量顯著降低至≤1.5%，同時多糖保留率≥97%、玉米黃質(zhì)二棕櫚酸酯保留率≥98%、甜菜堿保留率≥87%。

11、對線蟲壽命的測定，在給藥濃度為7.65?mg/ml、3.83?mg/ml和1.53?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液中，高糖誘導(dǎo)的線蟲壽命顯著延長，最大壽命分別延長了28.00?%、25.00?%?和14.20?%，平均壽命分別延長了24.20?%、23.10?%和16.70?%。

12、對線蟲體內(nèi)脂褐素沉積的測定，在給藥濃度為7.65?mg/ml、3.83?mg/ml和1.53mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液中，高糖誘導(dǎo)的線蟲體內(nèi)脂褐素?zé)晒鈴姸染鶚O顯著降低( p＜0.01)，分別降低了54.39?%、52.88?%、52.24?%。

13、對線蟲體內(nèi)ros水平進(jìn)行測試，在給藥濃度為7.65?mg/ml、3.83?mg/ml和1.53?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液中，高糖誘導(dǎo)的線蟲體內(nèi)ros熒光強度極顯著減弱( p＜0.01)，分別降低了57.24?%、50.34?%、38.62%。

14、對線蟲體內(nèi)sod含量進(jìn)行測試，在給藥濃度為7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液中，高糖誘導(dǎo)的線蟲體內(nèi)sod含量極顯著增加（ p＜0.01)，增加了71.77?%。

15、對線蟲體內(nèi) age-1和 sir-2.1相對表達(dá)量進(jìn)行測試，在給藥濃度為7.65?mg/ml的發(fā)酵枸杞清汁凍干粉水溶液中，高糖誘導(dǎo)的線蟲體內(nèi) age-1和 sir-2.1相對表達(dá)量顯著下調(diào)（ p＜0.01)，分別下調(diào)了40.13%和57.74?%。

16、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為：

17、1、本發(fā)明的研究揭示了排除枸杞本身糖分干擾后，發(fā)酵枸杞清汁凍干粉對葡萄糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲的應(yīng)用：與高糖組和未發(fā)酵枸杞組相比，發(fā)酵枸杞清汁凍干粉延長了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲最長壽命、平均存活率；減少了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲腸道內(nèi)的脂褐素水積累；降低了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲體內(nèi)的ros水平；提高了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲體內(nèi)的sod酶活；抑制了高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老條件下的線蟲體內(nèi)iis通路異常激活并下調(diào)與壽命相關(guān)的 age-1和 sir-2.1基因表達(dá)。

18、2、本發(fā)明為發(fā)酵枸杞清汁凍干粉發(fā)掘了新的用途，為今后開發(fā)新型食品和日化產(chǎn)品奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在緩解高糖誘導(dǎo)的秀麗隱桿線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用，其特征在于：將所述凍干粉以1.53-7.65?mg/ml的濃度與高糖溶液混合后作用于線蟲，通過抑制線蟲iis通路異常激活、延長線蟲壽命、減少脂褐素沉積、降低ros水平、提高sod酶活實現(xiàn)抗衰作用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述高糖溶液濃度為50-100?mm，線蟲為l3-l4階段的n2型秀麗隱桿線蟲，暴露時間為22-26小時，環(huán)境溫度為20±1℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述發(fā)酵枸杞清汁凍干粉的制備方法包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述抗衰作用通過抑制高糖誘導(dǎo)的線蟲iis通路異常激活實現(xiàn)，具體表現(xiàn)為age-1和sir-2.1基因表達(dá)顯著下調(diào)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：當(dāng)給藥濃度為7.65?mg/ml時，高糖誘導(dǎo)的線蟲壽命延長28.00?%、脂褐素沉積減少54.39?%、ros水平降低57.24?%、sod酶活提高71.77%、age-1和sir-2.1基因表達(dá)分別下調(diào)40.13%和57.74%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述發(fā)酵枸杞清汁凍干粉用于制備緩解高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的食品和日化產(chǎn)品。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述發(fā)酵枸杞清汁凍干粉用于制備緩解高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的抗衰老面霜、眼霜、精華液、面膜、口服美容產(chǎn)品。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種發(fā)酵枸杞清汁凍干粉在緩解高糖誘導(dǎo)的秀麗隱桿線蟲代謝相關(guān)型衰老中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。所述應(yīng)用通過馬克斯克魯維酵母菌發(fā)酵工藝，排除鮮枸杞原漿中糖分干擾問題，保留核心抗衰活性成分，并將發(fā)酵枸杞清汁凍干粉以1.53?7.65?mg/mL的濃度與50?100?mM高糖溶液混合后作用于L3?L4階段的N<subgt;2</subgt;型線蟲，顯著延長高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的線蟲壽命、減少脂褐素沉積、降低ROS水平、提高SOD酶活性，并通過抑制IIS通路異常激活下調(diào)age?1和sir?2.1基因表達(dá)。本發(fā)明證明了發(fā)酵枸杞清汁凍干粉可以在一定程度上減緩葡萄糖誘導(dǎo)線蟲代謝相關(guān)型衰老，為高糖環(huán)境下的抗衰干預(yù)提供了新策略。本發(fā)明同時公開了發(fā)酵枸杞清汁凍干粉作為制備緩解高糖誘導(dǎo)的代謝相關(guān)型衰老的食品和日化產(chǎn)品中的應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：林佳琪,楊瑞,姚正穎,王曉莉,孫力軍,白新宇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：淮陰工學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15