使免疫原性組合物穩(wěn)定且抑制其沉淀的新穎調(diào)配物的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】
[0001] 本申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮?01310587301. 4、申請(qǐng)日為2007年4月19日、發(fā)明名稱(chēng)為"使 免疫原性組合物穩(wěn)定且抑制其沉淀的新穎調(diào)配物"的第一分案申請(qǐng)的第二分案申請(qǐng)。
[0002] 所述第一分案申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮?00780014734. 3、申請(qǐng)日為2007年4月19日、發(fā)明 名稱(chēng)為"使免疫原性組合物穩(wěn)定且抑制其沉淀的新穎調(diào)配物"的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明大體來(lái)說(shuō)涉及免疫學(xué)、細(xì)菌學(xué)、疫苗調(diào)配、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和工藝過(guò)程開(kāi)發(fā)領(lǐng) 域。更具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及抑制免疫原性組合物沉淀的新穎調(diào)配物。
【背景技術(shù)】
[0004] 生物制藥領(lǐng)域一般公認(rèn)，改進(jìn)免疫原性組合物（例如，蛋白質(zhì)免疫原、多糖-蛋白 質(zhì)連結(jié)物）的穩(wěn)定性是一個(gè)必需且特別需要的目標(biāo)。舉例來(lái)說(shuō)，免疫原性組合物當(dāng)投與患 者時(shí)，須看起來(lái)新鮮、品質(zhì)優(yōu)良且專(zhuān)門(mén)的。免疫原性組合物的穩(wěn)定性和/或物理性質(zhì)的任何 改變（諸如顏色改變、變渾或渾濁）都可能使患者或用戶(hù)對(duì)產(chǎn)品失去信心。此外，由于許多 免疫原性調(diào)配物是分配于多劑量容器中，故必須確保隨時(shí)間流逝活性成分（例如，多糖-蛋 白質(zhì)連結(jié)物）的劑量均勻（例如，渾濁溶液可導(dǎo)致不均勻的劑量模式）。另外，免疫原性組 合物須在其"預(yù)期"保存期限內(nèi)具活性，其中使免疫原性組合物失去活性或其它不合需要的 形式（例如，聚集）的任何破壞都會(huì)降低產(chǎn)品的總濃度。
[0005] 若干文獻(xiàn)中的報(bào)道表明，特定免疫原性組合物（例如，蛋白質(zhì)免疫原、多糖-蛋 白質(zhì)連結(jié)物）的穩(wěn)定性至少部分取決于特定蛋白質(zhì)或載體蛋白（胡（Ho)等人，2001 ;胡 (Ho)等人，2002;波爾加諾（Bolgiano)等人，2001)。舉例來(lái)說(shuō)，與破傷風(fēng)類(lèi)毒素 （tetanus toxoid，TT)或CRM197載體蛋白連結(jié)的C群腦膜炎球菌（meningococcal C，MenC)多糖和b 型流感嗜血桿菌（Haemophilus influenzae type b，Hib)多糖的穩(wěn)定性分析揭示視載體蛋 白而定不同的穩(wěn)定性概況（胡等人，2002)。在另一研宄（胡等人，2001)中，分析來(lái)自?xún)蓚€(gè) 不同制造商的MenC-CRM197連結(jié)物（胡等人，2001)，其中MenC-CRM 197連結(jié)物的連結(jié)化學(xué)和 連結(jié)物多糖的長(zhǎng)度不同（二者具有相同的載體蛋白，CRM197)。來(lái)自這項(xiàng)研宄的數(shù)據(jù)進(jìn)一步 表明，諸如連結(jié)化學(xué)（例如，直接或經(jīng)由化學(xué)聯(lián)接基團(tuán)還原胺化）、連結(jié)位點(diǎn)的數(shù)量、多糖鏈 長(zhǎng)、PH值、存儲(chǔ)緩沖劑、存儲(chǔ)溫度和冷凍/解凍循環(huán)等因素也會(huì)影響免疫原性組合物的穩(wěn)定 性。
[0006] 因此，當(dāng)研發(fā)用于免疫原性組合物的調(diào)配物時(shí)，須考慮許多因素以確保得到安全、 穩(wěn)定、穩(wěn)固和節(jié)省成本的產(chǎn)物。所述考慮因素包括（但不限于）免疫原性組合物的化學(xué)穩(wěn) 定性（例如，糖水解、多糖解聚合、蛋白質(zhì)的蛋白水解或發(fā)酵）、免疫原性組合物的物理/熱 穩(wěn)定性（例如，聚集、沉淀、吸附）、免疫原性組合物與容器/密封物系統(tǒng)的相容性、免疫原性 組合物與無(wú)活性成分（例如，緩沖劑、鹽、賦形劑、防凍劑）之間的相互作用、制造工藝、劑型 (例如，凍干形式、液體）、裝運(yùn)、存儲(chǔ)和處理過(guò)程中所遇到的環(huán)境條件（例如，溫度、濕度、剪 切力）和制造與使用之間的時(shí)間長(zhǎng)度。
[0007] 所屬領(lǐng)域中已提出，誘導(dǎo)蛋白質(zhì)二級(jí)和三級(jí)構(gòu)型改變的硅油可能會(huì)引起在某些 蛋白質(zhì)藥物制劑中所見(jiàn)的聚集/沉淀（瓊斯（Jones)等人，2005)。舉例來(lái)說(shuō)，19世紀(jì) 80年代的若干報(bào)道涉及到由一次性塑料注射器釋放的硅油為引起人類(lèi)胰島素聚集的病 原體（辰特羅（Chantelau)和伯杰（Berger)，1985;辰特羅（Chantelau)等人，1986;辰 特羅（Chantelau)，1989 ;伯恩思坦（Bernstein)，1987 ;鮑德溫（Baldwin)，1988 ;科利爾 (Collier)和道森（Dawson)，1985)。辰特羅等人（1986)觀察到，在三次或三次以上從十劑 量的胰島素制劑抽出（使用硅化一次性注射器）后，小瓶會(huì)因硅油污染而開(kāi)始變渾濁，從而 導(dǎo)致胰島素聚集和失活（辰特羅等人，1986)。不合理的是，硅油是塑料注射器的必需組分， 因?yàn)槠溆糜跐?rùn)滑橡膠柱塞并且便利將柱塞移下注射管（即，硅油改進(jìn)調(diào)配物的可注射性）。
[0008] 此外，由于硅油還用作用于使蛋白質(zhì)吸附最小化的玻璃小瓶的涂層；在填充程序 期間防止橡膠塞堆集的潤(rùn)滑劑；對(duì)玻璃和彈性密封物的可加工性/機(jī)械加工性至關(guān)重要的 潤(rùn)滑劑；和便利針頭穿透小瓶的橡膠塞的潤(rùn)滑劑，故硅油的使用不限于注射器。另外，注射 器、玻璃小瓶、橡膠塞等的硅化并非充分可控制和標(biāo)準(zhǔn)化的過(guò)程，且因此各批次間存在硅油 含量高可變性。
[0009] 因此，所屬領(lǐng)域中不斷需要增強(qiáng)免疫原性組合物的穩(wěn)定性且抑制其沉淀的調(diào)配 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明大致涉及使免疫原性組合物穩(wěn)定且抑制其沉淀的新穎調(diào)配物。更具體來(lái) 說(shuō)，在某些實(shí)施例中，本發(fā)明針對(duì)抑制容器裝置中所包含的免疫原性組合物沉淀的新穎調(diào) 配物。在一個(gè)特定實(shí)施例中，本發(fā)明針對(duì)使免疫原性組合物對(duì)于硅油相互作用、剪切力、裝 運(yùn)攪動(dòng)等穩(wěn)定的新穎調(diào)配物。
[0011] 因此，在某些實(shí)施例中，本發(fā)明針對(duì)使多糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物穩(wěn)定的調(diào)配物，所述調(diào) 配物包含（i) pH值緩沖鹽水溶液，其中所述緩沖液具有約3. 5到約7. 5的pKa值；（ii)表面 活性劑；和（iii) 一種或多種多糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物。在一個(gè)特定實(shí)施例中，多糖-蛋白質(zhì)連 結(jié)物調(diào)配物包含于容器裝置中。在某些實(shí)施例中，所述容器裝置選自一個(gè)或多個(gè)以下組成 的群組：小瓶、小瓶塞、小瓶密封物（vial closure)、玻璃密封物、橡膠密封物、塑料密封物、 注射器、注射器塞、注射器柱塞、燒瓶、燒杯、量筒、發(fā)酵罐、生物反應(yīng)器、管道、導(dǎo)管、袋子、廣 口瓶、安瓿、藥筒和一次性筆。在某些實(shí)施例中，所述容器裝置經(jīng)硅化。
[0012] 在某些實(shí)施例中，調(diào)配物的pH值緩沖鹽水溶液具有5. 5到7. 5的pH值。在其它 實(shí)施例中，緩沖液為磷酸鹽、琥珀酸鹽、組氨酸或檸檬酸鹽。在某些實(shí)施例中，緩沖液為最終 濃度為ImM到IOmM且pH值為5. 8到6. 0的琥珀酸鹽。在一個(gè)特定實(shí)施例中，琥珀酸鹽緩 沖液的最終濃度為5mM。在其它實(shí)施例中，pH值緩沖鹽水溶液中的鹽包含氯化鎂、氯化鉀、 氯化鈉或其組合。在一個(gè)特定實(shí)施例中，PH值緩沖鹽水溶液中的鹽為氯化鈉。
[0013] 在另一實(shí)施例中，調(diào)配物中的表面活性劑選自由以下組成的群組：聚山梨醇 醋20 (polysorbate 20)(吐溫20 (Tween?20))、聚山梨醇醋40 (吐溫40)、聚山梨醇醋 60(吐溫60)、聚山梨醇酯65(吐溫65)、聚山梨醇酯80(吐溫80)、聚山梨醇酯85(吐 溫 85)))、曲通 N-101 (Triton? N-101)、曲通 X-100、氧托夕醇 40 (oxtoxynol 40)、壬 苯醇醚-9(nonoxynol-9)、三乙醇胺、三乙醇胺多肽油酸鹽、聚氧化乙稀-660羥基硬脂 酸酯（PEG-15,索羅托H15(Solutol H15))、聚氧化乙烯-35-蓖麻油酸酯（克林莫佛 EL (Cremophor EL?))、大豆卵磷脂（soy lecithin)和泊洛沙姆（poloxamer)。在一個(gè)特定 實(shí)施例中，表面活性劑為聚山梨醇酯80。在另一實(shí)施例中，調(diào)配物中聚山梨醇酯80的最終 濃度為每體積調(diào)配物至少〇. 01重量％到10重量％聚山梨醇酯80。在其它實(shí)施例中，調(diào)配 物中聚山梨醇酯80的最終濃度為每體積調(diào)配物0. 01重量％聚山梨醇酯80。在其它實(shí)施 例中，調(diào)配物中聚山梨醇酯80的最終濃度為每體積調(diào)配物0. 05重量％聚山梨醇酯80。在 另一實(shí)施例中，調(diào)配物中聚山梨醇酯80的最終濃度為每體積調(diào)配物0. 1重量％聚山梨醇酯 80。在某些其它實(shí)施例中，調(diào)配物中聚山梨醇酯80的最終濃度為每體積調(diào)配物I. 0重量％ 聚山梨醇酯80。在其它實(shí)施例中，調(diào)配物中聚山梨醇酯80的最終濃度為每體積調(diào)配物10. 0 重量％聚山梨醇酯80。
[0014] 在另一實(shí)施例中，多糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物包含一種或多種肺炎球菌多糖。在某些實(shí) 施例中，所述一種或多種肺炎球菌多糖為肺炎鏈球菌（s. pneumoniae)血清型4多糖、肺炎 鏈球菌血清型6B多糖、肺炎鏈球菌血清型9V多糖、肺炎鏈球菌血清型14多糖、肺炎鏈球 菌血清型18C多糖、肺炎鏈球菌血清型19F多糖、肺炎鏈球菌血清型23F多糖、肺炎鏈球菌 血清型1多糖、肺炎鏈球菌血清型3多糖、肺炎鏈球菌血清型5多糖、肺炎鏈球菌血清型 6A多糖、肺炎鏈球菌血清型7F多糖和肺炎鏈球菌血清型19A多糖。在某些實(shí)施例中，多 糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物調(diào)配物中的蛋白質(zhì)選自由以下組成的群組：CRM197、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、霍亂 類(lèi)毒素、百日咳類(lèi)毒素、大腸桿菌（E. coli)熱敏性類(lèi)毒素（LT)、肺炎球菌溶血素類(lèi)毒素、 肺炎球菌表面蛋白A(PspA)、肺炎球菌粘附蛋白A(PsaA)、來(lái)自鏈球菌（Streptococcus)的 C5a肽酶、流感嗜血桿菌蛋白D、卵清蛋白、鑰孔戚血藍(lán)蛋白（keyhole limpet haemocyanin， KLH)、牛血清白蛋白（BSA)和結(jié)核菌素純蛋白衍生物（purified protein derivative of tuberculin, PPD)〇
[0015] 在一個(gè)特定實(shí)施例中，多糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物調(diào)配物為7價(jià)肺炎球菌連結(jié)物（7vPnC) 調(diào)配物，其包含肺炎鏈球菌血清型4多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型6B多 糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型9V多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血 清型14多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型18C多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺 炎鏈球菌血清型19F多糖與CRM197多肽的連結(jié)物和肺炎鏈球菌血清型23F多糖與CRM 197多 肽的連結(jié)物。
[0016] 在另一特定實(shí)施例中，多糖-蛋白質(zhì)連結(jié)物調(diào)配物為13價(jià)肺炎球菌連結(jié)物 (13vPnC)調(diào)配物，其包含肺炎鏈球菌血清型4多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清 型6B多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型9V多糖與CRM 197多肽的連結(jié)物、肺炎 鏈球菌血清型14多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型18C多糖與CRM197多肽的 連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型19F多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型23F多糖與 CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型1多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型 3多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型5多糖與CRM 197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球 菌血清型6A多糖與CRM197多肽的連結(jié)物、肺炎鏈球菌血清型7F多糖與CRM197多肽的連結(jié)物 和肺炎鏈球菌血清型19A多糖與CRM197多肽的連結(jié)物。
[0017] 在其它實(shí)施例中，調(diào)配物另外包含一種或多種腦膜炎球菌多糖、一種或多種腦膜 炎球菌抗原蛋白或其組合。在其它實(shí)施例中，調(diào)配物另外包含一種或多種鏈球菌多糖、一種 或多種鏈球菌抗原蛋白或其組合。
[0018] 在某些其它實(shí)施例中，調(diào)配物另外包含一種或多種佐劑。例示性適當(dāng)佐劑將于下 文中描述。
[0019] 在其它實(shí)施例中，本發(fā)明針對(duì)使鏈球菌C5a肽酶（SCP)組合物穩(wěn)定的調(diào)配物，所述 調(diào)配物包含（i)pH值緩沖鹽水溶液，其中所述緩沖液具有約3. 5到約6. 5的pKa值；（ii) 表面活性劑；和（iii)鏈球菌C5a肽酶。在一個(gè)特定實(shí)施例中，SCP調(diào)配物包含于容器裝置 中。在某些實(shí)施例中，所述容器裝置選自一個(gè)或多個(gè)以下組成的群組：小瓶、小瓶塞、小瓶密 封物、玻璃密封物、橡膠密封物、塑料密封物、注射器、注射器塞、注射器柱塞、燒瓶、燒杯、量 筒、發(fā)酵罐、生物反應(yīng)器、管道、導(dǎo)管、袋子、廣口瓶、安瓿、藥筒和一次性筆。
[0020] 在其它實(shí)施例中，調(diào)配物的pH值緩沖鹽水溶液具有5. 5到7. 5的pH值。在其它 實(shí)施例中，緩沖液為琥珀酸鹽、組氨酸、磷酸鹽或檸檬酸鹽。在一個(gè)特定實(shí)施例中，緩沖液為 最終濃度為ImM到IOmM且p