在耐缺氧及抗疲勞中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開(kāi)一種蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl在耐缺氧及抗疲勞中的用途，屬于中藥和 保健品領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 生活在現(xiàn)在化都市，感受著城市的快節(jié)奏，人們都摒住呼吸，大步向前，為不落后 于他人，為有一份穩(wěn)定工作，為擁有一個(gè)幸福家庭而努力著，拼搏著。而在我們努力、拼搏的 同時(shí)，疲勞也如影隨形，不斷地侵蝕著每一位"工作狂"身體，讓我們身心憔悴。在1987年美 國(guó)疾病控制中心就定義了慢性疲勞綜合征的概念，1993年英國(guó)一項(xiàng)大型調(diào)查顯示：約20% 的男性和25%的女性總是感到疲勞；2001~2002年的調(diào)查則顯示，10萬(wàn)人中有1. 2萬(wàn)人患有 至少持續(xù)6個(gè)月的慢性疲勞；日本勞工部在2000年3月公布日本全國(guó)有1/3的工齡人口患 有慢性疲勞綜合征，疲勞已經(jīng)成為當(dāng)今社會(huì)影響我們身體健康的一大重要因素。
[0003] 氧是人體進(jìn)行新陳代謝的關(guān)鍵物質(zhì)，是人體生命活動(dòng)的第一需要，缺氧時(shí)一種相 當(dāng)常見(jiàn)的病理過(guò)程，由于氧氣的攝入不足以供應(yīng)機(jī)體所需，導(dǎo)致肺泡氧分壓和血樣飽和度 降低，組織細(xì)胞不能從血液中獲得所需氧氣，從而造成機(jī)體損傷，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致機(jī)體死亡， 因此，軍事、體育、航空航天、水下作業(yè)、旅游等領(lǐng)域越來(lái)越重視對(duì)缺氧的研宄。
[0004] 蝙蝠蛾擬青霉為天然冬蟲(chóng)夏草中分離到的內(nèi)寄生菌，是天然冬蟲(chóng)夏草中普遍存在 的一種蟲(chóng)草的無(wú)性型，其菌絲體發(fā)酵物具有廣泛的藥理活性，可以作為天然冬蟲(chóng)夏草有效 成分和功效的原料，開(kāi)發(fā)前景廣闊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開(kāi)一種蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl在耐缺氧及抗疲勞的用途，具有明顯的醫(yī) 療效果。
[0006] 本發(fā)明所述的水提物以可用于保健食品的蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl菌絲體為原料， 采用熱水浸提方法獲得，保證用藥的安全性。
[0007] 本發(fā)明所述的蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40以蝙蝠蛾擬青霉菌株（RCEF1429)為原始菌 株，經(jīng)誘變篩選獲得，所述的菌株已于2014年12月26日保藏《中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心》， 保藏號(hào)為：CCTCC No :M 2014670 ;命名為cAe/7 PH40 ;蝙蝠蛾擬青 霉菌株P(guān)H40。
[0008] 本發(fā)明所述的蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)iVK提物，是通過(guò)以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0009] 1、稱(chēng)取蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl凍干干粉，按照質(zhì)量體積比（g:ml)l:10~1 :50的 比例加入去離子水，50~100°C提取2~5小時(shí)，重復(fù)一次，合并兩次提取的上清液，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)后凍干，得蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H 4tl水提物干粉。
[0010] 2、取蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物干粉，加入藥用輔料，制備得到蝙蝠蛾擬青霉 菌株P(guān)H4tl水提物制劑。
[0011] 采用小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、跑步機(jī)實(shí)驗(yàn)、疲勞轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)首次證明蝙蝠蛾擬青霉菌株 PH4tl水提物抗疲勞活性，采用亞硝酸鈉中毒實(shí)驗(yàn)、常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)、急性腦缺血缺氧實(shí)驗(yàn)首 次證明蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物抗缺氧活性，為蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H 4(|水提物作為抗 疲勞和耐缺氧藥物及保健品的研發(fā)提供依據(jù)。
[0012] 本發(fā)明的積極效果在于：提供了蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl制備抗疲勞和耐缺氧藥物 及保健品藥物中的用途，并具有明顯的醫(yī)療效果。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 為了能夠更好地了解本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容，下面通過(guò)具體實(shí)施案例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳 細(xì)描述。
[0014] 實(shí)施例1 取蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl菌絲體100g，按質(zhì)量體積比（g :ml) 1:20的比例加入去離子 水2L，60°C提取4h，重復(fù)提取一次，合并兩次的上清液，60°C減壓濃縮后凍干得提取物干粉 1〇
[0015] 實(shí)施例2 1、取蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl菌絲體100g，按質(zhì)量體積比（g :ml) 1:30的比例加入去離 子水3L，80°C提取3. 5h，重復(fù)提取一次，合并兩次的上清液，80°C減壓濃縮后凍干得提取物 干粉2。
[0016] 2、取提取物干粉2,加入淀粉、硬脂酸鎂等藥用輔料，制備得到蝙蝠蛾擬青霉菌株 PH4tl水提物制劑2。
[0017] 實(shí)施例3 1、 取蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl菌絲體1000g，按質(zhì)量體積比（g :ml )1:30的比例加入去離 子水30L，60°C提取3. 5h，重復(fù)提取一次，合并兩次的上清液，80°C減壓濃縮后凍干得提取 物干粉3 ; 2、 取提取物干粉3,加入碳酸氫鈉、羧甲基纖維素鈉等藥用輔料，制備得到蝙蝠蛾擬青 霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑3。
[0018] 以下試驗(yàn)表明本發(fā)明在抗疲勞、耐缺氧保健品中的用途 1、材料和方法 I. 1受試物實(shí)施例1干粉1、實(shí)施例2干粉2、實(shí)施例3制劑3。
[0019] 1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供健康昆明種雌性小白鼠240只，體重18-22g。隨機(jī)分為 4組，每組60只。
[0020] 1. 3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境 溫度22 °C，濕度52%。
[0021] 1.4劑量選擇 該保健品制劑的推薦劑量為成人(按體重60kg計(jì)算）1.2g，按人體推薦量的10倍對(duì)小 鼠進(jìn)行給藥，三組受試物分別用生理鹽水配置成濃度為〇. 〇2g/ml的溶液，小鼠灌胃給藥30 天后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，灌胃給藥體積為〇. lml/10g。同時(shí)設(shè)置一空白對(duì)照組，用生理鹽水代替 受試物進(jìn)行給藥，灌胃體積與受試物相同。
[0022] 1.5實(shí)驗(yàn)方法 1.5. 1小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑30天后，于末次給藥后30min，將 各組小鼠分別放在有機(jī)玻璃棒上，使肌肉處于靜力緊張狀態(tài)。進(jìn)行小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)，將轉(zhuǎn) 棒轉(zhuǎn)速設(shè)置為15轉(zhuǎn)/分鐘，對(duì)其進(jìn)行訓(xùn)練，在各小鼠在轉(zhuǎn)棒上跌落3次后，開(kāi)始記錄小鼠由 于肌肉疲勞從玻璃棒上跌下的時(shí)間，平行3次。記錄小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒時(shí)間。設(shè)置最高小鼠轉(zhuǎn) 棒時(shí)間為300秒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1. 1所示。
[0023] 表1. 1小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒時(shí)間
如上表所示，小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉PH4tl制劑后，可以顯著提高小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒 時(shí)間，增強(qiáng)小鼠肢體協(xié)調(diào)能力，結(jié)果P〈〇. 005,具有顯著性差異。
[0024] 1.5.2小鼠耐力跑實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑30天后，進(jìn)行小鼠耐力實(shí)驗(yàn)，將小 鼠置于FT-200動(dòng)物跑步機(jī)中。先放置好動(dòng)物，對(duì)小鼠訓(xùn)練2min，使其了解逃離帶電區(qū)域后， 將轉(zhuǎn)速設(shè)為20rpm，電流調(diào)到最高，記錄5min內(nèi)小鼠被電擊的次數(shù)。結(jié)果如表1. 2所示。
[0025] 表1. 2小鼠耐力跑電擊次數(shù)
結(jié)果顯示，蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑可以顯著提高小鼠跑步時(shí)間，降低小鼠 電擊次數(shù)，結(jié)果P〈〇. 005,具有顯著性差異。
[0026] L 5. 3小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑30天后，進(jìn)行小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)， 將小鼠置于負(fù)重游泳測(cè)試儀中，每組鼠尾部系以體重10%的負(fù)荷，放入水溫27±1 °C，水深 為小鼠3倍體長(zhǎng)的桶式游泳池中（d=50cm)，測(cè)定各組小鼠持續(xù)游泳時(shí)間和力竭時(shí)間。結(jié)果 如表1. 3所示。
[0027] 表1.3小鼠負(fù)重游泳時(shí)間
結(jié)果顯示，蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑可以顯著提高小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，延長(zhǎng) 小鼠力竭時(shí)間，結(jié)果P〈〇. 005,具有顯著性差異。
[0028] 1. 5. 4小鼠耐缺氧實(shí)驗(yàn) 1. 5. 4. 1小鼠常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物制劑30天后，進(jìn)行常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)， 125ml廣口瓶中放IOg鈉石灰。小鼠放到廣口瓶中，塞上膠塞，采用凡士林封閉。測(cè)量小鼠 存活時(shí)間。結(jié)果如表1.4所示。
[0029] 表1. 4小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蝙蝠蛾擬青霉菌株水提物制劑可以顯著提高常壓缺氧條件下小鼠死亡 時(shí)間，結(jié)果P〈〇. 005,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0030] 1.5. 4. 2亞硝酸鈉中毒實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株水提物制劑30天后，末次灌胃Ih后，各組動(dòng)物腹 腔注射亞硝酸鈉240mg/kg*bw,立即記時(shí)，記錄各受試小鼠的存活時(shí)間。結(jié)果如表1.5所 不O
[0031] 表1. 5亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蝙蝠蛾擬青霉菌株水提物制劑可以顯著提高亞硝酸鈉中毒小鼠死亡時(shí) 間，結(jié)果p〈0. 005,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0032] 1.5. 4. 3急性腦缺血缺氧實(shí)驗(yàn) 小鼠經(jīng)灌胃給藥蝙蝠蛾擬青霉菌株水提物制劑30天后，在末次灌胃Ih后，在乙醚淺 麻醉下，用粗剪刀自小鼠雙耳連線處快速斷頭，逐只記錄小鼠斷頭后至小鼠死亡時(shí)間。結(jié)果 如表1. 6所示。
[0033] 表1. 6急性腦缺血缺氧實(shí)驗(yàn)小鼠存活時(shí)間 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蝙蝠蛾擬青霉菌株水提物制劑可以顯著提高急性腦缺血缺氧中毒小鼠 死亡時(shí)間，結(jié)果p〈0. 005,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40在制備耐缺氧及抗疲勞病藥物中的用途；所述的菌株已于 2014年12月26日保藏《中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心》，命名為cAe/? PH40 ;蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40,保藏號(hào)為：CCTCCNo:M2014670。2. -種蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40水提物，是通過(guò)以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 利用權(quán)利要求1所述蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40制成的凍干干粉，按照質(zhì)量體積比 (g:ml) 1:10~1 :50的比例加入去離子水，50~100°C提取2~5小時(shí)，重復(fù)一次，合并兩 次提取的上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后凍干，得蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H4tl水提物干粉。3. 以權(quán)利要求2制備的蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40菌粉為主要成分，加以多種藥用輔料， 制備得到的片劑、粉劑、膠囊劑及口服制劑。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40在制備耐缺氧及抗疲勞病藥物中的用途，具有明顯的醫(yī)療效果。以蝙蝠蛾擬青霉菌株P(guān)H40菌粉為主要成分，加以多種藥用輔料，制備得到的片劑、粉劑、膠囊劑及口服制劑。CCTCC NO： M 201467020141226
【IPC分類(lèi)】A23L1/29, A61P39/00, C12N1/14, A61K36/068
【公開(kāi)號(hào)】CN104922165
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510280984
【發(fā)明人】滕利榮, 王娟, 劉燕隔, 李蘭洲, 胡文繼, 張洋, 孟慶繁, 王迪, 權(quán)宇彤, 逯家輝
【申請(qǐng)人】吉林大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年5月28日