穩(wěn)定的人免疫缺陷病毒(HIV)包膜(EnV)三聚體疫苗及其使用方法
【專利說明】穩(wěn)定的人免疫缺陷病毒（HIV)包膜（EnV)三聚體疫苗及其 使用方法
[0001] 關于聯(lián)邦資助研究的聲明 本發(fā)明在由國立衛(wèi)生研究院（NationalInstitutesofHealth(NIH))/國家過 敏和感染性疾病研究院（NationalInstituteofAllergyandInfectiousDiseases (NIAID))所授予的基金號AI096040和AI084794的政府支持下進行。政府享有本發(fā)明的某 些權利。
[0002] 發(fā)明背景 引出對抗病毒的細胞免疫應答的疫苗試圖反映全球病毒的多樣性以有效治療或預防 病毒感染。對于HIV疫苗，穩(wěn)固及各種各樣的人免疫缺陷病毒（HIV)-特異性T細胞應答的 引發(fā)是有效的HIV疫苗所需要的。高度可變的包膜蛋白（Env)是對抗HIV的中和抗體的主 要目標，且可根據(jù)引出這些抗體應答來配合制備疫苗抗原。為此，積極尋求模擬天然HIV病 毒體上的Env的三聚體結(jié)構(gòu)的免疫原作為基于抗體的HIV疫苗。然而，已證明難以產(chǎn)生引 出各種各樣的中和抗體應答的生物化學上穩(wěn)定的三聚體的Env免疫原。
[0003]因此，本領域中存在對于開發(fā)疫苗的未得到滿足的需求，所述疫苗包括新穎的、優(yōu) 化的三聚體的Env免疫原，所述三聚體的Env免疫原可廣泛引出中和抗體應答以允許更成 功的HIV接種結(jié)果。
[0004] 發(fā)明概述 在第一方面，本發(fā)明以具有三個gpl40多肽的穩(wěn)定的三聚體為特征，其中至少一個（如 兩個或每個）gpl40多肽包括與SEQIDNO: 2 (mEnv+)具有至少90%同一性（如至少91%、 92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 同一性）的氨基酸序列，或包括具有SEQIDN0: 2 (mEnv+)的序列的氨基酸序列。
[0005] 在相關的第二方面，本發(fā)明以具有三個gpl40多肽的穩(wěn)定的三聚體為特征，其中 至少一個（如兩個或每個）gpl40多肽包括基本上具有SEQIDNO: 1 (mEnv)或SEQIDN0: 3 (cEnv)的序列（如99%或更多同一性）的氨基酸序列，或包括具有SEQIDNO: 1 (mEnv) 或SEQIDNO: 3 (cEnv)的序列的氨基酸序列。
[0006] 在一些實施方案中，所述穩(wěn)定的三聚體是異源三聚體。所述穩(wěn)定的多肽異源三聚 體可包括兩個嵌合Envlgpl40多肽（如mEnv和/或mEnv+)，其各自包括與SEQIDNO: 1 或 2具有至少 90% 同一性（如至少 91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性）的 氨基酸序列，或包括具有SEQIDNO: 1或2的序列的氨基酸序列，及一個分化體（clade)C Envgpl40 多肽（如具有SEQIDNO: 3 的 "cEnv"），其包括與SEQIDNO: 3 (cEnv)具有 至少90%同一性（如至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性）的氨基酸 序列，或包括具有SEQIDNO: 3 (cEnv)的序列的氨基酸序列（如兩個mEnv和一個cEnv; 兩個mEnv+和一個cEnv;或一個mEnv、一個mEnv+、和一個cEnv)。在其它實施方案中，所 述穩(wěn)定的異源三聚體可包括一個嵌合Envlgpl40多肽（如mEnv和/或mEnv+)，其包括與 SEQIDNO: 1 或 2 具有至少 90% 同一性（如至少 91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99%同一性）的氨基酸序列，或包括具有SEQIDNO: 1或2的序列的氨基酸序列，及兩個分 化體CEnvgpl40多肽（如cEnv)，其各自包括與SEQIDNO: 3具有至少90%同一性（如 至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性）的氨基酸序列，或包括具有SEQ IDNO: 3的序列的氨基酸序列（如一個mEnv和兩個cEnv;-個mEnv+和兩個cEnv)。在一 些實施方案中，穩(wěn)定的異源三聚體包括兩種不同的嵌合Envl序列的組合（如一個mEnv和 兩個mEnv+ ;兩個mEnv和一個mEnv+ ;或一個mEnv、一個mEnv+、和cEnv)。在一些實施方案 中，穩(wěn)定的異源三聚體包括cEnv和相同的Envl多肽中的兩個（如兩個mEnv和一個cEnv; 兩個mEnv+和一個cEnv)。在其它實施方案中，穩(wěn)定的異源三聚體包括一個cEnv和兩個不 同的嵌合Envl多肽（如一個cEnv、一個mEnv，和一個mEnv+)。在其它實施方案中，穩(wěn)定的 異源三聚體包括兩個cEnv多肽和一個嵌合Envl多肽（如兩個cEnv和一個mEnv、或兩個 cEnv和一個mEnv+)。
[0007] 或者，可制備穩(wěn)定的gpl40Env三聚體，其中三聚體中的一個或兩個gpl40Env多 肽中具有SEQIDNO: 4的序列（嵌合gpl40Env2，"mEnv2"）或SEQIDNO: 5的序列（嵌 合gpl40Env3，"mEnv3")。在另一實施方案中，所述穩(wěn)定的三聚體具有三個gpl40多肽，其 中至少一個（如兩個或每個）gpl40多肽包括與SEQIDN0: 4或5具有至少90%同一性 (如至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性）的氨基酸序列，或包括具有 SEQIDN0: 4或5的序列的氨基酸序列。優(yōu)選地，以與修飾mEnv、mEnv+、或cEnv(其各自 擁有三聚化結(jié)構(gòu)域）類似的方式來修飾mEnv2或mEnv3,如下文討論。因此，在本發(fā)明的一 些實施方案中，可制備穩(wěn)定的gpl40Env三聚體，其具有下列組成的多肽：一個mEnv和兩個 mEnv2 ;兩個mEnv和一個mEnv2 ;-個mEnv+ 和兩個mEnv2 ;兩個mEnv+ 和一個mEnv2 ; - 個cEnv和兩個mEnv2 ;兩個cEnv和一個mEnv2 ; -個mEnv、一個mEnv+、和一個mEnv2 ; 一個mEnv、一個cEnv、和mEnv2 ; -個mEnv+、一個cEnv、和一個mEnv2 ; -個mEnv和兩個 mEnv3 ;兩個mEnv和一個mEnv3 ; -個mEnv+ 和兩個mEnv3 ;兩個mEnv+ 和一個mEnv3 ; 一個cEnv和兩個mEnv3 ;兩個cEnv和一個mEnv3 ; -個mEnv、一個mEnv+、和一個mEnv3 ; 一個mEnv、一個cEnv和mEnv3 ; -個mEnv+、一個cEnv、和一個mEnv3 ; -個mEnv、一個 mEnv2、和一個mEnv3 ; -個mEnv+、一個mEnv2、和一個mEnv3 ;或一個cEnv、一個mEnv2、和 一個mEnv3〇
[0008] 在第三方面，本發(fā)明以包括第一或第二方面的穩(wěn)定的三聚體的組合物為特征。在 實施方案中，第三方面的組合物包括一種或更多種不同的穩(wěn)定的三聚體。在其它實施方案 中，所述不同的穩(wěn)定的三聚體（一種或更多種）具有三個gpl40多肽，其中至少一個（如 兩個或每個）gpl40多肽包含與SEQIDN0: 1、2、3、4或5具有至少90%同一性（如至少 91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 同一1性）的氨基酸序列，或包含具有SEQID NO: 1、2、3、4或5的序列的氨基酸序列。在其它實施方案中，所述不同的穩(wěn)定的三聚體（一 種或更多種）可為同三聚體或異源三聚體。在一些實施方案中，第三方面的組合物進一步 包括藥學上可接受的載體、賦形劑、或稀釋劑、和/或佐劑。
[0009] 在第四方面，本發(fā)明以包括第三方面的任一種組合物的疫苗為特征。在一些實施 方案中，疫苗用于治療有需要的對象中人免疫缺陷病毒（HIV)感染或降低其免疫缺陷病毒 (HIV)感染風險。在一些實施方案中，在給藥至對象之后，疫苗引出中和抗-HIV抗血清（如 中和抗-HIV-1抗血清）的產(chǎn)生?？?HIV抗血清可中和例如選自分化體A、分化體B、和分 化體C的任一種或更多種的HIV(如HIV-1)。. 在第五方面，本發(fā)明以具有編碼至少一種（如兩種、或三種或更多種）gpl40多肽的核 苷酸序列的核酸分子為特征，其中至少一種gpl40多肽包括：（a)與SEQIDNO: 1具有至 少95%同一性（如至少96%、97%、98%、或99%同一性）的氨基酸序列，或具有SEQIDN0:1 的序列的氨基酸序列；（b)與SEQIDNO: 2具有至少95%同一性（如至少96%、97%、98%、 或99%同一性）的氨基酸序列，或具有SEQIDNO: 2的序列的氨基酸序列；或（c)具有SEQ IDNO: 3的序列的氨基酸序列；⑷具有SEQIDNO: 4的序列的氨基酸序列；（e)具有SEQ IDNO: 5的序列的氨基酸序列或它們的組合物。在一些實施方案中，核酸分子進一步包括 核苷酸序列，其編碼一種或更多種不同的（如第二、第三、或第四）gpl40多肽（如與SEQID NO: 1、2、3、4和/或5具有至少95%同一性（如至少96%、97%、98%、或99%同一性），或具 有SEQIDNO: 1、2、3、4和/或5的序列的gpl40多肽）。在一些實施方案中，核酸分子包 括一個或更多個內(nèi)部核糖體進入位點（IRES)序列以允許來自單核酸分子轉(zhuǎn)錄物的多重肽 (multiplepeptide)或多肽鏈的表達。
[0010] 在第六方面，本發(fā)明以包括第五方面的一種或更多種核酸分子的載體為特征。在 一些實施方案中，所述載體為腺病毒載體或痘病毒載體。腺病毒載體可來源于，例如，重組 腺病毒血清型11 (Adll)、腺病毒血清型15(Adl5)、腺病毒血清型24(Ad24)、腺病毒血清型 26 (Ad26)、腺病毒血清型34 (Ad34)、腺病毒血清型35 (Ad35)、腺病毒血清型48 (Ad48)、腺病 毒血清型49 (Ad49)、腺病毒血清型50 (Ad50)、Pan9 (AdC68)、或其嵌合變體（如腺病毒血清 型5HVR48(Ad5HVR48))。痘病毒載體可源于，例如，修飾的安卡拉痘苗病毒（MVA)。 在第七方面，本發(fā)明提供治療有需要的對象中HIV感染或降低其HIV感染風險的方法， 所述方法通過向?qū)ο螅ɡ绮溉閯游?，例如，人）施用治療有效量的本發(fā)明的組合物（如第 一或第二方面的任一種穩(wěn)定的三聚體、第三方面的組合物、第四方面的疫苗、第五方面的核 酸分子、和/或第六方面的載體）。根據(jù)本發(fā)明的該第七方面，治療可為治療性的或預防性 的。
[0011] 在第八方面，本發(fā)明提供減少感染HIV的對象中HIV介導的活動的方法，所述方法 通過向?qū)ο笫┯弥委熡行Я康谋景l(fā)明的組合物（如第一或第二方面的任一種穩(wěn)定的三聚 體、第三方面的組合物、第四方面的疫苗、第五方面的核酸分子、和/或第六方面的載體）。 在一些實施方案中，HIV介導的活動為病毒傳播、感染、或細胞融合。細胞融合可為，例如， 靶細胞進入或合胞體形成。在一些實施方案中，與治療之前的對象的HIV滴度或感染HIV 但未用本發(fā)明組合物（一種或更多種）治療的對照對象的HIV滴度相比，在向?qū)ο螅ɡ?哺乳動物，例如，人）施用疫苗之后，感染HIV的對象中的HIV滴度減小（如至少約5%、10%、 15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、 94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更多。
[0012] 在一些實施方案中，經(jīng)下列途徑施用所述組合物（如疫苗）：肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮 內(nèi)、經(jīng)皮、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、病灶內(nèi)、顱內(nèi)、關節(jié)內(nèi)、前列腺內(nèi)、胸膜內(nèi)、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、玻璃體 內(nèi)、陰道內(nèi)、直腸內(nèi)、外用（topically)、瘤內(nèi)、腹膜、皮下、結(jié)膜下、囊內(nèi)、粘膜、心包內(nèi)、臍內(nèi) (intraumbilically)、眼內(nèi)、口服、外用（topically)、局部（locally)、通過吸入、通過注 射、通過灌輸、通過持續(xù)灌輸、通過局部灌注直接浸浴靶細胞、通過導管、通過灌洗、通過管 飼法、以乳霜或以脂質(zhì)組合物。在一些實施方案中，向?qū)ο笫┯弥辽僖粍┝浚ㄈ?、2、3、4、5、 6、7、8、9、10、或更多劑量）的組合物或每天、每周、每月、或每年向?qū)ο笫┯弥辽僖粍┝浚ㄈ?1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、或更多劑量）?？上薅ㄊ┯弥芷冢ㄈ?-4周、1-12個月、1-20年） 或可持續(xù)對象的一生。在其它實施方案中，向?qū)ο笫┯弥辽賰蓜┝浚ㄈ?、3、4、5、6、7、8、9、 10、或更多劑量）的組合物。在又一實施方案中，將組合物作為基礎免疫（prime)組合物或 加強免疫（boost)組合物或以基礎-加強免疫（prime-boost)方案向所述對象施用。在優(yōu) 選的實施方案中，將本發(fā)明的一種或更多種組合物（如疫苗）作為加強免疫施用。
[0013] 在另一優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明以治療對象中HIV感染或降低其HIV感染風險 的方法為特征，所述方法通過以基礎-加強免疫接種方案中的基礎免疫組合物施用疫苗， 所述疫苗包括第一多肽，所述第一多肽與SEQIDN0: 6具有至少85%氨基酸序列同一性 (如 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 同 一1性），或具有 SEQIDN0: 6的序列，或包括至少一種包括編碼該第一多肽的第一核酸分子的第一載體 (如腺病毒或痘病毒載體）。任選地，也可將第二多肽與第一多肽組合施用，所述第二多肽 與SEQIDN0: 7 具有至少 85% 同一性（如 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、 96%、97%、98%、或99%同一性），或具有SEQIDN0:7的序列，或，若施用編碼第一多肽的第 一載體，則可將包括編碼第二多肽的第二核酸分子的第二載體（如腺病毒或痘病毒載體） 與第一載體組合施用?；A-加強免疫方案中的加強免疫組合物可包括一種或更多種本發(fā) 明的組合物（如第一或第二方面的任一種穩(wěn)定的三聚體、第三方面的組合物、第四方面的 疫苗、第五方面的核酸分子、和/或第六方面的載體）。在另一實施方案中，基礎 -加強免疫 方案中的基礎免疫組合物可包括具有SEQIDN0: 8-32中任一種序列（一種或更多種）的 多肽（一種或更多種），或一種或更多種包括編碼SEQIDN0: 8-32中任一種的核酸分子的 載體，然后包括一種或更多種本發(fā)明的組合物的加強免疫（如第一或第二方面的任一種穩(wěn) 定的三聚體、第三方面的組合物、第四方面的疫苗、第五方面的核酸分子、和/或第六方面 的載體）。
[0014] 在其它實施方案中，一種或更多種本發(fā)明的組合物（如疫苗）作為基礎-加強免 疫方案中的基礎免疫組合物施用且加強免疫組合物是不同的疫苗組合物，如包括以下的疫 苗：一種或更多種多肽，所述多肽與任一種或更多種SEQIDN0: 6-32的序列具有至少85% 氨基酸序列同一性（如 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或 99% 同一性），或具有任一種或更多種SEQIDNO: 6-32(優(yōu)選SEQIDN0: 6和/或7的多肽）， 或包括一種或更多種載體（如腺病毒或痘病毒載體），所述載體各自包括編碼一種或更多 種多肽的核酸分子，所述多肽與一種或更多種SEQIDN0: 8-32具有至少85%同一性（如 86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性），或具有一種 或更多種SEQIDN0: 8-32的序列（優(yōu)選編碼SEQIDN0: 6和/或7的多肽的載體）。
[0015] 在一些實施方案中，例如，可向?qū)ο笠苑禽d體組合物施用本發(fā)明的多肽組合物 (如本發(fā)明的穩(wěn)定的gpl40Env三聚體）。施用的多肽組合物可包括介于約1Pg和1mg 之間的穩(wěn)定的Env三聚體，并更優(yōu)選包括介于50Pg和300Pg之間的本發(fā)明的穩(wěn)定的Env 三聚體。
[0016] 在輸送載體為病毒的其它實施方案中，可向?qū)ο笫┯弥辽偌slxlO3病毒顆粒（vp)/ 劑量或介于ΙχΙΟ1和1x10 14vp/劑量之間、優(yōu)選介于lxl〇3和1x10 12vp/劑量之間、并更優(yōu) 選介于lxlO5和lxlO11vp/劑量之間?？稍诒┞肚盎蛟\斷前例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、 15、20、30、35、40、45、50、55、或60分鐘，2、4、6、10、15、或24小時，2、3、5、或7天，2、4、6或 8周，或甚至3、4、或6個月施用所述組合物，或可在HIV診斷后或暴露于HIV后15-30分鐘 或 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、20、24、48、或 72 小時，2、3、5、或 7 天，2、4、6 或 8 周，3、4、6、 或9個月，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20年或更長時間向?qū)ο笫┯?。每天、每周、每月或?年向所述對象施用一次一或更多劑量的組合物。當治療HIV感染時，可在HIV感染或疾病 /綜合征（如獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS))的癥狀出現(xiàn)或確診之前，或在診斷或癥狀變 得明顯之后向?qū)ο笫┯帽景l(fā)明的組合物（一種或更多種）（如第一、第二、或第三方面的任 一種穩(wěn)定的三聚體、第四或第五方面的組合物、第六方面的疫苗、第七方面的核酸分子、和/ 或第八方面的載體）。可在例如，癥狀的診斷或臨床識別之后立即施用所述組合物（一種或 更多種）或在癥狀的診斷或檢測后2、4、6、10、15、或24小時，2、3、5、或7天，2、4、6或8周， 或甚至3、4、或6個月施用所述組合物（一種或更多種）。
[0017] 在第九方面，本發(fā)明提供用于治療有需要的對象中HIV感染或降低其HIV感染風 險的疫苗的制備方法。所述方法包括以下步驟：(a)將本發(fā)明第二方面的核酸（如進一步包 括第八方面的載體的核酸）與細胞接觸；及（b)使核酸在細胞中表達以形成穩(wěn)定的三聚體。 在一些實施方案中，所述方法經(jīng)體外或離體（exw>o)實施。在一些實施方案中，所述細胞 是細菌、植物或哺乳動物的細胞（如人或非人哺乳動物的細胞）。在優(yōu)選的實施方案中，所 述哺乳動物的細胞是293T細胞。
[0018] 在最后的方面，本發(fā)明以試劑盒為特征，所述試劑盒包括：(a)本發(fā)明的組合物 (如第一、第二、或第三方面的任一種穩(wěn)定的三聚體、第四或第五方面的組合物、第六方面的 疫苗、第七方面的核酸分子、和/或第八方面的載體，如包括mEnv和/或mEnv+三聚體和 cEnv三聚體的疫苗）；(b)藥學上可接受的載體、賦形劑、或稀釋劑；及（c)其使用說明。所 述試劑盒可任選地包括佐劑。
[0019] 在本發(fā)明所有方面的優(yōu)選的實施方案中，所述對象是哺乳動物，優(yōu)選靈長類，例如人。
[0020] 定義 在此使用的術語"約"表示所列舉值的+/- 10%。
[0021] "腺病毒"表示中等尺寸的（90-100nm)、非包膜的二十面體病毒，其包括衣殼和雙 鏈線型DNA基因組。所述腺病毒可為天然存在的、但孤立的腺病毒（如sAd4287、sAd4310A、 或sAd4312)或為重組腺病毒（如復制缺陷型或有復制能力的sAd4287、sAd4310A、或 sAd4312、或它們的嵌合變體）。
[0022] 在此使用的"施用"表示向?qū)ο蠼o予一定劑量的藥物組合物（如本發(fā)明的組合物， 例如第一或第四方面的任一種疫苗、第三方面的組合物、第五方面的核酸分子、和/或第六 方面的載體）的方法?？山?jīng)下列途徑施用在此描述的方法中使用的組合物，例如，肌內(nèi)、靜 脈內(nèi)、皮內(nèi)、經(jīng)皮、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、病灶內(nèi)、顱內(nèi)、關節(jié)內(nèi)、前列腺內(nèi)、胸膜內(nèi)、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、 玻璃體內(nèi)、陰道內(nèi)、直腸內(nèi)、外用、瘤內(nèi)、腹膜、皮下、結(jié)膜下、囊內(nèi)、粘膜、心包內(nèi)、臍內(nèi)、眼內(nèi)、 口服、外用、局部、通過吸入、通過注射、通過灌輸、通過持續(xù)灌輸、通過局部灌注直接浸浴靶 細胞、通過導管、通過灌洗、通過管飼法、以乳霜或以脂質(zhì)組合物。優(yōu)選的施用方法可取決于 各種因素（如施用組合物的組分和欲治療的病情的嚴重性）而改變。
[0023] 在此使用的術語"分化體"是指根據(jù)它們的遺傳相似性分類的相關人免疫缺陷病 毒（HIV)。目前存在三組HIV-1分離株：M、N和0。Μ組（主株）由至少十個分化體，A到J 構(gòu)成。0組（外圍株）可由相似數(shù)目的分化體構(gòu)成。N組是既未被分類至Μ組又未被分類至 0組的新的HIV-ι分離株。在某些示例性的實施方案中，在此描述的本發(fā)明的組合物（如 第一或第四方面的任一種疫苗、第三方面的組合物、第五方面的核酸分子、和/或第六方面 的載體）將識別并引起對抗二、三、四、五、六、七、八、九、十或更多個分化體和/或兩組或更 多組HIV的免疫應答（如中和抗-HIV抗血清）。
[0024] 貫穿本說明書和權利要求，將理解詞語"包含（comprise)"，或變型例如"包括 (comprises) "或"含有（comprising,) "意味著包括所述整數(shù)或整數(shù)組但不排除任何其它 整數(shù)或整數(shù)組。
[0025] 在此使用的術語"包膜糖蛋白"是指，但不限于，在HIV病毒體的包膜表面和感染 HIV的細胞的質(zhì)膜表面上表達的糖蛋白。辦κ基因編碼gpl60,所述gpl60經(jīng)蛋白水解裂解 成gpl20和gp41包膜（Env)蛋白。Gpl20在具有⑶4受體的靶細胞（例如，如T-輔助細 胞）上結(jié)合此類受體。Gp41以非共價方式結(jié)合gpl20,并提供第二個步驟，通過所述步驟 HIV進入細胞。gp41原本掩埋在病毒包膜內(nèi)，但是當gpl20結(jié)合⑶4受體，gpl20改變自身 構(gòu)型導致gp41被暴露，在此它可協(xié)助與宿主細胞的融合。
[0026] "基因產(chǎn)物"表示包括自基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，及自那些mRNA翻譯的多肽。
[0027] "異源核酸分子"或"異源基因"表示可被插入本發(fā)明的載體（如腺病毒或痘病毒 載體）中的任何外源核酸分子（如編碼本發(fā)明的優(yōu)化的gpl40Env多肽的核酸分子），用 于轉(zhuǎn)移至細胞、組織、或有機體，用于由異源核酸分子或基因編碼的感興趣的基因產(chǎn)物或其 片段的后續(xù)表達。在優(yōu)選的實施方案中，可向作為本發(fā)明一部分的細胞或?qū)ο笫┯玫漠愒?核酸分子可包括，但不限于，編碼至少一種優(yōu)化的嵌合Env多肽（如嵌合Envl多肽，例如 mEnv和mEnv+)和/或分化體CEnv多肽（如分化體CEnvl多肽，例如cEnv)的核酸分子。
[0028] "人免疫缺陷病毒"或"HIV"表示慢病毒屬的病毒，其為逆轉(zhuǎn)錄病 毒漢e&oKirii/ad家族的一部分，并包括，但不限于，HIV-1型（HIV-1)和HIV-2型（HIV-2) 兩種感染人類的HIV。
[0029] "免疫應答"表示對象（如人）的免疫系統(tǒng)對于抗原或抗原決定簇的任何應答。示 例性的免疫應答包括體液免疫應答（如抗原特異性抗體，如中和抗體（NAb)的產(chǎn)生）和細 胞介導的免疫應答（如淋巴細胞增殖）。
[0030] 在此使用的關于HIV的術語"減少"是指HIV介導的活動（如感染、融合（如靶細胞 進入和/或合胞體形成）、病毒傳播等）的減少或降低和/或病毒效價的降低。與對照對象 (如未經(jīng)治療的對象或采用安慰劑治療的對象）相比，HIV介導的活動和/或HIV滴度可降 低 5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、81%、82%、83%、 84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99. 1%、99. 2%、 99. 3%、99. 4%、99. 5%、99. 6%、99. 7%、99. 8%、99. 9% 或更多。
[0031] "中和