包含γ-聚谷氨酸的粘液分散或水合用組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及包含作為生物體親和性天然高分子的γ-聚谷氨酸的粘液分散或水合用組合物，更具體地涉及包含γ-聚谷氨酸或γ-聚谷氨酸納米凝膠的粘液過度分泌疾病治療用組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]作為形成粘膜的主成分的粘蛋白為從動物的外分泌腺分泌的粘性物質(zhì)的統(tǒng)稱，是與糖質(zhì)相結(jié)合的復(fù)合蛋白質(zhì)。眾所周知，在上述粘蛋白中，促進(jìn)作為細(xì)胞的主成分的蛋白質(zhì)的消化，從而在體內(nèi)中起到有用的作用，并起到胃壁保護(hù)作用、解毒作用。
[0003]粘蛋白存在的器官為口腔、鼻腔、喉頭、胃腸道、眼睛、肛門、陰道，其厚度從幾納米至170微米為止各種各樣。通過各種鍵來維持粘蛋白網(wǎng)狀物的結(jié)構(gòu)，這種鍵有離子鍵、氫鍵、二硫鍵、范德瓦爾斯鍵、粘蛋白之間纏繞等?；钴S地進(jìn)行有關(guān)與這種鍵相連接的粘膜附著性高分子的研究，只要有具有與存在于粘蛋白層的鍵的相互作用強(qiáng)的特征的高分子。眾所周知，一般，粘膜層具有復(fù)雜的多孔性網(wǎng)結(jié)構(gòu)，在幾微米大小的細(xì)菌的情況下，一般不能通過粘膜層，但在粘膜層倒塌的部分或薄的部分，一部分通過。在大小為10納米左右的抗體和比上述抗體大的質(zhì)粒脫氧核糖核酸的情況下，可通過粘膜層，但被存在于粘膜層的許多酶分解，因而難以通過粘膜層。在大小為200納米以下的病毒的情況下，減少與粘蛋白的相互作用，從而可快速通過粘膜層(Yang, Μ.et al., Angewandte Chemie Internat1nal Edit1n, 50(11):2597-2600, 2011)。
[0004]在與粘液質(zhì)相關(guān)的疾病中，囊腫性纖維化(CF，cystic fibrosis)是侵犯肺、肝、胰腺、泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)及汗腺等身體的各種器官的遺傳疾病。在這種疾病中，在需要形成正常的粘液的細(xì)胞中，形成又厚又粘糊的粘液，從而處于未調(diào)節(jié)好鹽分和水分的狀態(tài)。由于從肺出來的粘糊的粘液堵住病菌的移動，因而容易發(fā)生細(xì)菌感染。并且，影響支氣管內(nèi)的粘液分泌腺，從而形成異常粘稠的粘液，由于稠的粘液，發(fā)生氣道阻塞、細(xì)菌生長的促進(jìn)、炎癥和感染等。并且，可引發(fā)慢性支氣管炎(simple chronic bronchitis)、慢性阻塞性支氣管炎(chronic obstructive bronchitis)、喘息性支氣管炎(chronic asthmaticbronchitis)、肺氣腫(emphysema)、慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonarydisease)。在胰腺中，粘糊的粘液堵住胰液的移動，從而引起消化不良，并出現(xiàn)脂肪及脂溶性維生素的吸收不良。由此，有可能出現(xiàn)營養(yǎng)不良，這種情況經(jīng)常出現(xiàn)在孩子身上。除此之夕卜，由于囊腫性纖維化，還有可能出現(xiàn)鼻竇炎、鼻息肉、食管炎、胰腺炎、肝硬變、直腸脫垂、糖尿、不孕(尤其男性)等。
[0005]上述疾病與粘性的積累、少量的分散、不適合的粘蛋白結(jié)構(gòu)的形成和功能失調(diào)的粘液層清除率(clearance)有關(guān)。S卩，是因過度的粘液質(zhì)分泌和粘性而出現(xiàn)的現(xiàn)象。因而，若可降低像這樣過度分泌的粘液和粘性，則對治療上述疾病有幫助。據(jù)報(bào)告，現(xiàn)有的治療劑大部分是溶解(lysis)粘蛋白的藥物，但副作用多(Rubin, Β.K.et al., PaediatricRespiratory Reviews, 7Suppl 1,S215-219, 2006)。
[0006]其中，代表性的藥物有脫氧核糖核酸酶(deoxyribonuclease)、N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystein)，在此情況下，存在導(dǎo)致氣道粘膜的嚴(yán)重水溶化的問題。因而，在兩種觀點(diǎn)上，需要開發(fā)新的治療劑。第一，需要分散已存在的聚集的粘蛋白，第二，在無現(xiàn)有的粘蛋白網(wǎng)狀物的改性的條件下，使新形成的粘蛋白基質(zhì)進(jìn)行水合。根據(jù)以前的研究人，眾所周知，鈣離子(Ca2+)的去除或螯合導(dǎo)致粘蛋白網(wǎng)狀物的腫脹、水合、分散。根據(jù)Dr.Chin的研究，乙二胺四乙酸(Η)ΤΑ)等的鈣離子螯合物在囊腫性纖維化有助于粘蛋白的分散，但是，作為其結(jié)果，在處理羧化的聚苯乙稀的粘蛋白的情況下，確認(rèn)到聚集的粘蛋白(aggregatedmucin)的分散增加(Chen, Ε.Y.et al., Scientific Reports, Vol.2 Article number211，2012)，據(jù)報(bào)道，大小越小，其效果越大。但是，聚苯乙烯高分子等的非分解性合成高分子在用作體內(nèi)藥物時存在很多問題。
[0007]由此，本發(fā)明人銳意努力開發(fā)呈現(xiàn)粘蛋白的分散及水合效果的生物體高分子，最終確認(rèn)到具有γ-聚谷氨酸在體內(nèi)過度分泌，從而分散聚集的粘蛋白并水合的效果，并完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于，提供包含來源于生物體的高分子的粘液的分散及水合用組合物。
[0009]本發(fā)明的再一目的在于，提供包含來源于生物體的高分子的粘液過度分泌疾病治療用組合物。
[0010]本發(fā)明的另一目的在于，提供利用來源于生物體的高分子的粘液的分散及水合方法。
[0011]為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明提供包含γ-聚谷氨酸或γ-聚谷氨酸納米凝膠的粘液分散或水合用組合物。
[0012]并且，本發(fā)明還提供包含γ -聚谷氨酸或γ -聚谷氨酸納米凝膠的粘液過度分泌疾病治療用組合物。
[0013]并且，本發(fā)明還提供利用γ -聚谷氨酸或γ -聚谷氨酸納米凝膠的粘液過度分泌疾病的治療方法。
[0014]并且，本發(fā)明還提供粘液的分散及水合方法，其特征在于，用γ -聚谷氨酸或γ-聚谷氨酸納米凝膠對聚集的粘液進(jìn)行處理。
[0015]從以下詳細(xì)的說明及所附的發(fā)明要求保護(hù)范圍，更加明確本發(fā)明的其他特征及實(shí)例。
【附圖說明】
[0016]圖1示出根據(jù)分子量(50kDa、500kDa、500kDa)的γ -聚谷氨酸的水動力學(xué)大小。
[0017]圖2示出50kDa_ γ -聚谷氨酸和納米凝膠的粘液分散及水合特性。
[0018]圖3示出500kDa_ γ -聚谷氨酸和納米凝膠的粘液分散及水合特性。
[0019]圖4示出5000kDa_ γ -聚谷氨酸和納米凝膠的粘液分散及水合特性。
【具體實(shí)施方式】
[0020]只要沒有其他定義，在本說明書中使用的所有技術(shù)術(shù)語和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常所理解的含義相同的含義。一般地，在本說明書中使用的命名法為在本技術(shù)領(lǐng)域中公知且通常所使用的命名法。
[0021]在本發(fā)明的一觀點(diǎn)上，涉及包含γ -聚谷氨酸或γ -聚谷氨酸納米凝膠的粘液分散或水合用組合物及利用γ-聚谷氨酸或γ-聚谷氨酸納米凝膠的粘液的分散及水合方法。
[0022]在本發(fā)明中使用的γ-聚谷氨酸作為具有羧基的多肽，是利用生產(chǎn)高分子量的γ-聚谷氨酸的耐鹽性菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)清國醬菌株來生產(chǎn)(韓國登錄特許第500796號)。并且，還申請了與包含γ-聚谷氨酸的抗癌組合物、免疫加固劑、免疫增強(qiáng)劑、病毒感染抑制相關(guān)的專利(韓國登錄特許第496606號、韓國登錄特許第517114號、韓國登錄特許第475406號、韓國登錄特許第0873179號)。并且，持續(xù)進(jìn)行與物質(zhì)的醫(yī)藥用途相關(guān)的研究，并持續(xù)發(fā)現(xiàn)各種功效。
[0023]γ -聚谷氨酸具有豐富的羧基(C00-)，從而在對呈現(xiàn)過度的粘性的粘液進(jìn)行處理的情況下，具有腫脹(swelling)、水合(hydrat1n)、分散(dispers1n)效果，有可能導(dǎo)致I丐離子的螯合物和粘蛋白的娃招質(zhì)(sialic)、硫酸鹽(sulfate)、輕基官能團(tuán)等的陰離子性物質(zhì)和靜電斥力。
[0024]在本發(fā)明中，利用分子量為50kDa、500kDa、5000kDa的γ -聚谷氨酸來對粘液質(zhì)的分散及水合效果進(jìn)行了試驗(yàn)。如圖1?圖4所示，可確認(rèn)當(dāng)使用濃度為lmg/ml的γ -聚谷氨酸時，粘蛋白的大小急劇減小。并且，可確認(rèn)當(dāng)以多種濃度(lmg/mL、500 μ g/mL、10 μ g/mL)對γ-聚谷氨酸-膽固醇納米凝膠進(jìn)行處理時，濃度越高，對粘蛋白的分散效果更好。
[0025]并且，在本發(fā)明的一實(shí)施方式中，使用由γ-聚谷氨酸和膽固醇-胺發(fā)生反應(yīng)來制備的γ-聚谷氨酸-膽固醇納米凝膠，確認(rèn)到粘液質(zhì)的分散及水合效果。其結(jié)果，如圖2?圖4所示，可確認(rèn)因粘蛋白分散及水合而使粘蛋白的大小急劇減小。
[0026]在再一觀點(diǎn)上，本發(fā)明涉及包含γ-聚谷氨酸或γ-聚谷氨酸納米凝膠的粘液過度分泌疾病治療用組合物。
[0027]γ -聚谷氨酸或γ -聚谷