丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽的保護(hù)TNF-α或IL6所致炎癥的醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及丹參酸酸B苦參堿鹽和丹參酸酸B苦參素鹽，及其單鈉復(fù)鹽，丹參酸酸B 苦參堿鈉復(fù)鹽和丹參酸酸B苦參素鈉復(fù)鹽，在保護(hù)TNF-α或IL6所致炎癥的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 丹參酚酸B，是丹參、新疆鼠尾草等鼠尾草屬植物的主要有效成分之一，分子中有 兩個(gè)含有羧基的丹參素片斷。研究表明丹參酚酸B在抗缺氧、抗心腦缺血、治療冠心病、肝損 傷、肝纖維化等方面有很好的藥理作用，目前，作為中藥2類新藥(重慶藥友，主要含有丹參 酚酸B的丹參酚酸）臨床在治療治療肝纖維化方面有廣泛的應(yīng)用。但是丹參酚酸B分子由于 親水性較強(qiáng)，不易通過腸道上皮細(xì)胞脂質(zhì)膜，因此不易經(jīng)過跨上皮細(xì)胞途徑吸收，加之其分 子量較大，不易隨水分通過細(xì)胞旁路吸收，導(dǎo)致生物利用度比較低。同時(shí)，由于分子中具有 多個(gè)鄰二酚羥基和羧基共輒，使得化合物很不穩(wěn)定，容易發(fā)生氧化和聚合反應(yīng)。
[0003] 苦參堿和苦參素是來源于苦參和苦豆子等豆科植物的單體化合物，苦參素即氧化 苦參堿，苦豆子種子中含有大于0.8%的苦參堿和大于0.8%的氧化苦參堿，苦豆子莖葉中 含有大于0.2%的苦參堿和大于0.2%的氧化苦參堿，是最合適的提取制備苦參堿的原料， 并且由于使用的材料為地上部位，大面積的推廣種植還可維系新疆沙漠地區(qū)的生態(tài)平衡。 苦參堿和苦參素均具有抗炎、抗病毒、免疫抑制、抗腫瘤、心腦血管性疾病等生物活性，現(xiàn)代 藥理學(xué)研究表明，苦參堿和苦參素對(duì)于病毒性肝炎具有明確的療效，能抑制肝炎病毒的復(fù) 制，同時(shí)還具有抗肝纖維化的作用。但兩個(gè)化合物的物理性質(zhì)很不穩(wěn)定，具有很強(qiáng)的吸濕 性，同時(shí)苦參堿具有易氧化性。
[0004] 我們前期發(fā)現(xiàn)用丹參酚酸B與苦參堿和苦參素反應(yīng)，制備工藝簡單，獲得了質(zhì)量可 控的新化合物:苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽和苦參素丹參酚酸B復(fù)鹽，解決了分子的溶解性和穩(wěn) 定性。同時(shí)，通過制成鈉復(fù)鹽，使得化合物具有較好的油水分配比，解決了水溶性和生物吸 收的問題。本研究團(tuán)隊(duì)前期發(fā)明公開了復(fù)鹽中"苦參堿:丹參酚酸B"或"苦參素:丹參酚酸B" 的摩爾比，并發(fā)現(xiàn)形成復(fù)鹽后，即可改善丹參酚酸B、苦參堿和苦參堿的穩(wěn)定性，又可改善苦 參素的吸濕性，從而得到穩(wěn)定的化合物。
[0005] 本研究團(tuán)隊(duì)前期發(fā)明公開了苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽和苦參 素丹參酚酸B復(fù)鹽，以及它們的鈉復(fù)鹽的結(jié)構(gòu)特征，明確標(biāo)示了成鹽位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)丹參酚酸B兩 個(gè)羧基的酸性相似，在基本上每一個(gè)羧基都可以在另一個(gè)未解離的情況下，很容易解離;而 且，由于兩個(gè)羧基的酸性都很強(qiáng)，可以同時(shí)解離。同時(shí)，苦參堿有兩個(gè)N原子都可作為成鹽位 點(diǎn)，但?；鵑的堿性明顯較弱，所以，在不同比例的復(fù)鹽中，成鹽位點(diǎn)不同?？鄥⑺赜袃蓚€(gè)N原 子中，因其中一個(gè)N原子形成N氧化物難以成鹽，所以，一般只有酰基N為成鹽位點(diǎn)。
[0006] 本研究團(tuán)隊(duì)前期發(fā)明公開了含有以上化合物的藥用組合物，主要為口服制劑或注 射制劑。研究過程中，充分考查了以上化合物的物理化學(xué)性質(zhì)，并利用復(fù)鹽的這些特殊物理 化學(xué)性質(zhì)，創(chuàng)造性地解決了其口服制劑的有效吸收和注射制劑的水溶性問題。
[0007] 本研究團(tuán)隊(duì)前期發(fā)明公開了 ：苦參堿或苦參素與丹參酚酸B具有協(xié)同增效作用，用 藥劑量明顯減少，發(fā)現(xiàn):苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽和苦參素丹參酚酸B復(fù)鹽，以及它們的鈉復(fù) 鹽，對(duì)四氯化碳(CCI4)、D-半乳糖胺(D-GalN)、硫代乙酰胺(Thioacetamide，TAA)所致的化 學(xué)性肝損傷和慢性酒精性肝損傷具有顯著的保護(hù)作用。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽和 苦參素丹參酚酸B復(fù)鹽，以及它們的鈉復(fù)鹽具有顯著的改善腦缺血和心肌缺血的作用。
[0008] 本團(tuán)隊(duì)通過系統(tǒng)深入的研究，創(chuàng)新性地發(fā)現(xiàn):苦參堿丹參酚酸B復(fù)鹽和苦參素丹參 酚酸B復(fù)鹽，以及它們的鈉復(fù)鹽，具備保護(hù)TNF-α或IL6所致炎癥的作用。因 TNF-α或IL6異常 所致疾病包括:肝纖維化、肺纖維化、腎纖維化、過敏性哮喘、腎炎、肝炎、肺炎、血管內(nèi)皮細(xì) 胞損傷引起的心腦血管等疾病，從而可以推廣用于各種因?yàn)檫@兩種免疫因子障礙引起的各 種疾病的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的之一在于提供丹參酚酸B苦參堿鹽在制備治療TNF-α或IL6所致炎癥 引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明的目的之二在于提供丹參酚酸B苦參素鹽在制備治療TNF-α或IL6所致炎癥 引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明的目的之三在于提供丹參酚酸B苦參堿鈉復(fù)鹽在制備治療TNF-α或IL6所致 炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明的目的之四在于提供丹參酚酸B苦參素鈉復(fù)鹽在制備治療TNF-a或IL6所致 炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明還提供含有丹參酸酸B苦參堿鹽、丹參酸酸B苦參素鹽、丹參酸酸B苦參堿鈉 復(fù)鹽、丹參酚酸B苦參素鈉復(fù)鹽中一種或多種的藥物組合物。
[0014] 本發(fā)明的目的之五在于提供含有丹參酚酸B苦參堿鹽的藥物組合物在制備治療 TNF-a或IL6所致炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明的目的之六在于提供含有丹參酚酸B苦參素鹽的藥物組合物在制備治療 TNF-a或IL6所致炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的目的之七在于提供含有丹參酚酸B苦參堿鈉復(fù)鹽的藥物組合物在制備治 療TNF-a或IL6所致炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0017] 本發(fā)明的目的之八在于提供含有丹參酚酸B苦參素鈉復(fù)鹽的藥物組合物在制備治 療TNF-a或IL6所致炎癥引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0018] 本發(fā)明所述由于TNF-α或IL6所致炎癥引起的疾病包括:肝纖維化、肺纖維化、腎纖 維化、過敏性哮喘、腎炎、肝炎、肺炎、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起的心腦血管疾病等。
[0019] 其中，所述丹參酸酸B苦參堿鹽，丹參酸酸B苦參素鹽，丹參酸酸B苦參堿鈉復(fù)鹽，和 丹參酚酸B苦參素鈉復(fù)鹽都屬于現(xiàn)有產(chǎn)品，都可以在市場上購買到。
[0020] 丹參酚酸B苦參堿鹽的制備過程:精密稱定摩爾比為1:2的丹參酚酸B與苦參堿，分 別用適量的溶劑溶解(水、乙醇），將苦參堿溶液緩緩加入丹參酚酸B溶液中不斷攪拌(充分 反應(yīng)0.5小時(shí)），有黃色絮狀沉淀產(chǎn)生，緩緩加入適量乙醇使沉淀完全，繼續(xù)攪拌0.5h，停止 反應(yīng)，過濾，在50°C烘箱烘干，即得。
[0021] 丹參酚酸B苦參素鹽的制備過程:精密稱定摩爾比為1:2的丹參酚酸B與苦參素，分 別用適量的溶劑溶解(水、乙醇），將苦參素溶液緩緩加入丹參酚酸B溶液中不斷攪拌(充分 反應(yīng)O . 5小時(shí)），有黃色絮狀沉淀產(chǎn)生，緩緩加入適量乙醇使沉淀完全，繼續(xù)攪拌0.5h，停止 反應(yīng)，過濾，在50°C烘箱烘干，即得。
[0022] 丹參酚酸B苦參堿鈉復(fù)鹽的制備過程:精密稱定摩爾比為1: 1:1的丹參酚酸B、碳酸 氫鈉(NaHC03)與苦參堿，分別用適量的溶劑溶解(水、乙醇），將碳酸氫鈉(NaHC03)與苦參堿 溶液緩緩加入丹參酚酸B溶液中不斷攪拌(充分反應(yīng)0.5小時(shí)），有黃色絮狀沉淀產(chǎn)生，緩緩 加入適量乙醇使沉淀完全，繼續(xù)攪拌0.5h，停止反應(yīng)，過濾，在50°C烘箱烘干，即得。
[0023] 丹參酚酸B苦參素鈉復(fù)鹽的制備過程:精密稱定摩爾比為1: 1:1的丹參酚酸B、碳酸 氫鈉(NaHC03)與苦參素，分別用適量的溶劑溶解(水、乙醇），將碳酸氫鈉(NaHC03)與苦參素 溶液緩緩加入丹參酚酸B溶液中不斷攪拌(充分反應(yīng)0.5小時(shí)），有黃色絮狀沉淀產(chǎn)生，緩緩 加入適量乙醇使沉淀完全，繼續(xù)攪拌0.5h，停止反應(yīng)，過濾，在50°C烘箱烘干，即得。
[0024] 通過以下實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果。
[0025] 1.丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響
[0026] 表1:丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響
[0028] 注:##P〈0 · 01，與正常對(duì)照組相比；*P〈0 · 05，#P〈0 · 01，與模型組相比 [0029]結(jié)果顯示：（1)模型組造成肝指數(shù)、脾指數(shù)、腎指數(shù)、胸腺指數(shù)顯著升高（與正常對(duì) 照組相比，P〈〇 .05)。（2)與模型組相比，丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽低、中、高劑量組均顯著降低 了脾指數(shù)、胸腺指數(shù)(與模型組相比，P〈〇.01)，丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽中、高劑量組均顯著降 低了肝指數(shù)(與模型組相比，P〈〇.05)，丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽低劑量組降低了肝指數(shù)，但未 顯示顯著性差異。丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽低、中、高劑量組腎指數(shù)與模型組相比，未見顯著性 差異。（3)與模型組相比，復(fù)方鱉甲軟肝片陽性對(duì)照組、丹參酚酸B對(duì)照組、苦參堿對(duì)照組，均 顯著降低了肝臟指數(shù)(與模型組相比，P〈〇.05)，脾指數(shù)、胸腺指數(shù)(與模型組相比，P〈0.01)， 但腎指數(shù)與模型組相比，未見顯著性差異。
[0030] 2.血清學(xué)指標(biāo)測定結(jié)果
[0031 ] 2.1丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)血清AST和ALT的影響 [0032] 表2:丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)血清AST和ALT的影響
[0034] 注:##P〈0 · 01，與正常對(duì)照組相比；*P〈0 · 05，#P〈0 · 01，與模型組相比
[0035] 結(jié)果顯示：（1)模型組顯著提高小鼠血清AST和ALT水平（與正常對(duì)照組相比，P〈 0.01)。（2)與模型組相比，丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽80mg/kg、160mg/kg中、高劑量組，顯著降低 了血清AST和ALT水平（與模型組相比，P〈0.05)，丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽40mg/kg低劑量組降 低了血清AST和ALT水平，但未見顯著性差異。（3)與模型組相比，復(fù)方鱉甲軟肝片1000mg/kg 陽性對(duì)照組、丹參酚酸B160mg/kg對(duì)照組、苦參堿20mg/kg對(duì)照組，均顯著降低了血清AST和 ALT水平(與模型組相比，P〈0.05)。
[0036] 2.2丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)肝纖維化小鼠血清TNFa、IL_6的影響
[0037] 表3:丹參酚酸B苦參堿復(fù)鹽對(duì)肝纖維化小鼠血清TNFa、IL-6的影響
[0039] 注:##P〈0 · 01，與正常對(duì)照組相比；*P〈0 ·