miR-378在預(yù)防和/或治療肥胖癥中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及miR-378在預(yù)防和/或治療肥胖癥，特別是獲得性肥胖癥中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 肥胖癥是一種常見的代謝疾病。據(jù)報(bào)道，2008年全世界共有2億成年男性、3億成年 女性患有肥胖癥[1]。估計(jì)到2030年，全球肥胖人數(shù)將會(huì)高達(dá)10億 [2]。正常男性成人脂肪組織 重量約占體重的15%~18%，女性約占20%~25%。隨年齡增長，體脂所占比例相應(yīng)增加。 體重指數(shù)[BMI =體重(Kg)/(身高)2(m2)]大于28者稱為肥胖癥[3]。
[0003] 無明顯病因的肥胖癥稱單純性肥胖癥;具有明確病因者稱為繼發(fā)性肥胖癥。單純 性肥胖是各種肥胖最常見的一種，全身脂肪分布比較均勻，沒有內(nèi)分泌混亂現(xiàn)象，也無代謝 障礙性疾病，其家族往往有肥胖病史。單純性肥胖又分為體質(zhì)性肥胖和過食性肥胖兩種。體 質(zhì)性肥胖即雙親肥胖，是由于遺傳和機(jī)體脂肪細(xì)胞數(shù)目增多而造成的，還與25歲以前的營 養(yǎng)過度有關(guān)系。這類人的物質(zhì)代謝過程比較慢，比較低，合成代謝超過分解代謝。過食性肥 胖也稱為獲得性肥胖，是由于人成年后有意識(shí)或無意識(shí)地過度飲食，使攝入的熱量大大超 過身體生長和活動(dòng)的需要，多余的熱量轉(zhuǎn)化為脂肪，促進(jìn)脂肪細(xì)胞肥大與細(xì)胞數(shù)目增加，月旨 肪大量堆積而導(dǎo)致肥胖。
[0004] 與單純性肥胖不同，繼發(fā)性肥胖是于疾病引起的肥胖。繼發(fā)性肥胖是由內(nèi)分泌混 亂或代謝障礙引起的一類疾病，雖然同樣具有體內(nèi)脂肪沉積過多的特征，但仍然以原發(fā)性 疾病的臨床癥狀為主要表現(xiàn)，肥胖只是這類患者的重要癥狀之一。這類患者同時(shí)還會(huì)出現(xiàn) 其他各種各樣的臨床表現(xiàn)，多表現(xiàn)為皮質(zhì)酵增多、甲狀腺功能減退人群、性腺功能減退等多 種疾病中。
[0005] 肥胖癥會(huì)使高血壓、糖尿病和心腦血管疾病等的發(fā)病率及死亡率顯著增加[3]，已 成為危害全球人類健康的重要問題之一，成為社會(huì)廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)。肥胖的預(yù)防和治療已 成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)面臨的一項(xiàng)挑戰(zhàn)。2008年，僅美國用于肥胖的醫(yī)療費(fèi)用就高達(dá)1470億美元 [4]。 據(jù)博思數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，2012年全球減肥藥市場規(guī)模為15.6億美元，我國減肥藥零售市場規(guī)模 30.5億元，其中減肥藥(處方藥)市場規(guī)模為16.8億元 [5]。按現(xiàn)在的市場預(yù)測未來可能全球 將達(dá)到700億，其中中國將近100億元。
[0006] microRNA是一類非編碼小RNA分子，在基因轉(zhuǎn)錄后水平通過對(duì)靶mRNA的翻譯抑制 或降解，繼而調(diào)控基因的表達(dá)。最近的研究表明，miR-378參與調(diào)控糖脂代謝，與脂類的合成 與分解密切相關(guān) [6_7]。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明人通過一系列實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性微小核糖核酸micr〇RNA-378(miR-378)對(duì)肥 胖癥有明顯的預(yù)防和/或治療作用。miR-378可以調(diào)節(jié)糖脂代謝，促進(jìn)脂類氧化分解，miR-378 轉(zhuǎn)基因小鼠體脂顯著低于對(duì)照小鼠 。給小鼠注射 miR-378 對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖具有顯 著的預(yù)防和治療作用，尤其可降低肥胖癥中白色脂肪積累。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-378在骨骼 肌中可以通過抑制Aktl而促進(jìn)FoxOl活性，從而促進(jìn)PEPCK表達(dá)，激活丙酮酸-PEP無效循環(huán)。 無效循環(huán)導(dǎo)致小鼠能量缺陷，從而促進(jìn)脂肪分解。在脂肪組織中，miR-378通過靶向調(diào)節(jié) Scdl而促進(jìn)脂解作用。以上研究表明微小核糖核酸miR-378可以參與整體代謝調(diào)控，促進(jìn)脂 肪氧化分解，減少脂肪積累，從而預(yù)防和治療肥胖。
[0008] 因此，本發(fā)明的目的是提供miR-378在制備預(yù)防和/或治療肥胖癥的藥物中的用 途。
[0009] 進(jìn)一步地，肥胖癥選自單純性肥胖癥和繼發(fā)性肥胖癥，所述單純性肥胖癥選自體 質(zhì)性肥胖癥和獲得性肥胖癥，優(yōu)選獲得性肥胖癥。
[0010] 進(jìn)一步地，miR-378的序列如SEQ ID No. 1所示。
[0011] 進(jìn)一步地，預(yù)防和/或治療是指降低肥胖癥中白色脂肪積累。
[0012] 進(jìn)一步地，肥胖癥是指由白色脂肪積累引起的肥胖癥。
[0013] 進(jìn)一步地，miR-378可由膽固醇修飾。
[0014] 進(jìn)一步地，膽固醇修飾的miR-378可降低肥胖癥中白色脂肪積累。
[0015] 進(jìn)一步地，膽固醇修飾的miR-378可預(yù)防和/或治療由白色脂肪積累引起的肥胖 癥。
[0016] 進(jìn)一步地，miR-378 的革 El 標(biāo)是 Scdl。
[0017] 此外，本發(fā)明還提供了一種制備用于治療和/或預(yù)防肥胖癥的組合物，其包含miR-378〇
[0018] 進(jìn)一步地，組合物還包含一種或更多藥學(xué)上可接受的載體。
[0019] 進(jìn)一步地，miR-378可由膽固醇修飾。
[0020] 進(jìn)一步地，肥胖癥選自單純性肥胖癥和繼發(fā)性肥胖癥。所述單純性肥胖癥選自體 質(zhì)性肥胖癥和獲得性肥胖癥，優(yōu)選獲得性肥胖癥。
[0021] 進(jìn)一步地，miR-378的序列如SEQ ID No. 1所示。
[0022] 進(jìn)一步地，預(yù)防和/或治療是指降低肥胖癥中白色脂肪積累。
[0023] 進(jìn)一步地，肥胖癥是指由白色脂肪積累引起的肥胖癥。
[0024] 進(jìn)一步地，膽固醇修飾的miR-378可降低肥胖癥中白色脂肪積累。
[0025] 進(jìn)一步地，膽固醇修飾的miR-378可預(yù)防和/或治療由白色脂肪積累引起的肥胖 癥。
[0026] 進(jìn)一步地，miR-378 的革 El 標(biāo)是 Scdl。
[0027]術(shù)語"肥胖癥"是指體重指數(shù)[BMI =體重(Kg)/(身高)2(m2)]大于28者。
【附圖說明】
[0028]圖IA-圖lK:miR-378轉(zhuǎn)基因小鼠脂肪積累減少。圖中Wt代表野生型對(duì)照小鼠，Tg代 表轉(zhuǎn)基因小鼠。圖IA顯示轉(zhuǎn)基因小鼠體型小于野生型對(duì)照小鼠。圖IB顯示在轉(zhuǎn)基因小鼠的 骨骼肌、棕色脂肪、白色脂肪和肝臟中miR-378均高表達(dá)，其中Mus:骨骼肌，BAT:棕色脂肪， WAT:白色脂肪。圖IC顯示轉(zhuǎn)基因小鼠的體重減輕。圖ID顯示轉(zhuǎn)基因小鼠的骨骼肌重量減少， 其中TA:腔骨前肌，EDL:趾長伸肌，Gastro :腓腸肌，Qu:股四頭肌。圖IE-圖IF顯示轉(zhuǎn)基因小 鼠的脂肪積累少，圖IG顯示轉(zhuǎn)基因小鼠的脂肪細(xì)胞數(shù)量沒有顯著變化，其中iWAT:腹股溝皮 下白色脂肪，gWAT:性腺旁腹腔白色脂肪。圖IH顯示miR-378對(duì)脂肪細(xì)胞的分化無顯著影響， 其中Ppar γ :過氧化物酶體增殖物激活受體γ，aP2:脂肪細(xì)胞脂結(jié)合蛋白，也稱為FABP4， Agt:血管緊張肽原。圖II-圖IJ顯示轉(zhuǎn)基因小鼠的脂肪細(xì)胞體積明顯減小。圖IK顯示轉(zhuǎn)基因 小鼠棕色脂肪中脂肪分解相關(guān)基因表達(dá)顯著增加，其中Ucpl:解偶聯(lián)蛋白l，Pgc-la :過氧化 物酶體增殖物激活受體γ共激活因子Ia ,Pgc-?β:過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活 因子1β，Prdml6:含PR結(jié)構(gòu)域的蛋白16，Cox7al:細(xì)胞色素 C氧化酶蛋白7Α1。
[0029]圖2A-圖2Q: miR-378轉(zhuǎn)基因小鼠分解代謝活躍。圖中Wt代表野生型對(duì)照小鼠，Tg代 表轉(zhuǎn)基因小鼠。圖2A顯示轉(zhuǎn)基因小鼠氧消耗顯著高于野生型對(duì)照小鼠，圖2B顯示轉(zhuǎn)基因小 鼠二氧化碳產(chǎn)生高于野生型對(duì)照小鼠，圖2C顯示轉(zhuǎn)基因小鼠食物攝取高于野生型對(duì)照小 鼠，圖2D顯示轉(zhuǎn)基因小鼠飲水量高于野生型對(duì)照小鼠，圖2E顯示轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)熱高于野生 型對(duì)照小鼠。圖2F顯示轉(zhuǎn)基因小鼠棕色脂肪中解偶聯(lián)蛋白I(Ucpl)表達(dá)高于野生型對(duì)照小 鼠。圖2G顯示轉(zhuǎn)基因小鼠白色脂肪中脂肪分解的關(guān)鍵酶表達(dá)高于野生型對(duì)照小鼠，其中 ATGL :脂肪甘油三酯脂肪酶，HSL :激素敏感的脂肪酶，CGI-58 (Comparative gene identification-58):比較文庫方法鑒定的第58號(hào)蛋白。圖2H顯示轉(zhuǎn)基因小鼠白色脂肪中 甘油濃度高于野生型對(duì)照小鼠。圖21-圖2J顯示轉(zhuǎn)基因小鼠棕色脂肪（圖21)及骨骼?。▓D 2J)中脂肪分解及脂肪酸利用的關(guān)鍵酶表達(dá)高于野生型對(duì)照小鼠，其中LPL:脂蛋白脂酶， CD36:細(xì)胞分化蛋白36，CPTlb:肉堿脂酰基轉(zhuǎn)移酶，UCP3:解偶聯(lián)蛋白3。圖2K顯示轉(zhuǎn)基因小 鼠血清中游離脂肪酸(FFA)濃度明顯降低。圖2L顯示轉(zhuǎn)基因小鼠在饑餓條件下血糖高于野 生型對(duì)照小鼠。圖2M顯示轉(zhuǎn)基因小鼠糖耐量(GTT)異常，圖2N顯示轉(zhuǎn)基因小鼠胰島素耐量 (ITT)正常。圖20顯示轉(zhuǎn)基因小鼠血清胰島素水平正常。圖2P顯示轉(zhuǎn)基因小鼠丙酮酸耐量 (PTT)顯著高于野生型對(duì)照小鼠。圖2Q顯示轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶 (PEPCK)表達(dá)上調(diào)。
[0030] 圖3A-圖3H:miR-378轉(zhuǎn)基因小鼠抵抗