一種免疫佐劑組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種疫苗用佐劑組合物，該佐劑包括丙烯酸系聚合物和草分枝桿菌培養(yǎng)物的水溶液，可以作為疫苗佐劑和免疫增強劑的用途。
【專利說明】
-種免疫佐劑組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物制品技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及免疫佐劑組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 抗原被定義為外來物質(zhì)，當給予時，如經(jīng)非胃腸道給予時，會引發(fā)免疫反應(yīng)，包括 引發(fā)抗體產(chǎn)生?？贵w是包含于血液和其它體液和組織中的物質(zhì)，它與抗原結(jié)合而使之變?yōu)?無害?？贵w構(gòu)成了身體的天然防御機制之一。它們具有很高的特異性，并可殺死、結(jié)合或使 引發(fā)抗體形成的抗原變?yōu)闊o害。已知能通過疫苗來給予特異性抗原而故意刺激免疫反應(yīng)。 該方法使機體發(fā)生免疫記憶狀態(tài)，運保證了機體與抗原接觸時更為迅速和有效地產(chǎn)生反 應(yīng)。
[0003] 可通過給予抗原與稱為佐劑的物質(zhì)的混合物來增加抗原的免疫原性，佐劑可通過 直接對免疫系統(tǒng)的作用或通過修飾抗原的藥動學特征來增加對抗原的反應(yīng)，運樣增加抗原 與免疫系統(tǒng)的相互作用時間
[0004] 畜禽養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，尤其是集約化飼養(yǎng)規(guī)模的日益擴大，使得疾病預(yù)防的問 題愈加重要。疫苗接種是預(yù)防疾病的最基本、最有效的方法。但是由于各種原因，目前很多 疫苗的免疫效果還不是十分理想，不能對動物提供完全的保護。為了提高疫苗的免疫效果， 人們進行了大量的工作，如通過濃縮抗原提高抗原含量、提高抗原的免疫原性、優(yōu)化抗原工 藝、采用優(yōu)質(zhì)佐劑、優(yōu)化免疫程序等等來提高疫苗的免疫質(zhì)量，研究開發(fā)新型高效用佐劑是 提高免疫效果的主要方法之一。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)存在種類繁多的佐劑和起到免疫增強作用的化合物，如果尋找有相互有 增效作用且適用于多種抗原的組合是本領(lǐng)域技術(shù)人所要解決的技術(shù)問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為解決W上技術(shù)問題本發(fā)明提供一種免疫佐劑組合物，包含丙締酸系聚合物和草 分枝桿菌培養(yǎng)物。
[0007] 優(yōu)選地，所述丙締酸系聚合物是丙締酸與聚締丙基薦糖交聯(lián)的聚合物。
[000引優(yōu)選地，所述丙締酸系聚合物是烷基-聚丙締酸。
[0009] 優(yōu)選地，所述烷基-聚丙締酸，佐劑選自由癸基-聚丙締酸、辛基-聚丙締酸、下基- 聚丙締酸和甲基-聚丙締酸組成的群組。
[0010] 草分枝桿菌培養(yǎng)物是草分枝桿菌滅活的全菌體、草分枝桿菌滅活的全菌體的破碎 純化物、草分枝桿菌的多糖提取物或草分枝桿菌的細胞壁提取物。
[0011] 優(yōu)選地，所述草分枝桿菌培養(yǎng)物是草分枝桿菌滅活的全菌體。
[0012] 作為本發(fā)明的某種實施方式，本發(fā)明的佐劑組合物還可W包含左旋咪挫或左旋咪 挫的衍生物。
[0013] 優(yōu)選地，所述的疫苗組合物中丙締酸系聚合物的濃度為lmg/ml-40mg/ml。更優(yōu)選 所述的丙締酸系聚合物的濃度是4mg/m -24mg/m 1。
[0014] 優(yōu)選地，所述的疫苗組合物中草分枝桿菌培養(yǎng)物濃度
[0015] 0. 〇32mg/ml ~0.8mg/ml。再優(yōu)選 0.7mg/ml。
[0016]優(yōu)選地，所述的疫苗組合物中所述的左旋咪挫的添加量為化g~2mg/ml。
[0017] 作為本發(fā)明的另外一方面，本發(fā)明是一種免疫增強劑組合物，包括一種具有丙締 酸系聚合物和草分枝桿菌培養(yǎng)物。
[0018] 作為本發(fā)明的另外一個方面，本發(fā)明提供一種疫苗組合物，其含有抗原和上述佐 劑組合物。
[0019] 作為本發(fā)明的一種實施方式，所述的疫苗組合物為水溶液，含有抗原、一種具有丙 締酸系聚合物和草分枝桿菌培養(yǎng)物。
[0020] 作為本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式，所述的疫苗組合物為水溶液，含有抗原、一種 具有丙締酸系聚合物、草分枝桿菌培養(yǎng)物和左旋咪挫。
[0021] 作為本發(fā)明的另外一種實施方式，本發(fā)明的疫苗組合物為油包水劑型，其特征在 于，所述的組合物含有丙締酸系聚合物和草分枝桿菌培養(yǎng)物。
[0022] 作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，本發(fā)明的疫苗組合物為油包水劑型，其特征在 于，所述的組合物含有丙締酸系聚合物、草分枝桿菌培養(yǎng)物和左旋咪挫或左旋咪挫的衍生 物。
[0023] 術(shù)語"佐劑"是指當連同抗原投與時，使受試者對運一抗原的免疫反應(yīng)增強的化合 物。佐劑介導(dǎo)的免疫反應(yīng)增強可通過所屬技術(shù)領(lǐng)域中已知的任何方法評估，包括(不限于） W下一種或多種方法：（i)與對單獨抗原免疫作用起反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體數(shù)相比，對佐劑/抗 原組合免疫作用起反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體數(shù)增加；（ii)識別抗原或佐劑的T細胞數(shù)增加；（iii) 一種或多種I型細胞因子的含量增加;和（iv)活激發(fā)之后，體內(nèi)（in vivo)的保護作用。與經(jīng) 單獨抗原激發(fā)的受試者相比，當受試者經(jīng)抗原與佐劑激發(fā)時，若抗原特異性免疫反應(yīng)性的 任何可測量參數(shù)(例如抗體效價或T細胞產(chǎn)生增加至少10%，則認為免疫反應(yīng)增強。在本發(fā) 明的某些實施例中，若抗原特異性免疫反應(yīng)性的任何可測量參數(shù)增加至少15%、至少20%、 至少25%、至少30%、至少35%、至少40%、至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少 65 %、至少70 %、至少75 %、至少80 %、至少90 %、至少95 %、至少100 %、至少125 %、至少 150%、至少175%、至少200%、至少225%、至少250%、至少275%、至少300 %、至少350%、 至少400%、至少450%、至少500%或至少1000%，則免疫反應(yīng)增強。
[0024] 佐劑優(yōu)選是丙締酸系聚合物文中所使用的丙締酸系聚合物是含有丙締酸系部分 的任何聚合物或共聚物。示范性丙締酸系聚合物包括例如聚丙締酸、甲基丙締酸、甲基丙締 酸醋、丙締酷胺、丙締酸醋、丙締臘和聚丙締酸的烷基醋。丙締酸系共聚物的實例包括例如 聚丙締酷胺-共-甲基丙締酸下醋、丙締酸-甲基丙締酸、丙締酸-丙締酷胺和聚甲基丙締酸 醋。市售丙締酸系聚合物的實例包括卡波姆，它是在所屬技術(shù)領(lǐng)域中通常還指并且已知是 與聚締丙基薦糖交聯(lián)的丙締酸的水溶性聚合物。
[0025] 丙締酸系聚合物包括中國專利CN95197100.X述的烷基-聚丙締酸Γ烷基-PAA")聚 合物。示范性烷基-PAA聚合物包括癸基-PAA(CIO-PAA)、辛基-PAA(CS-PAA)、下基-PAA(C4- PAA)和甲基-PAA (C1-PAA)。
[00% ] 術(shù)語"左旋咪挫或其衍生物"包括左旋咪挫、左旋咪挫衍生物如鹽酸左旋咪挫 (Xevamisole Hy化ochloride)或憐酸左旋咪挫(Xevamisole地OS曲ate)中的至少一種；所 述左旋咪P坐化6￥311113〇16，1^[5)又稱左咪蜂化-了6吐31111301)或左旋四咪蜂，為四咪蜂的左旋 光學異構(gòu)體，是一種廣譜驅(qū)蟲藥。所述左旋咪蜂或其衍生物還可W包括W下任一產(chǎn)品如 TotalonTM Topical Cattle Anthelmintic(Pitman-Moore，Inc .)、|_θν330Ιθ⑩ (Intervet'Inc·)、TramiSOl⑩（S chering-Plough)、 El"gamiS0l⑩（Janssen Pharmaceuticals，Inc.)、Levamisole Hydrochloride(Bimeda，Inc.)、TYamiSOl? Plus (Fort Dodge Animal Health)、ProhibitTM Soluble Drench Power(Agri laboratories， Ltd.)、Levamisole phosphate(Agri laboratories，Ltd.)、Levamisole Hydrochloride Soluble Pig Wormer(Cross Ve1:pha;rm Group Ltd.)、左旋咪挫原料藥（西安帥諾生物科技 有限公司）、鹽酸左旋咪挫（陜西漢江藥業(yè)集團股份有限公司）、鹽酸左旋咪挫注射液(廣西 南寧市桃源獸藥廠）、左旋咪挫搔劑(參見中國專利CN1048399A)。
[0027]術(shù)語"疫苗組合物"是可用于在接受者中誘發(fā)保護性免疫的組合物。因此，在受試 者已接種抗原之后，疫苗可阻止、延緩或減輕暴露給相同或相關(guān)抗原的受試者的疾病發(fā)展 嚴重程度(相對于未接種疫苗的受試者）。通過疫苗所提供的保護性免疫可W是體液(抗體 介導(dǎo))免疫或細胞免疫，或兩者。
[002引術(shù)語"抗原"是指當引入受試者中時，可由宿主的免疫系統(tǒng)識別并且能夠誘發(fā)免疫 反應(yīng)和產(chǎn)生保護性免疫的藥劑?？乖?不限于)在病原體的表面或受感染細胞的表面或 腫瘤細胞的表面上天然表達的"表面抗原"?？乖烧T發(fā)保護性免疫的疾病病原體和/或病 狀的非限制性實例為流感病毒、新城疫病毒(Newcastle disease virus)、傳染性支氣管炎 病毒、鼻病毒屬(rhinovi;rus)、副流感病毒、細小病毒屬(pa;rvovi;rus)(例如鴨細小病毒）、 腺病毒屬(adenovirus)、胸膜肺炎放線桿菌(Actinobaccilus pleuropneumoniae)、禽類白 血病、傳染性法氏囊?。╥nfectious bursal disease)、呼腸孤病毒屬(reovirus)、痘病毒 (pox)、喉氣管炎、馬立克氏病(Marek^s disease)、破傷風、B型肝炎、追疾、肺炎球菌肺炎、 輪狀病毒屬(rotavirus)、細小病毒屬、冠狀病毒屬（caronavirus)、大腸桿菌、沙口氏菌屬 (Salmonella)。
[0029] 在某些實施例中，抗原是流感病毒，例如經(jīng)滅活的流感病毒在本
【發(fā)明內(nèi)容】
中可使 用任何經(jīng)滅活的流感病毒，包括任何經(jīng)滅活的流感A病毒株(例如禽流感病毒株）。
[0030] 在某些實施例中，抗原是新城疫病毒，例如經(jīng)滅活的新城疫病毒La So化株或基因 改造后新城疫基因 νπ型毒株。
[0031] 可在本
【發(fā)明內(nèi)容】
中用作抗原的示范性滅活流感病毒包括具有Η1、Η5、Η7或朋血球 凝集素與N1、N2、N3、M、N5、N6、N7、N8或N9中任一者組合的病毒。一般來說，抗原的血球凝集 素亞型是基于通過循環(huán)傳染性流感病毒株所呈現(xiàn)的血球凝集素亞型加 W選擇。
[0032] 其它組分在本發(fā)明的某些實施例中，疫苗組合物可包括一種或多種其它組分，諸 如表面活性劑、緩沖劑和穩(wěn)定化合物
[0033] 油溶性表面活性劑包括阿拉塞83(脫水山梨醇倍半油酸醋）、阿拉塞A(二縮甘露醇 單油酸醋，）、阿拉塞80、司本80(脫水山梨醇單油酸醋）、L121泊洛沙姆(poloxamer)401(普 朗尼克L121;己斯夫公司）。
[0034] 水溶性表面活性劑包括吐溫80。
[0035] 水相可包括pH緩沖組分(諸如PBS(憐酸鹽緩沖生理鹽水））、防腐劑(例如，對徑基 苯甲酸甲醋或?qū)交郊姿岜谆蛏嚼嫠?、硫柳隸）、調(diào)味劑、著色劑和甜味劑。
[0036] 乳劑可通過包含一種或多種穩(wěn)定劑化合物來達成穩(wěn)定。穩(wěn)定劑的類別包括聚合物 穩(wěn)定劑和低分子量穩(wěn)定劑。聚合物穩(wěn)定劑在界面處形成本體相凝膠或其它結(jié)構(gòu)并且使一個 或多個界面的粘度增加。聚合物穩(wěn)定劑包括(不限于)蛋白質(zhì)、淀粉、樹膠、纖維素制品、聚乙 締醇、聚丙締酸和聚乙締化咯燒酬。運些物質(zhì)通過共價鍵或通過靜電和疏水性相互作用結(jié) 合于界面。它們形成"界面絡(luò)合物"，界面絡(luò)合物定義為兩個或兩個W上表面活性分子W任 一本體相中不存在的關(guān)系在界面處結(jié)合。低分子量穩(wěn)定劑的實例為(不限于)膽固醇和二價 陽離子的脂肪酸鹽，諸如硬脂酸侶。
[0037] 在某些實施例中，本發(fā)明提供一種藥包或試劑盒，其包含一個或多個裝有免疫原 制劑的一種或多種成分的容器。在優(yōu)選實施例中，用于制備醫(yī)藥組合物或疫苗組合物的試 劑盒包含至少一種抗原、佐劑、油相和水相，所述試劑盒包含存于不同容器中的各組分和任 選地包含指示混合各組分和/或投與組合物的說明書。試劑盒的每個容器任選地還可包括 一種或多種生理學上可接受的載劑和/或賦形劑和/或輔助物質(zhì)。運些容器中可配合使用由 管制醫(yī)藥或生物產(chǎn)品的制造、使用或銷售的政府部口所規(guī)定的形式的通知書，所述通知書 反映所述管制制造、使用或銷售的部口批準用于投藥。
[0038] 本發(fā)明的有益效果
[0039] 1)本發(fā)明的免疫佐劑組合物各成分之間具有協(xié)同作用；
[0040] 2)本發(fā)明制備的滅活疫苗可W采用水溶液的形式，本領(lǐng)域技術(shù)人員公知，水溶液 可W減少殘留降低副反應(yīng)；
[0041] 3)本發(fā)明的免疫佐劑組合物可W作為現(xiàn)有W/0疫苗的免疫增強劑使用，顯著提高 疫苗免疫效果。
【具體實施方式】
[0042] 為使本發(fā)明更加容易理解，下面將結(jié)合實施例來詳細說明本發(fā)明，運些實施例僅 起說明性作用，并不局限于本發(fā)明的應(yīng)用范圍，下列實施例中未提及的具體實驗方法，通常 按照常規(guī)實驗方法進行。
[0043] 本發(fā)明中的草分枝桿菌來自中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，菌 種編號為CGMCC4.il 80。
[0044] 本發(fā)明中所用的PH7.2PBS溶液配方為：1000ml蒸饋水中加入化C1 9g、Na2冊化· 12出0 6g、rfe出Κ)4· 2出0 0.4g，經(jīng)121°C高壓滅菌30分鐘后使用，但該實施方式無論在任何 情況下均不構(gòu)成對本發(fā)明的限定。
[0045] 實施例
[0046] 實施例1、丙締酸的線型烷基醋的制備
[0047] 將1克卡波姆907溶于50毫升相應(yīng)的正辛醇中，將溶液加熱到135°C。加入50微升硫 酸，將反應(yīng)混合物保持在135°C。通過將反應(yīng)混合物迅速冷卻和加入1體積蒸饋水來停止反 應(yīng)。然后，將溶液的抑調(diào)節(jié)到抑=6,在80°C下減壓（l〇-6ba)蒸發(fā)溶劑。運樣得到的產(chǎn)物溶于 蒸饋水，對蒸饋水滲析，然后凍干，得到產(chǎn)物命名為烷基卡波姆907(8)。
[0048] 實施例2、草分枝桿菌培養(yǎng)物的制備
[0049] 草分枝桿菌(Mycobacterium地lei)株置于發(fā)酵罐中進行培養(yǎng)，37°C通氣培養(yǎng)，pH 值為7.0,培養(yǎng)時間為4天，培養(yǎng)基配方:酵母提取粉Ig，濃縮麥芽汁3ml，葡萄糖25g，憐酸氨 二錠3g，憐酸氨二鐘0.8g，注射用水加至1000ml。將發(fā)酵液用甲醒溶液(0.1%)滅活后，離屯、 濃縮，棄去上清液，取下層菌體用適量生理鹽水重懸浮3次，離屯、除去雜質(zhì)，測定水分，計算 干菌體重量，與生理鹽水均勻后進行高壓均質(zhì)，然后凍干，得到草分枝桿菌培養(yǎng)物。
[0050]實例3:疫苗組合物制備
[0051 ] 3.1制備抗原：按照中國專利CN101607084制備禽流感抗原和新城疫抗原，滅活前 的病毒含量均為l〇8'w化I化〇/〇. 1ml)，本方法制備的抗原不構(gòu)成對本發(fā)明的限定，本領(lǐng)域技 術(shù)人員應(yīng)當理解，采用其他毒株制備的禽流感和新城疫抗原或者采用從商品化的產(chǎn)品依然 能夠?qū)崿F(xiàn)本發(fā)明目的。
[0052] 3.2疫苗組合物的制備:按照表1的添加量加入實施例1制備烷基卡波姆907(8)、實 施例2制備的草分枝桿菌培養(yǎng)物W及左旋咪挫，加入3.1制備滅活后的禽流感和/或新城疫 抗原，用PH=7.2的PB幻夜調(diào)整體積至100ml。室溫下攬拌30分鐘，混勻
[0053] 表1、疫苗組合物的制備 [0化4]
[0055] 實施例4、疫苗的效力試驗
[0056] 采用血清學方法進行雞新城疫部分效力檢驗。用30~60日齡SPF雞85只，未免疫對 照組5只，疫苗試驗組每組10只。試驗組每只雞肌肉注射實施例3制備的疫苗1、疫苗2、疫苗 3、疫苗4、疫苗組5、疫苗6、疫苗8各20μ1。疫苗對照組采用中國專利CN101607084實施例方法 制備的w/0佐劑疫苗，每只雞肌肉注射各20μ1。接種后21日，每只雞各采血，分離血清，進行 HI抗體效價測定，免疫組HI抗體效價的幾何平均值均>41og2未免疫對照組HI抗體效價均 《21og2。結(jié)果詳見表2。
[0057]表2疫苗組合物的雞新城疫部分效力檢驗
[0化引
[0059] 注:表中HI抗體效價為幾何平均值
[0060] 新城疫的抗體效價試驗結(jié)果分析，疫苗2、疫苗3為不合格，證明單用草分枝桿菌培 養(yǎng)物和左旋咪挫，對免疫效果影響不大，而單用烷基卡波姆907(8)為免疫佐劑合格，但抗體 效價低于對照疫苗組，無實際產(chǎn)業(yè)化的意義，但使用烷基卡波姆907(8)與草分枝桿菌培養(yǎng) 物組具有明顯的增效作用，效果最優(yōu)的為使用烷基卡波姆907(8)草分枝桿菌培養(yǎng)物左旋咪 挫組，其效果優(yōu)于傳統(tǒng)的w/0佐劑疫苗。
[0061 ]采用血清學方法進行禽流感化9亞型）部分效力檢驗。用30日齡左右SPF雞85只，未 免疫對照組5只，疫苗試驗組每組10只。試驗組每只雞各肌肉注射實施例3制備的疫苗1、疫 苗2、疫苗3、疫苗4、疫苗5、疫苗組6、疫苗7各0.3ml。疫苗對照組采用中國專利CN101607084 實施例的方法制備的w/0佐劑疫苗，每只雞肌肉注射各0.3ml。接種后21日，每只雞各采血， 分離血清，用禽流感病毒H9亞型抗原測定HI抗體。免疫組HI抗體效價的幾何平均值應(yīng)> 6.51og2，對照組HI抗體效價的幾何平均值應(yīng)《21og2。結(jié)果詳見表3。
[0062]表3疫苗組合物的禽流感化9亞型)部分效力檢驗
[0063]
[0064] 注:表中HI抗體效價為幾何平均值
[0065] 禽流感的效價試驗結(jié)果分析，疫苗2、疫苗3為不合格，說明單用草分枝桿菌培養(yǎng)物 和左旋咪挫，對免疫效果影響不大，而單用烷基卡波姆907(8)為免疫佐劑即可合格，但抗體 效價低于對照疫苗組，無實際產(chǎn)業(yè)化的意義，但使用烷基卡波姆907(8)與草分枝桿菌培養(yǎng) 物組具有明顯的增效作用，效果最優(yōu)的為使用烷基卡波姆907(8)、草分枝桿菌培養(yǎng)物和左 旋咪挫組，其效果優(yōu)于傳統(tǒng)的w/0佐劑疫苗實施例5、免疫佐劑組合物的各免疫增強劑的添 加濃度選擇。
[0066] 實施例5、免疫佐劑組合物的組成和含量試驗
[0067] 根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的理解，免疫佐劑組合物中各組分的用量對免疫效果的影響 較大為了驗證本發(fā)明免疫佐劑組合物各組分的用量，設(shè)計了本試驗。
[0068] 按照表4的組合物的各組分的加入量，按照實施例3的配制方法制備疫苗組合物并 按照實施例4的試驗方法進行新城疫抗體效價和禽流感抗體效價測定結(jié)果見表5和表6。結(jié) 果表明在表4所列的濃度范圍內(nèi)佐劑組合物中的各免疫增強劑之間均有增效作用，最優(yōu)的 組合為烷基卡波姆907(8)、草分枝桿菌培養(yǎng)物和左旋咪挫。
[0069] 表4、疫苗組合物的制備
[0070]
[0073] 注:表中HI抗體效價為幾何平均值
[0074] 表6疫苗組合物的禽流感化9亞型)部分效力檢驗
[0075]
[0076]
[0077] 實施例6、佐劑組合物作為免疫增強劑組合物試驗
[0078] 為了驗證本發(fā)明的佐劑組合物作為免疫增強在W/0疫苗中的應(yīng)用，設(shè)計了本試驗。
[0079] 6.1疫苗的制備
[0080] 6.1.1油相制備
[0081] 取注射用白油(杭州石化責任有限公司產(chǎn)品）94份和司本-806份混合后，加硬脂酸 侶2份，加熱至透明，經(jīng)12rC60分鐘高壓滅菌冷卻后備用，即為油相。
[0082] 6.1.2水相制備
[0083] 經(jīng)滅活檢驗合格的新城疫和禽流感病毒液(按照中國專利CN101607084制備），按1 :1的比例等量混合，按照表按4% (V/V)加入滅菌后的吐溫-80(廣東肇慶超能實業(yè)有限公司 產(chǎn)品，批號為20141012)，按照表7的量加入免疫增強劑組合物，充分混合均勻，即成水相。
[0084] 6.1.3乳化取油相3份置油相罐內(nèi)，開動電機慢速攬拌，然后徐徐加入1份水相，加 完后轉(zhuǎn)入乳化罐中，再W2800r/min乳化40min即可。在乳化終止前加入1%硫柳隸，使其終 濃度為0.01 %。乳化后，取3-5mlW300化/min離屯、15分鐘，應(yīng)不出現(xiàn)分層現(xiàn)象。
[0085] 表7、疫苗中免疫增強劑的添加量
[0086]
[0088]按照實施例4的試驗方法對制備的疫苗組合物進行禽流感和新城疫的效價測定結(jié) 果見表8和表9。結(jié)果表明在本發(fā)明的組合物作為免疫增強劑組合物，能顯著提高W/0佐劑的 疫苗的抗體效價。
[0089] 表8疫苗組合物的雞新城疫部分效力檢驗
[0090]
[0091] 注:表中HI抗體效價為幾何平均值
[0092] 表9疫苗組合物的禽流感化9亞型)部分效力檢驗
[0093]
[0094] W上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用W限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和 原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種免疫佐劑組合物，含有丙稀酸系聚合物和草分枝桿菌培養(yǎng)物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑組合物，其特征在于，所述丙烯酸系聚合物是丙烯酸與聚 烯丙基蔗糖交聯(lián)的聚合物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的佐劑組合物，其特征在于，其中所述丙烯酸系聚合物是烷基-聚丙烯酸。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的佐劑組合物，其特征在于，其中所述烷基-聚丙烯酸佐劑選自 由癸基-聚丙烯酸、辛基-聚丙烯酸、丁基-聚丙烯酸和甲基-聚丙烯酸組成的群組。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的佐劑組合物，其特征在于，其中所述的丙烯酸系聚合物的濃 度為 lmg/ml-40mg/ml〇6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的佐劑組合物，其特征在于，所述的丙烯酸系聚合物的濃度為 4mg/ml-24mg/ml〇7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑，其特征在于，所述的草分枝桿菌培養(yǎng)物是草分枝桿菌滅 活的全菌體、草分枝桿菌滅活的全菌體的破碎純化物、草分枝桿菌的多糖提取物或草分枝 桿菌的細胞壁提取物。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑組合物，其特征在于，所述的草分枝桿菌培養(yǎng)物的濃度為 O·032mg/ml~O·8mg/ml。9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的佐劑組合物，其特征在于，其還包括左旋咪唑，優(yōu)選 地，所述的左旋咪唑的添加量為5yg/m 1~2mg/m 1。10. -種疫苗組合物，其特征在于，所述的疫苗組合物含有禽流感抗原和/或新城疫抗 原和/或雞傳染性支氣管炎抗原和/或法氏囊抗原以及權(quán)利要求1-9所述的佐劑組合物。
【文檔編號】A61P31/16GK105879025SQ201510823284
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2015年11月19日
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】李鎖霞