Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物在抗缺氧藥物中 ...的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物在抗缺氧藥物中的應用，本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物及其在抗缺氧藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有抗缺氧作用，具有開發(fā)抗缺氧藥物的價值。
【專利說明】
Sa IV i sk i none A的苯并咪性基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生 物的組合物在抗缺氧藥物中的應用
技術領域
[0001] 本發(fā)明設及有機合成和藥物化學領域，具體設及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 氧是人類及許多生物賴W生存的重要條件。低氧化ypoxia)是指機體生命活動所 需的氧不能得到充足的供給。氧和低氧是生命活動最重要的關鍵因素，是生命科學基本理 論的重要課題。低氧的形成可分為Ξ類:第一類是外界環(huán)境氧含量降低，使正常生理活動過 程不能攝取足夠氧，如高原和航空缺氧;第二類是指因疾病等導致外界正常氧量不能充分 到達機體內(nèi)，造成屯、、腦和呼吸系統(tǒng)等的缺氧;第Ξ類是機體活動所需氧消耗量，超過了生 理動員能力，造成相對氧供給不足，常見于劇烈運動和超限量勞動。長期低氧是危害人體健 康的重要隱患，嚴重者可危及生命。因此，低氧造成屯、、腦和呼吸系統(tǒng)等損傷已成為21世紀 醫(yī)學界急待解決的主要問題之一。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導化合物并進行結(jié)構修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價值。
[0004] 本發(fā)明設及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Ayumi Ohsaki et al.， 2011 . Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia 口^6￥日131^;[.了日化日11日化0]11日1:1日'3 52(2011)1375-1377)的化合物，我們對化合物1進行 了結(jié)構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV 制備了組合物并對該組合物的抗缺氧活性進行了評價，其具有抗缺氧活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物ΙΠ 和化合物IV組成，該組合物 中化合物ΠI和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為15 %和85 %。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的化合物可W制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗缺氧作用。本發(fā)明的藥學上可接 受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] W下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加 W限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物Salviskinone A的制備
[0011] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻(Ayumi Ohsaki et al.,2011.Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii.Tetr址e化on Letters 52(2011)1375-1377)的方法。
[0012]
[0013] 實施例2 Salviskinone A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(312mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四下基漠化錠（TBAB) (0.08g)，1，2-二漠乙燒(3.760g，20.0 Ommol)和6mL的50%氨氧化鋼溶液。混合物在35攝氏 度攬拌12h"12h之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂4次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油酸/丙酬=100:1.5，v/v)， 收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末(327mg，78%)。
[001 引 iHMffi(500MHz，DMS0-d6)S6.63(s，lH)，6.37(s，lH)，5.81(s，lH)，4.51(s，2H), 3.84(s，lH)，3.79(s，2H)，2.15(s，lH)，2.04(s，lH)，1.91(s，lH)，1.65(s，lH)，1.39(s，3H), 1.08(3,6扣，0.99(3，細）.
[0016] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.07(s),183.70(s),154.38(s),147.57(s),140.21 (s),136.40(s),134.71(s),131.25(s),128.40(s),118.83(s),72.12(s),45.49(s),37.54 (s),33.58(s),31.78(s),26.17(s),25.12(s),24.66(s),23.51(s),23.17(s),22.65(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+扣+calcd for C2抽2泌r03:419.1222;found 419.1220.
[001 引
[0019] 實施例3 Salviskinone A的0-(苯并咪挫基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘(345mg， 2.5mmo 1)，艦化鐘（84mg，0.5mmo 1)和苯并咪挫（1180mg，1 Ommo 1)，混合物加熱回流化。反應 結(jié)束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取Ξ次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油酸/丙酬= 100:1.5，v/v)，收集棟色集中洗脫帶，濃縮 即得到化合物ΠI的棟色固體(215mg，43 % )。
[00別]1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S8.15(s，lH),7.54(d，J=25.0Hz，2H),7.15(s，lH), 7.06(s，lH)，6.33(d，J = 84.1Hz，lH)，6.26(s，lH)，5.66(s，lH)，4.38(d，J=15.8Hz，4H)， 3.57(3，1扣，1.96(3，1扣，1.90(3，1扣，1.77(3，把），1.51(3，1扣，1.20(3,3扣，0.99(3，細）， 0.81(3，細）.
[0022] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.51(s),154.17(s),147.37(s),146.27 (s),139.98(s),139.63(s),136.22(s),134.51(s),133.48(s),131.05(s),128.18(s), 123.93(s)，123.35(s)，118.56(d，J = 9.細z)，110.85(s)，68.55(s)，45.29(s)，44.74(s)， 37.34(s),33.36(s),25.96(s),24.94(s),24.46(s),23.32(s),22.96(s),22.42(s).
[0023] HRMS化SI):m/z[M+H]+calcd for C2姐33化〇3:457.2491;found:457.2493。
[0024]
[00巧]實施例4 Salviskinone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的合成
[0026] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于30mL乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘(690mg， S.Ommol)，艦化鐘（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，lOmmol)，混合物加熱回流9h。反應 結(jié)束后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取2次，合并有機相。依次用水和飽和 食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油酸/丙酬= 100:0.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶 并揮去溶劑即得到Salviskinone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體（159.5mg， 72%)。
[0027] 1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S6.52(s，lH)，6.40(s，lH)，5.71(s，lH)，4.15(s，2H), 3.70(s，lH)，3.37(s，4H)，3.00(s，2H)，2.50(s，4H)，2.07(s，lH)，1.96(s，lH)，1.83(s，lH), 1.57((1，1 = 1.4化，3扣，1.30(3,3扣，0.99(3，細），0.90(3,6扣.
[002引"C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.01(S),183.52(s),154.08(s),147.15(s),140.11 (s),136.23(s),134.42(s),130.84(s),128.31(s),118.62(s),68.93(s),58.73(s),56.61 (s),53.94(s),45.20(s),37.13(s),33.49(s),25.96(s),24.84(s),24.26(s),23.43(s), 22.97(s),22.33(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26出8N〇5:444.2750;found:444.2746。
[0030]
[0031 ] Salviskinone A的〇-(二徑乙胺基）乙基衍生物
[0032] 實施例5 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的合成
[0033] 將實施例4制備的Salviskinone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物（0.222邑， 0.5mmol)溶于6mL氯仿，逐滴加入氯化亞諷(0.238g，2mmol)，反應物加熱回流化。將反應物 冷卻至室溫，滴加甲醇分解過量的氯化亞諷，減壓濃縮除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化 (石油酸/丙酬100:0.3，v/v)，得到Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的淡黃色 固體（170.0mg，71%)。
[0034] 1h NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.51(s，lH)，6.22(s，lH)，5.72(s，lH)，4.16(s, lH),3.66(s,lH),3.44(s,4H),3.01(s,2H),2.80(s,2H),2.64(s,2H),2.04(s,lH),1.98(s, lH)，1.85(s，lH)，1.59(s，lH)，1.28(s，3H)，0.97(s，6H)，0.93(s，細）.
[003引"C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.41(s),153.97(s),147.04(s),140.00 (s),136.12(s),134.31(s),130.73(s),128.20(s),118.51(s),68.82(s),55.57(s),53.94 (s),45.20(s),39.10(s),37.02(s),33.39(s),25.87(s),24.76(s),24.19(s),23.33(s), 22.88(s),22.25(s).
[0036] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2姐36Ci2N03:480.2072;found:480.2070。
[0037]
[003引 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物
[0039] 實施例6 Salviskinone A的0-(二(2-甲硫基乙基)胺基）乙基衍生物的合成
[0040] 將實施例5制備的Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（0.240邑， 0.5mmo 1)溶于15mL乙醇，室溫下加入甲硫醇鋼(0.2Ig，3mmo 1)，反應物加熱回流化。減壓濃 縮除去溶劑，所得產(chǎn)物用硅膠柱層析進行純化(石油酸/丙酬100:0.5，v/v)，得到黃色固體 物，即化合物 IV(〇.169g，67%)。
[004U 1h NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.48(s，lH)，6.41(s，lH)，5.65(s，lH)，4.12(s, 2H)，3.99(s，lH)，2.94(s，2H)，2.53(d，J=15.4Hz，8H)，1.99(s，lH)，1.94(s，6H)，1.90(s， 1扣，1.77(3，1扣，1.51(3，1扣，1.23(3,3扣，0.92(3,6扣，0.83(3，細）.
[0042] 1化 NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.81(s),183.42(s),154.08(s),147.28(s),139.90 (s),136.12(s),134.44(s),130.96(s),128.09(s),118.53(s),68.94(s),53.83(s),52.15 (s),45.21(s),37.24(s),33.29(s),31.87(s),25.85(s),24.86(s),24.38(s),23.21(s), 22.88(s),22.34(s),14.38(s).
[0043] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2姐42N〇3S2:504.2606;found:504.2603。
[0044]
[0045] 實施例7小鼠特異性屯、肌缺氧實驗
[0046] 1、方法：
[0047] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的15mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的85mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到lOOmg組合物， 使用時用水溶解運lOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[004引50只昆明小鼠，體重(20±2)g。隨機分為5組，灌胃給藥。前2組給予0.3%簇甲基纖 維素鋼(CMC-Na)溶液，后3組分貝給予化合物III、化合物IV和組合物，50min后，除第1組外， 均腹腔注射異丙腎上腺素（IS0)15mg · Kg-i，15min后，將小鼠放入常壓缺氧裝置中，記錄小 鼠死亡時間及耗氧量。
[0049] 結(jié)果；
[0050] 異丙腎上腺素可通過興奮屯、臟β受體，使屯、肌耗氧量增加。本實驗顯示，與溶媒對 照組相比，組合物O.OlOg · Kg-i能顯著對抗異丙腎上腺素 （ISO)導致的屯、肌耗氧量增加 (Ρ< 0.01)，同時延長小鼠缺氧密閉狀態(tài)下的存活時間（P<〇.01)，結(jié)果見表1。而化合物III和化 合物IV均不具備此作用。
[0051]表1待試物對異丙腎上腺素致特異性缺氧小鼠的影響(x，n = 10)
[0化2]
[0053] 注:1中<0.01，與對照組比較，2)P<0.01，與異丙腎上腺素組比較。
[0054] 實施例8小鼠常壓窒息性缺氧實驗
[0化5] 1、方法：
[0056] 40只昆明小鼠，體重(20±2)g。隨機分為4組，灌胃給藥。第1組給予0.3%簇甲基纖 維素鋼(CMC-Na)溶液，后3組分別給予含組合物、化合物ΠI和化合物IV的CMC-Na溶液，濃度 為O.OlOg-Kg^i。給藥50min后，置于廣口瓶中并蓋緊瓶塞(瓶內(nèi)放置5g鋼石灰）。^呼吸停止 為標志，記錄小鼠存活時間。
[0057] 2、結(jié)果：
[005引與溶媒對照組相比，組合物的O.OlOg . Kg-i使小鼠在常壓密閉條件下的存活時間 延長了43.25%，差異具有顯著性(P<0.01)，而化合物III和化合物IV均未能使小鼠在常壓 密閉條件下的存活時間顯著延長。
[0059] 實施例9小鼠減壓缺氧實驗
[0060] 1、方法：
[0061] 40只昆明小鼠，體重（20±2)g。隨機分為4組，灌胃給藥。給藥組分別給予組合物、 化合物ΠI和化合物IV，濃度為0.0 lOg · Kg-I，對照組給予0.3 % CMC-Na溶液，灌胃體積均為 2ml · Kg^。50min后，各給藥組和對照組各取5只，放入減壓裝置中，在26.7Kpa(相當于海拔 約10000m)時停止減壓，保持此壓力不變，待對照組動物死亡80 %時，立即停止減壓，緩緩放 入空氣，取出動物，記錄各組死亡及存活數(shù)目，重復操作至實驗完成。
[006^ 2、結(jié)果：
[0063] 組合物O.OlOg . Kg-i使小鼠在減壓缺氧條件下的存活率由對照組的20%提高至 40%，差異具有顯著性(P<〇.05);而化合物ΙΠ 和化合物IV對小鼠在減壓缺氧條件下的存活 率為20%，均未有提高。
[0064] 結(jié)論:組合物可顯著提高異丙腎上腺素致特異性缺氧的存活時間，窒息性缺氧和 急性減壓缺氧小鼠的存活率，提供了組合物在制備抗缺氧藥物中的用途。而化合物ΠΙ和化 合物IV均不具有上述活性。
[0065] 實施例10本發(fā)明所設及組合物片劑的制備
[0066] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0067]實施例11本發(fā)明所設及組合物膠囊的制備
[006引取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為15%和85%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為15 %和85 %充分混合。3. -種如權利要求1所述的組合物在抗缺氧藥物中的應用。4. 根據(jù)權利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應用，其特征在于:所述缺氧為異丙 腎上腺素致特異性缺氧。5. 根據(jù)權利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應用，其特征在于:所述缺氧為常壓 室息性缺氧。6.根據(jù)權利要求3所述的組合物在抗缺氧藥物中的應用，其特征在于:所述缺氧為減壓 缺氧。
【文檔編號】C07D235/08GK105998005SQ201610256681
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年4月22日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司