一種超聲造影劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種超聲造影劑及其制備方法，屬于超聲成像劑領域，一種超聲造影劑，由殼膜材料和惰性氣體組成，所述殼膜材料包含磷脂和白蛋白材料，所述白蛋白材料與磷脂的重量比為1∶4～3∶4；所述的惰性氣體為六氟化硫或全氟丙烷。本發(fā)明制備的微泡超聲造影劑80％的微泡粒徑范圍小于2μm，粒徑分布均一，分散度較市售聲諾維更好，體內心肌灌注效果也更佳，適用于心肌微循環(huán)灌注顯影，其顯像效果好，成本低，易于儲存，具有廣闊的臨床應用前景。
【專利說明】
一種超聲造影劑及其制備方法
技術領域
[0001 ]本發(fā)明屬于超聲成像劑領域，具體涉及一種超聲造影劑及其制備方法【背景技術】
[0002]超聲造影已越來越廣泛應用于臨床診斷，比如檢測肝腎脾及淺表器官腫塊的血供情況，判斷腫塊的性質，心腔顯影等。目前，國內唯一批準使用的超聲造影劑為瑞士生產(chǎn)的六氟化硫微泡(商品名:Sonov聲諾維)。該微泡可以提高血液回聲，從而提高信噪比，主要增強心臟腔室的渾濁度從而清楚地描繪出左心室內膜的邊緣，用于提高大血管及小血管多普勒信噪比，提高病變血管形成的顯像效果，主要用于肝脾腎淺表器官及心腔造影。但其對微血管的灌注效果較差，背景噪聲較大，尤其是心肌微循環(huán)及斑塊內微血管灌注效果相對較差，且價格昂貴。心血管疾病已成為致殘致死的重要疾病之一，小血管及微血管病變又是心血管疾病的重要組成部分，有研究顯示X綜合癥與心臟微血管病變有關，目前對微血管病變的檢查還缺乏一種效果較好的無創(chuàng)檢查方法，冠狀動脈造影及雙源CT僅能顯示大于100M1 的血管，且有創(chuàng)及較大輻射，對微血管無法顯示。目前，聲諾維心肌灌注顯影效果較差，背景噪聲較大，極大地影響了對心肌微循環(huán)病變的判斷。另外，肝腎脾淺表器官及腫塊等的病變需要進一步了解微血管情況，對病情的診斷及治療具有重大幫助。因此，臨床上急需一種能進一步增強微循環(huán)顯影，價格低的超聲造影劑。
【發(fā)明內容】
[0003]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術中超聲造影劑所存在的價格昂貴、制備成本高、 心肌灌注效果不佳和微循環(huán)顯影差的上述不足，提供一種超聲造影劑及其制備方法，通過在超聲造影劑的成膜材料中加入白蛋白并相應調整比例，可使微泡的成泡率增加，分散度更好，粒徑更小，體內心肌灌注效果也更好。同時獨特的配方設計可減少昂貴的磷脂所占比例，在保證高成泡率的基礎上降低了生產(chǎn)成本。
[0004]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術方案:
[0005]—種超聲造影劑，由殼膜材料和惰性氣體組成，所述殼膜材料包含磷脂和白蛋白材料，所述白蛋白材料與磷脂的重量比為1:4?3:4;所述的惰性氣體為六氟化硫或全氟丙烷。
[0006]白蛋白材料是由氨基酸組成，其本身帶有電荷，當制備成微泡時也會使微泡帶上電荷，帶相同電荷的微泡之間存在相互排斥，使得微泡間分散也更好。同時由于白蛋白也是一種成泡材料，其加入會增加成泡率，當在高滲液中振蕩時，微泡膨脹性更小，制備的微泡超聲造影劑的粒徑就更小。當白蛋白材料與磷脂的重量比大于3:4時，此時會生成較多較大的微泡，制備的超聲造影劑的粒徑不能滿足微循環(huán)顯影的要求。當白蛋白材料與磷脂的重量比小于1:4時，制備的微泡成泡率會降低，分散度不佳。
[0007]進一步地，上述磷脂為1，2_硬脂酰磷脂酰膽堿、L-磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺中的一種或幾種。上述磷脂類包覆材料進入人體后，易優(yōu)先被富含網(wǎng)狀內皮細胞的組織如肝、脾及骨髓所攝取，具有靶向性， 同時磷脂殼膜可生物降解，對人體無害，其儲存穩(wěn)定性也較好。
[0008]進一步地，上述白蛋白材料為人血白蛋白、牛血清白蛋白、兔血清白蛋白、豬血清白蛋白、羊血清白蛋白和馬血清白蛋白中的一種或幾種。白蛋白是血液的組成部分之一，也是由氨基酸組成，作為微泡成膜材料不僅可增加成泡率還可使微泡分散度更好，進入人體后無毒副作用。
[0009]本發(fā)明的另一目的在于提供一種超聲造影劑的制備方法，包括以下步驟:
[0010]S1配制甘露醇-磷酸鹽緩沖液、聚乙二醇溶液備用，稱取預冷凍后的l，2-硬脂酰磷脂酰膽堿和L-磷脂酰乙醇胺放入載藥容器中備用；
[0011]S2向所述載藥容器中加入白蛋白材料、甘油、葡萄糖水、甘露醇-磷酸鹽緩沖液和聚乙二醇溶液，蓋緊器蓋，置于漩渦混合器上混勻1?2分鐘，然后進行凍融操作；[〇〇12] S3將載藥容器中的空氣置換為六氟化硫氣體，密封蓋口，然后將載藥容器放入超聲微泡制備儀內振蕩45?120秒；
[0013] S4冷凍干燥步驟S3得到的產(chǎn)物；[〇〇14] S5將步驟S4得到的凍干粉針劑，注入六氟化硫氣體，封蓋。[〇〇15]使用前注入0.9%生理鹽水lml震蕩45s。上述制備方法通過將凍融方法，機械震蕩法聯(lián)合冷凍干燥方法并用可制備出粒徑更小的微泡，同時具有較佳的分散度。
[0016]進一步地，上述甘露醇-磷酸鹽緩沖液配制包括將20wt %甘露醇溶液與磷酸鹽緩沖液按體積比1:1混合配制成l〇wt %甘露醇溶液，上述聚乙二醇溶液配制包括將聚乙二醇 4000用0.9wt %的生理鹽水配制成1 Owt %聚乙二醇溶液。
[0017]進一步地，上述步驟S1中預冷凍的溫度為-30?-10°c，預冷凍的時間為30? 60min〇[〇〇18]進一步地，上述步驟S2中凍融操作包括將載藥容器放入25?50°C的水浴箱中水浴 10?30分鐘，隨后取出在-30?-10°C冰箱中冷凍20?40分鐘，然后再在25?50°C的水浴箱中水浴10?30分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻1-2分鐘。凍融處理可使磷脂的多晶結構變?yōu)閱尉ЫY構，反復凍融操作可使混合溶液體系顆粒分散更加均勻，使磷脂溶液更易成泡，同時粒徑均勻且更小。[〇〇19]進一步地，上述步驟S2中白蛋白材料、甘油、葡萄糖水、聚乙二醇溶液和甘露醇-磷酸鹽緩沖液的體積為1?10:1?5:10?40:1?10:50?100。該配方比例范圍下可減少昂貴的磷脂用量，降低生產(chǎn)成本，且成泡率高。
[0020]進一步地，上述白蛋白材料的質量濃度為15?30%，上述葡萄糖水的質量濃度為5 ?20%。在白蛋白材料中加入葡萄糖水可以增加在制備造影劑微泡時微泡的產(chǎn)出率，同時對脂膜起到穩(wěn)定分散的作用。
[0021]進一步地，上述步驟S4的冷凍干燥條件是冷凍干燥的時間為20?30小時，冷凍干燥溫度為-60?-40°C。冷凍干燥溫度高于-40°C時，超聲造影劑微泡中有液體存在，當處在真空中時，液體產(chǎn)生沸騰，生成氣泡，破壞原微泡體系的分散度。冷凍溫度低于_60°C時，工藝能耗過大，不利于節(jié)能。所制凍干粉穩(wěn)定易于儲存運輸。
[0022]與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果:
[0023]1、本發(fā)明在超聲造影劑的成膜材料中加入白蛋白并相應調整用量比例，可使微泡的成泡率增加，同時80%的微泡粒徑范圍小于2mi，粒徑分布均一(見圖7)，分散度較聲諾維更好，體內心肌灌注效果更好，適用于心肌微循環(huán)灌注顯影，顯像效果好，具有廣闊的臨床應用前景。[〇〇24]2、本發(fā)明使用10wt %含甘露醇高滲溶液制備微泡可使微泡的粒徑更小，同時甘露醇還可用作凍干保護劑，體系不需額外添加凍干保護劑。
[0025]3、本發(fā)明制備液配方該配方可減少昂貴的磷脂比例，降低生產(chǎn)成本，且成泡率高。
[0026]4、本發(fā)明在超聲造影劑的制備方法上采用了凍融方法，機械震蕩法聯(lián)合冷凍干燥技術并用可制備出粒徑更小的微泡，全程無菌制成的凍干粉易于儲存運輸?！靖綀D說明】:
[0027]圖1為本發(fā)明實施例1制備的磷脂聯(lián)合白蛋白超聲造影劑的外觀圖。
[0028]圖2為本發(fā)明對比例1制備的相同磷脂比例未加入白蛋白超聲造影劑的外觀圖。 [〇〇29]圖3為市售聲諾維的微泡溶液圖。
[0030]圖4為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑凍干粉劑的外觀圖。
[0031]圖5為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑配置后的微泡形態(tài)圖(200倍光鏡下觀察)。
[0032]圖6為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑配置后的微泡形態(tài)圖(200倍光鏡下多視野觀察)。
[0033]圖7為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑配置后的微泡形態(tài)圖(400倍光鏡下觀察)。
[0034]圖8為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑配置后的微泡形態(tài)圖(400倍光鏡下多視野觀察)。
[0035]圖9為市售聲諾維配置后的微泡形態(tài)圖(200倍光鏡下觀察)。[〇〇36]圖10為市售聲諾維配置后的微泡形態(tài)圖(造影劑稀釋4倍后200倍光鏡下觀察)。
[0037]圖11為市售聲諾維配置后的微泡形態(tài)圖(400倍光鏡下觀察)。[〇〇38]圖12為造影前正常兔左室短軸切面聲像圖。[〇〇39]圖13為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑在對正常兔給藥后的心肌灌注顯影圖像。
[0040]圖14為本發(fā)明實施例1制備的超聲造影劑在對正常兔給藥后的心肌灌注多次觀察顯影圖像。
[0041]圖15為市售聲諾維超聲造影劑對正常兔給藥后的心肌灌注顯影圖像?！揪唧w實施方式】[〇〇42]下面結合試驗例及【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步的詳細描述。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本
【發(fā)明內容】
所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。[〇〇43]實施例1超聲造影劑的制備[〇〇44]1、溶液配制:采用磷酸鹽緩沖液(Hyclone，賽默飛世爾生物化學制品有限公司)與20wt %甘露醇溶液按體積比1:1混合配制成10wt %甘露醇溶液，采用0.9wt %的生理鹽水配制聚乙二醇4000為10wt%聚乙二醇4000溶液。
[0045]2、在-20°C冰箱預凍1，2_硬脂酰磷脂酰膽堿
[0046](1，2-Distearoyl-sn-glycer〇-3-phospocholine，sigma公司)、L_磷脂酰乙醇胺
[0047](1，2-Dipalmitoyl-sn-glycer〇-3-phospoethanolamine，sigma公司)40分鐘，在電子天平上稱取1，2-硬脂酰磷脂酰膽堿4mg，L-磷脂酰乙醇胺2mg，放入容積為3.6ml的玻璃小瓶中備用。[〇〇48]3、向裝有磷脂的玻璃小瓶中加入20wt%人血白蛋白(BaxterAG)50yl，甘油50yl，10wt%聚乙二醇溶液50yl，10wt%葡萄糖水200yl，10wt%的甘露醇溶液700yl。將小玻璃瓶蓋緊，在漩渦混合器上混勻2分鐘。[〇〇49]4、將小玻璃瓶放入45 °C的水浴箱中水浴20分鐘，取出在-20 °C冰箱中冷凍30分鐘，然后再在45°C的水浴箱中水浴20分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻2分鐘。
[0050]5、將小玻璃瓶中的空氣置換為六氟化硫氣體，通過封口膠密封帶蓋的瓶口，然后將小玻璃瓶放入超聲微泡制備儀內振蕩90秒。[0051 ]6、將制備的微泡放入-20 °C冰箱中預凍5小時，然后再放入-50 °C冷凍干燥機中冷凍干燥24小時，凍干成粉末狀，在取出凍干粉末前壓緊瓶蓋，取出小瓶后在小瓶內充入六氟化硫氣體即制得固態(tài)的超聲造影劑。[〇〇52]在使用微泡時，從小瓶瓶蓋處注入0.9%生理鹽水lml，將小瓶放入微泡制備儀中振蕩45秒制備成微泡懸混液。[〇〇53]微泡的使用，用20ml空針抽取0.9%生理鹽水4ml備用，抽出小瓶中的微泡與0.9%生理鹽水混勻使用。
[0054]對實施1制備的超聲造影劑配置后的微泡形態(tài)圖(圖5、圖6、圖7、圖8)觀察可知其粒徑分布大多數(shù)位于2mi范圍內，且分布均勻，分散度好。[〇〇55]實施例2超聲造影劑的制備[〇〇56]1、溶液配制:采用磷酸鹽緩沖液(Hyclone，賽默飛世爾生物化學制品有限公司)與20wt %甘露醇溶液按體積比1:1混合配制成10wt %甘露醇溶液，采用0.9wt %的生理鹽水配制聚乙二醇4000為10wt%聚乙二醇4000溶液。[〇〇57]2、在_20°C冰箱預凍1，2_硬脂酰磷脂酰膽堿
[0058](1，2-Distearoyl-sn-glycer〇-3-phospocholine，sigma公司)、L_磷脂酰乙醇胺
[0059](1，2-Dipalmitoyl-sn-glycer〇-3-phospoethanolamine，sigma公司)40分鐘，在電子天平上稱取1，2-硬脂酰磷脂酰膽堿4mg，L-磷脂酰乙醇胺2mg，放入容積為3.6ml的玻璃小瓶中備用。
[0060]3、向裝有磷脂的玻璃小瓶中加入20wt %牛血清白蛋白lOOiil，甘油20yl，10wt %聚乙二醇溶液30yl，10wt%葡萄糖水300yl，10wt%的甘露醇溶液500yl。將小玻璃瓶蓋緊，在漩渦混合器上混勻2分鐘。[0061 ]4、將小玻璃瓶放入45 °C的水浴箱中水浴20分鐘，取出在-20 °C冰箱中冷凍30分鐘，然后再在45°C的水浴箱中水浴20分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻2分鐘。
[0062]5、將小玻璃瓶中的空氣置換為六氟化硫氣體，通過封口膠密封帶蓋的瓶口，然后將小玻璃瓶放入超聲微泡制備儀內振蕩90秒。[〇〇63]6、將制備的微泡放入-25 °C冰箱中預凍6小時，然后再放入-40 °C冷凍干燥機中冷凍干燥24小時，凍干成粉末狀，在取出凍干粉末前壓緊瓶蓋，取出小瓶后在小瓶內充入六氟化硫氣體即制得固態(tài)的超聲造影劑。[〇〇64]在使用微泡時，從小瓶瓶蓋處注入0.9%生理鹽水lml，將小瓶放入微泡制備儀中振蕩45秒制備成微泡懸混液。[〇〇65]微泡的使用，用20ml空針抽取0.9%生理鹽水4ml備用，抽出小瓶中的微泡與0.9%生理鹽水混勻使用。[〇〇66]實施例3超聲造影劑的制備[〇〇67]1、溶液配制:采用磷酸鹽緩沖液(Hyclone，賽默飛世爾生物化學制品有限公司)與20wt %甘露醇溶液按體積比1:1混合配制成10wt %甘露醇溶液，采用0.9wt %的生理鹽水配制聚乙二醇4000為10wt%聚乙二醇4000溶液。[〇〇68]2、在_30°C冰箱預凍1，2_硬脂酰磷脂酰膽堿
[0069](1，2-Distearoyl-sn-glycer〇-3-phospocholine，sigma公司)、L_磷脂酰乙醇胺
[0070](1，2-Dipalmitoyl-sn-glycer〇-3-phospoethanolamine，sigma公司)50分鐘，在電子天平上稱取1，2-硬脂酰磷脂酰膽堿7mg，L-磷脂酰乙醇胺4mg，放入容積為3.6ml的玻璃小瓶中備用。[〇〇71]3、向裝有磷脂的玻璃小瓶中加入20wt %兔血白蛋白75yl，甘油35yl，10wt %聚乙二醇溶液40yl，10wt%葡萄糖水250yl，10wt%的甘露醇溶液600yl。將小玻璃瓶蓋緊，在漩渦混合器上混勻1分鐘。[〇〇72]4、將小玻璃瓶放入45 °C的水浴箱中水浴20分鐘，取出在-20 °C冰箱中冷凍30分鐘，然后再在45°C的水浴箱中水浴20分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻2分鐘。
[0073]5、將小玻璃瓶中的空氣置換為六氟化硫氣體，通過封口膠密封帶蓋的瓶口，然后將小玻璃瓶放入超聲微泡制備儀內振蕩1 〇〇秒。
[0074]6、將制備的微泡放入-25 °C冰箱中預凍6小時，然后再放入-40 °C冷凍干燥機中冷凍干燥24小時，凍干成粉末狀，在取出凍干粉末前壓緊瓶蓋，取出小瓶后在小瓶內充入六氟化硫氣體即制得固態(tài)的超聲造影劑。[〇〇75]在使用微泡時，從小瓶瓶蓋處注入0.9%生理鹽水lml，將小瓶放入微泡制備儀中振蕩45秒制備成微泡懸混液。[〇〇76]微泡的使用，用20ml空針抽取0.9%生理鹽水4ml備用，抽出小瓶中的微泡與0.9%生理鹽水混勻使用。[〇〇77]對比例1超聲造影劑的制備[〇〇78]1、溶液配制:采用磷酸鹽緩沖液(Hyclone，賽默飛世爾生物化學制品有限公司)與20wt %甘露醇溶液按體積比1:1混合配制成10wt %甘露醇溶液，采用0.9wt %的生理鹽水配制聚乙二醇4000為10wt%聚乙二醇4000溶液。[〇〇79]2、在一 20°C冰箱預凍1，2_硬脂酰磷脂酰膽堿
[0080](1，2-Distearoyl-sn-glycer〇-3-phospocholine，sigma公司)、L_磷脂酰乙醇胺[0081 ](1，2-Dipalmitoyl-sn-glycer〇-3-phospoethanolamine，sigma公司)40分鐘，在電子天平上稱取1，2-硬脂酰磷脂酰膽堿4mg，L-磷脂酰乙醇胺2mg，放入容積為3.6ml的玻璃小瓶中備用。[〇〇82]3、向裝有磷脂的玻璃小瓶中加入甘油50yl，10wt%聚乙二醇溶液50yl，10wt%葡萄糖水200yl，10wt%的甘露醇溶液750yl。將小玻璃瓶蓋緊，在漩渦混合器上混勻2分鐘。 [〇〇83]4、將小玻璃瓶放入45 °C的水浴箱中水浴20分鐘，取出在-20 °C冰箱中冷凍30分鐘，然后再在45°C的水浴箱中水浴20分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻2分鐘。
[0084] 5、將小玻璃瓶中的空氣置換為六氟化硫氣體，通過封口膠密封帶蓋的瓶口，然后將小玻璃瓶放入超聲微泡制備儀內振蕩90秒。
[0085]6、將制備的微泡放入一 20 °C冰箱中預凍5小時，然后再放入_50°C冷凍干燥機中冷凍干燥24小時，凍干成粉末狀，在取出凍干粉末前壓緊瓶蓋，取出小瓶后在小瓶內充入六氟化硫氣體即制得固態(tài)的超聲造影劑。[〇〇86]在使用微泡時，從小瓶瓶蓋處注入0.9%生理鹽水lml，將小瓶放入微泡制備儀中振蕩45秒制備成微泡懸混液。[〇〇87] 微泡的使用，用20ml空針抽取0.9%生理鹽水4ml備用，抽出小瓶中的微泡與0.9% 生理鹽水混勻使用。
[0088]將對比例1和實施例1制備的微泡造影劑進行肉眼觀察對比可知，實施例1制備的微泡造影劑其成泡率更高(圖1、圖2所示)，從圖3、圖4可以看出，從外觀圖上可見自制微泡成泡率較高，凍干粉有利于儲存運輸。
[0089]對比例2
[0090]制備液中沒有加入10wt %的甘露醇溶液，除此之外，按照與實施例1相同的方法制備了對比例2的物質。得到超聲造影劑粒徑較大，分散度也不好。
[0091]對比例3
[0092]制備液中加入的人血白蛋白的重量含量為磷脂的100%，除此之外，按照與實施例 1相同的方法制備了對比例3的物質。得到超聲造影劑粒徑較大，分布不均勻，分散度也不好。
[0093]對比例4
[0094]制備液中加入的人血白蛋白的重量含量為磷脂的10 %，除此之外，按照與實施例1 相同的方法制備了對比例4的物質。得到超聲造影劑粒徑較大，分布不均勻，分散度也不好。
[0095]試驗例
[0096]對市售聲諾維超聲造影劑配置后對其微泡形態(tài)圖進行觀察如圖9、圖10和圖11所示，從附圖可以看出其微泡成團分布，分散度相對較差，粒徑大小不一，且粒徑均大于實施例1制備的超聲造影劑的粒徑。[〇〇97]以兔為模擬動物，采用靜脈團注注射方式給藥對正常兔的心肌灌注的超聲顯像進行測定，測試結果如圖12、圖13、圖14和圖15所示，可以看出實施例1制備的超聲造影劑對正常兔心肌灌注顯影效果較好，多次觀察其微泡造影后可見兔心肌灌注顯影效果均勻。反觀市售聲諾維超聲造影劑對相同的正常兔心肌灌注回聲不均勻，部分節(jié)段出現(xiàn)灌注稀疏或缺失(圖15中箭頭所示)嚴重影響對疾病的診斷。動物實驗也顯示實施例1制備的微泡造影劑的心肌灌注效果要優(yōu)于聲諾維。這是因為微循環(huán)內徑不大于5mi，微泡進去體內后隨體溫的增高及超聲輻照共振，微泡粒徑會成倍增加，所以粒徑更小分散好的微泡更易灌注。成團分布及粒徑較大的微泡不易進入微循環(huán)。
【主權項】
1.一種超聲造影劑，由殼膜材料和惰性氣體組成，其特征在于，所述殼膜材料包含磷脂 和白蛋白材料，所述白蛋白材料與磷脂的重量比為1:4?3:4;所述的惰性氣體為六氟化硫 或全氟丙烷。2.根據(jù)權利要求1所述的超聲造影劑，其特征在于，所述磷脂為1，2_硬脂酰磷脂酰膽 堿、L-磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和二硬脂酰磷脂酰乙醇 胺中的一種或幾種。3.根據(jù)權利要求1所述的超聲造影劑，其特征在于，所述白蛋白材料為人血白蛋白、牛 血清白蛋白、兔血清白蛋白、豬血清白蛋白、羊血清白蛋白和馬血清白蛋白中的一種或幾 種。4.一種權利要求1-3任一項所述的超聲造影劑的制備方法，其特征在于，包括以下步 驟:S1配制甘露醇-磷酸鹽緩沖液、聚乙二醇溶液備用，稱取預冷凍后的1，2_硬脂酰磷脂 酰膽堿和L-磷脂酰乙醇胺放入載藥容器中備用；S2向所述載藥容器中加入白蛋白材料、甘油、葡萄糖水、甘露醇-磷酸鹽緩沖液和聚乙 二醇溶液，蓋緊器蓋，置于漩渦混合器上混勻1?2分鐘，然后進行凍融操作；S3將載藥容器中的空氣置換為六氟化硫氣體，密封蓋口，然后將載藥容器放入超聲微 泡制備儀內振蕩45?120秒；S4冷凍干燥步驟S3得到的產(chǎn)物；S5將步驟S4得到的凍干粉針劑，注入六氟化硫氣體，封蓋。5.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述甘露醇-磷酸鹽緩沖液配制包括 將20wt %甘露醇溶液與磷酸鹽緩沖液按體積比1:1混合配制成10wt %甘露醇-磷酸鹽緩沖 液，所述聚乙二醇溶液配制包括將聚乙二醇4000用0.9wt %的生理鹽水配制成1 Owt %聚乙二醇溶液。6.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1中預冷凍的溫度為-30?-l〇°C，預冷凍的時間為30?60min。7.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中凍融操作包括將載藥容 器放入25?50°C的水浴箱中水浴10?30分鐘，隨后取出在-30?-10°C冰箱中冷凍20?40分 鐘，然后再在25?50 °C的水浴箱中水浴10?30分鐘，取出后在漩渦混合器上混勻1 -2分鐘。8.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中白蛋白材料、甘油、葡萄 糖水、聚乙二醇溶液和甘露醇-磷酸鹽緩沖液的體積比為1?10:1?5:10?40:1?10:50? 100〇9.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述白蛋白材料的質量濃度為15? 30%，所述葡萄糖水的質量濃度為5?20%。10.根據(jù)權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S4的冷凍干燥條件是冷凍 干燥的時間為20?30小時，冷凍干燥溫度為-60?-40°C。
【文檔編號】A61K49/22GK105999314SQ201610543642
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月11日
【發(fā)明人】劉學兵, 尹立雪, 陳敏
【申請人】四川省人民醫(yī)院