專利名稱：：奇壬醇衍生物及其在制備前炎癥細胞因子抑制劑中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及奇壬醇衍生物及其醫(yī)藥用途。技術(shù)背景炎癥(inflammation)是具有血管系統(tǒng)的活體組織對各種炎癥因子引起的損傷所發(fā)生的以防御為主的反應。由于具備血管系統(tǒng)，其對損傷的反應除保留了上述簡單形式外，更進一步形成了以血管反應為中心的局部和全身防御反應。血管反應導致血管內(nèi)的液體和白細胞滲出進入損傷部位，局限和殺滅損傷因子，清除、吸收壞死組織，使機體防御反應更復雜，更完善。血管反應是炎癥過程的主要特征和防御的中心環(huán)節(jié)。抗損傷的同時，機體通過實質(zhì)細胞(arenehymaleell)和間質(zhì)細胞(mesenehymaleell)的再生，修復損傷組織。炎癥實質(zhì)上是以損傷起始、愈復告終的復雜的病理過程，損傷和抗損傷貫穿炎癥反應的全過程。免疫系統(tǒng)是不同類型的細胞及其介體相互作用的復雜網(wǎng)絡(luò)。介體是胞間的信號分子，它們調(diào)節(jié)例如所涉及細胞的生長、分化和功能(AraiKF,Wa丄/fez.^'oc力e瓜1990,59:783)。一組重要的介體是細胞因子，其各種各樣的分子特性、作用機制、生理功能和它們在眾多疾病中所起的作用是當前廣泛研究的課題。目前已知有許多細胞因子負責控制對病原體的免疫防御應答。IL-1P是由單核巨噬細胞、樹突狀細胞、纖維母細胞等產(chǎn)生的一種細胞因子，能刺激T細胞和B細胞的增殖和分化、刺激造血以及參與炎癥反應。據(jù)文獻報道，IL-1P抑制劑可用于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、敗血癥、心力衰竭、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷、呼吸道病毒感染、抑郁癥等多種疾病的治療(TaylorPC,eta丄O/rr./%3ra.Zes.,2003，9(14):1095-1096;DellingerRP,ai.67i/i//'ect2003，36(10):1259—1265;DiwanA，eta丄Curr2003，3(2):161-182;HalleguaDS,a入j/m"As.'2002,61(11):960-967)。TNF-a是一種前體炎癥細胞因子，主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生。TNF-d具有多種生物學活性，可殺傷或抑制腫瘤細胞，提高中性粒細胞的吞噬能力，增加過氧化物陰離子產(chǎn)生，參與眾多的炎癥反應過程。TNF-ci在類風濕性關(guān)節(jié)炎病人體內(nèi)過度表達，并在滑膜中，尤其是軟骨-關(guān)節(jié)翳的連接處水平升高，從而導致病情進一歩惡化。TNF-a與關(guān)節(jié)破壞有關(guān)，因為它能刺激骨和軟骨的重吸收，通過抑制骨膠原的合成而引起炎癥并抑制骨的形成，還引起類風濕性關(guān)節(jié)炎病人疲勞、不適、發(fā)熱、貧血和惡病質(zhì)。TNF-a抑制劑可用于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)炎、炎性腸病(克隆氏病和潰瘍性結(jié)腸炎)、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、結(jié)節(jié)病、敗血癥、感染性休克、呼吸道病毒感染等多種疾病的治療(OgataH,"a丄Ci/rr/%ar/7Zfes.,2003，9(14):1107—1113;MollerDR,"a丄#ed,2003,253(1):31-40:NishimuraF,et3丄/尸e"W。"t。義2003,74(1):97-102;WeinbergJM,eta/.C""、2003,71(1):41-45;SackM'eta義/%sr/zscW2002，94(1-2):123-135;BurnhamE，a7.Crj'fCare#ec/'2001，29(3):690-691)。作為一種細胞信號分子，一氧化氮(NO)是一種內(nèi)源的防御分子。在炎癥反應中，宿主明顯產(chǎn)生的大量NO可能為防御細胞、病毒、寄生蟲的入侵建起一道防線，同時NO的非特異性免疫可阻止病原體入侵，且能殺死腫瘤細胞，誘導其凋亡。研究證實，NO能誘導COL0205細胞系(低分化人結(jié)腸癌)、H印g2細胞系(人肝癌細胞)、HL60(人早幼粒白血病細胞)、U937(人單核細胞白血病細胞)凋亡，并上調(diào)P53蛋白的表達。NO既抑制淋巴細胞增殖，又促發(fā)包括類風濕性關(guān)節(jié)炎在內(nèi)的許多免疫反應及免疫病理過程。由NO促發(fā)類風濕關(guān)節(jié)炎、SLE(系統(tǒng)性紅斑狼瘡)等免疫病理過程與其合成被過度誘導有關(guān)，所合成的NO反過來抑制自身增殖Thl及許多細胞因子的分泌，恰可防止高免疫反應，從而延緩上述免疫病理過程的發(fā)展。N0作為一種自分泌或旁分泌介質(zhì)，具有調(diào)節(jié)中性粒細胞的粘附、聚集、趨化反應及釋放活性物質(zhì)等多重功能，NO抑制中性粒細胞、巨噬細胞釋放氧自由基及溶酶體酶已被實驗研究證實。中性粒細胞暴露給N0，使細胞內(nèi)谷胱甘肽降低，可激活HMPS"6]。用L一NMMA(N0自由基合成酶抑制劑)處理后HMPS基礎(chǔ)活性受抑制。N0與細胞內(nèi)谷胱甘肽反應并激活HMPS對抵抗NO的細胞毒作用有重要意義(IalentiA,ets丄/尸力ar/K3Co7，1992,211:177;IuvoneT,ets丄^/r/尸/ar鵬co,1994,265(l-2):89;NusslerAK，eta丄/￡耶1992，176(1):261-264;SouthamE，eta丄〃e〃rop力ar瓜1993，32:1267;DeVenteJ.Afe"5"ci，1998,87(1):207-241;MuradF./j鵬，1996,276(14):1189-1192;MuradF.力/^efr//7t^i1999,38:1856-68;MayerB，eta丄/A'WC力e馮1998,273(6):3264-3270)。類風濕性關(guān)節(jié)炎是一種不明原因的慢性全身性免疫反應性炎性疾病，免疫反應多發(fā)生于關(guān)節(jié)滑膜，可導致關(guān)節(jié)損傷，為最常見的結(jié)締組織疾病，目前標準的治療藥物包括非甾體類抗炎藥及改善病情抗風濕藥(DMARDs)。這兩類藥主要是在不同環(huán)節(jié)上抑制前列腺素的合成，均不能影響關(guān)節(jié)損傷進程，長期耐受性和有效性也有限(譚偉.類風濕性關(guān)節(jié)炎的用藥問題.醫(yī)藥導報，1997，16:142)。白介素-1P(IL-1P)及腫瘤壞死因子-a(TNF-a)被認為是導致關(guān)節(jié)炎的關(guān)鍵細胞因子，在類風濕性關(guān)節(jié)炎和其它炎癥性自身免疫疾病的發(fā)展和惡化中具有重要的病理學意義。能夠抑制白細胞介素和腫瘤壞死因子等細胞因子作用的物質(zhì)因此應該具有治療意義，用于治療由這些細胞因子介導的疾病。本發(fā)明的目的即在于提供細胞因子白細胞介素IL-和腫瘤壞死因子TNF-a的非?；顫姷囊种苿杂脕碇苽渲委熡蛇@些細胞因子介導的疾病的藥物。豨薟草(/ferte^e^^Z^d/seO是中國藥典收載的常用中藥，始載于唐代《新修本草》，以菊科(6b，/tse,asteraceae)植物東方豨薟(57柳sZ)ech'3anz'e"tsiZsL)、腺梗豨薟(5Ye《es/ech'a,6esce/751始h'/o)或毛梗豨薟(iSe^eAec/r/sg〗3Zi"e5ce/751船h'/7c0的干燥地上部分入藥。豨薟草味辛、苦，性寒，歸肝、腎經(jīng)，具祛風濕、利關(guān)節(jié)、解毒之功效，主治風濕痹痛、筋骨無力、腰膝酸軟、四肢麻痹、半身不遂、風疹濕瘡，民間常用于類風濕性關(guān)節(jié)炎的治療。小鼠實驗表明，豨薟草煎劑不僅對細胞免疫和體液免疫有明顯的抑制作用，而且對非特異性免疫也有一定的抑制作用，表現(xiàn)出對胸腺的顯著抑制作用，能使脾臟重量減輕，Ea和Et花環(huán)形成率及血清抗體滴度降低，細胞內(nèi)DNA和RNA吖啶熒光染色的陽性率減少，并抑制小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能，減低血清溶菌酶的活性。因此，豨薟草祛風濕、利關(guān)節(jié)可能通過調(diào)節(jié)免疫功能而收效(卜長武，楊正娟，那愛華.豨薟對小白鼠免疫功能的影響.中國中藥雜志，1989，14(3):44-45)?，F(xiàn)代藥學研究表明，奇壬醇不僅是豨薟草的主要化學成分之一，同時也是其產(chǎn)生抗炎、抗風濕等多種生物活性的重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。奇壬醇單體化合物對大鼠的棉球肉芽腫有明顯的抑制作用；含奇壬醇85%的豨薟草提取物可減輕佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠踝關(guān)節(jié)炎癥病理反應，可通過調(diào)整機體免疫功能、改善局部病理反應而達到抗風濕的作用(錢瑞琴，張春英，付宏征，林文翰，高子芬.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000,20(3):192-195;信紅嶺，畢娟，劉淼，等.奇壬醇的抗炎免疫實驗研究.中草藥，2005，36(6):866-867)。發(fā)明概述本發(fā)明的目的旨在提供奇壬醇衍生物、其鹽以及它們新的制藥用途。本發(fā)明涉及通式(I)和通式(II)所示的奇壬醇衍生物在制備TNF-a禾口/或IL-ie、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6抑制劑中的用途。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>通式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>通式(II)其中，通式(I)中，R,、R2、R3、R4可以相同或不同，并且獨立地代表-OH、-SH、-NH2、-OR5、-0(CO)R5、_NHR5、-N(R5)2、-NHCOR5、-N(Cw垸基)(a,芳基)、-SR5、-SOR5、-S02R5、-0S03H、-OS02R5、_N02、-CN、_F、-Cl、-Br或-I，且不同時為-OH;R5獨立地代表C卜s烷基、(V,4芳基、單或多不飽和的、直鏈或支鏈的C,—,2鏈烯基、具有3-14個環(huán)成員的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個環(huán)成員和l-6個雜原子的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的雜環(huán)；通式(II)中，Ri、R2可以相同或不同，并且獨立地代表d-e烷基、C6—14芳基、-(d-e烷基)(CO)(d-e垸基)、單或多不飽和的、直鏈或支鏈的C,-12鏈烯基、具有3-14個環(huán)成員的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個環(huán)成員和l-6個雜原子的單、雙或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)、苯基，其中苯基可被下列基團一次或多次取代-H、-0H、-SH、-NH2、-NH(C,-e烷基)、-NH(Cw烷基)2、-O(C卜6垸基)、-0(C0)(d—6烷基)、-S(Cw烷基)、-SO(C卜e烷基)、-S02(C^烷基)、-0S03H、-N02、-CN、-F、-C1、-Br、-I;或者R1、R2以交聯(lián)的形式形成含5—8個環(huán)單位的飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)。上述的通式(I)化合物，其特征在于Rs優(yōu)選為N、0或S的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的雜環(huán)。上述的通式(I)化合物，R,、R2、R3、R4優(yōu)選為-0H或-0CH3，且不同時為-OH;上所述的通式(II)化合物，其特征在于R,、R2優(yōu)選為Cw烷基、_CH2C0CH3、其中R"R7為-H、-0H或-0CH3。上述通式(II)化合物，R,、R2可以交聯(lián)為6—8個碳原子的飽和碳環(huán)；本發(fā)明還包括權(quán)利要求1的化合物的生理可接受的鹽，其特征是通過將堿用無機酸或有機酸中和、或通過將酸用無機堿或有機堿中和、或?qū)⑹灏芳句@化生成季銨鹽得到。通式(I)和通式(II)的化合物及其鹽作為治療活性成分，用于制備治療由前炎癥細胞因子TNF-a、白介素(IL)-IP及炎性分子NO介導的疾病的藥物。一種藥物組合物，包括治療有效量的通式(I)和通式(II)的化合物及其鹽、常規(guī)的生理上可接收的載體和/或稀釋劑或助劑。所述藥物可用于治療選自下組的一種或多種病癥，這些病癥包括但不限于炎性腸病、心力衰竭、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、結(jié)節(jié)病、皮肌炎、銀屑病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合癥、急性髓性白血病、帕金森氏癥、早老性癡呆、抑郁癥、艾滋病癡呆綜合癥、膿毒癥、壞疽性膿皮病、敗血癥、感染性休克、白塞氏病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、Wegener's肉芽腫、休格連氏干燥癥、慢性阻塞性肺病、哮喘、急性胰腺炎、牙周病、惡病質(zhì)、癌癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷、呼吸道病毒感染或肥胖、自身免疫病，比如類風濕關(guān)節(jié)炎、類風濕脊椎炎、紅斑狼瘡、多發(fā)性硬皮病、牛皮癬、腎小球腎炎、依賴胰島素糖尿病和敗血癥。本發(fā)明的化合物或其藥用鹽另外還可用于制備細胞、組織或器官移植后的預防排斥反應的藥物。本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，包括治療有效量的選自通式的化合物或其前藥的一種或多種及可藥用載體。本發(fā)明所涉及的藥物的劑型根據(jù)臨床應用方式而定，適宜的給藥形式包括口服、非經(jīng)胃腸、靜脈、經(jīng)皮、局部、吸入和鼻內(nèi)給藥制劑。通常使用蓋侖制劑比如片劑、包衣片、膠囊、分散粉末、顆粒、水溶液、水懸浮液或油性懸浮液、糖漿、汁液或滴劑。固體藥物形式可含有比如惰性成分和載體例如碳酸鈣、磷酸鈉、乳糖、淀粉、甘露糖醇、藻酸鹽、明膠、瓜爾膠、硬脂酸鎂或硬脂酸鋁、甲基纖維素、滑石、高分散硅石、硅油、高分子量脂肪酸(比如硬脂酸)、瓊脂或植物或動物脂和油、固體高分子量聚合物(如乙二醇)。如果需要的話，適于口服的制劑可另外含有調(diào)味劑和/或甜味劑。液體藥劑可以是滅菌的，和/或需要時可含有助劑，比如防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、滲透劑、乳化劑、分散劑、增溶劑、鹽、糖或糖醇，以調(diào)節(jié)滲透壓或緩沖，和/或需要時可含有粘度調(diào)節(jié)劑。這些類型的添加劑的例子是酒石酸和檸檬酸緩沖液、乙醇、配位劑(如乙二胺四乙酸及其無毒鹽)。適于調(diào)節(jié)粘度的是比如高分子量聚合物，例如，液態(tài)聚環(huán)氧乙烷、微晶纖維素、羧甲基纖維素、聚乙吡咯烷酮、葡聚糖或明膠。固體載體的例子是淀粉、乳糖、甘露糖醇、甲基纖維素、滑石、高分散硅石、高分子量脂肪酸(如硬脂酸)、明膠、瓊脂、磷酸鈣、硬脂酸鎂、動物和植物脂、固體高分子量聚合物(如聚乙二醇)。非經(jīng)胃腸或局部使用的油懸浮液可含有比如合成或半合成植物油，例如，各種情況下，脂肪酸鏈上具有8-22個碳原子的液態(tài)脂肪酸酯，如棕櫚酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、十四垸酸、二十二烷酸、十五烷酸、亞油酸、反油酸、巴西烯酸、芥酸或油酸，其被比如具有1-6個碳原子的一至三元醇酯化，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或它們的異構(gòu)體、乙二醇或丙三醇。這些類型的脂肪酸酯的例子是市售的Miglyols、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸異丙酯、6-癸酸PEG酯、飽和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、多乙氧基丙三醇三油酸酯、油酸乙酯、含蠟脂肪酸酯，比如人工鴨尾脂腺脂肪、椰子脂酸異丙酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、鄰苯二甲酸二丁酯、己二酸二異丙酯，特別是多元醇脂肪酸酯。同樣適宜的是不同粘度的硅油或脂肪醇，比如異十三烷醇、2-辛基十二垸醇、十六烷基應制醇或油醇，脂肪酸，例如油酸。進一步地，可以使用植物油，比如蓖麻油、杏仁油、橄欖油、芝麻油、棉籽油、花生油或豆油。適宜的溶劑、凝膠劑和增溶劑是水或與水混溶的溶劑。適宜的例子是乙醇或異丙醇、芐醇、2-辛醇十二烷醇、聚乙二醇，也可以是鄰苯二甲酸酯、己二酸酯、丙二醇、丙三醇、二_或三-丙二醇、蠟、甲基纖維素、溶纖劑、酯、嗎啉、二噁烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、環(huán)己酮等。可用的成膜劑是，比如可以溶解或在水和有機溶劑中部分膨脹的纖維素醚，例如，羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素或可溶淀粉。同樣地，凝膠劑和成膜劑的混合形式也是完全可能的。這種情況下使用的，特別是比如離子型大分子，例如羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸以及它們的鹽，支鏈淀粉半乙醇酸鈉、作為鈉鹽的藻酸或藻酸丙二醇酯、阿拉伯膠、黃原膠、瓜爾膠或角叉膠?？墒褂玫倪M一步的配制助劑是甘油、不同粘度的石蠟、三乙醇胺、膠原質(zhì)、尿囊素、novantisolicacid。也可能有必要對制劑使用表面活性劑、乳化劑或濕潤劑，例如十二烷基硫酸鈉、脂肪醇醚硫酸酯、N-十二烷基-P-亞氨基二丙酸二鈉鹽、多氧乙基化蓖麻油或油酸山梨醇酯、單硬脂酸山梨醇酯、多乙氧基醚(如吐溫)、十六醇、卵磷脂、單硬脂酸甘油酯、多氧化乙烯硬脂酸酯、烷基酚聚乙二醇醚、十六垸基三甲基氯化銨或一/二垸基聚乙二醇醚磷酸單乙醇銨鹽。，同樣地也有必要加入用于穩(wěn)定乳液的穩(wěn)定劑，比如蒙脫土或膠態(tài)硅石；或防止活性物質(zhì)被破壞的抗氧化劑，例如生育酚或丁基羥基苯甲醚；或防腐劑比如p-羥苯甲酸酯。這些產(chǎn)品是在通常的滅菌或無菌條件下制造和分裝到容器中并密封的。圖1化合物1核磁共振碳譜qrc(U-13C圖3化合物3核磁共振碳譜qrc21-13C圖5化合物5核磁共振碳譜qrc29a-13C圖7化合物7核磁共振碳譜qrc24-2-13C圖9化合物9核磁共振碳譜qrc33-13C圖11化合物11核磁共振碳譜qrcl7b-13C圖13化合物13核磁共振碳譜qrc28b-13C圖15化合物15核磁共振碳譜qrcl9-2-13C圖17化合物17核磁共振碳譜qrc34-2-13C圖19化合物19核磁共振碳譜qrc02B-13C圖21化合物21核磁共振碳譜qrc06a-13C圖23化合物23核磁共振碳譜06c-13C具體實施方式實施例l奇壬醇衍生物的制備及結(jié)構(gòu)鑒定1.將奇壬醇20mg溶于丙酮lml，加入20nl2,2-二甲氧基丙烷以及催化量的對甲苯磺酸，室溫攪拌反應20min。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，以除去作為催化劑而存在反應中的對甲苯磺酸,然后用飽和食鹽水萃取除水，最后用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(3:1)洗脫，得15,16-異亞丙基奇壬醇(化合物l)18mg，產(chǎn)率90%。化合物1:CAOs(Mr.378)，白色固體，mp.198-200°C。MS(EI)歷A(%):363.0(*T-CH3，19.0)。'HN服(400MHz,CDC13):5岬5.08(1H，s，14—H),4.00(1H，t，/=6.9Hz，15-H)，3.89(1H，t，/=7.7Hz，16—H)，3.853.81(1H，m，2—H)，3.75(1H，t,7.7Hz,16—H),3.71(1H,d，/=10.7Hz,19—H)，3.43(1H，d,/=10.7Hz，19-H),2.282.25(1H，m，7-H),2.20(1H，dt，2.48，12.76Hz，3—H),2.082.04(1H,m，l-H),1.78(1H，t,/=9.16Hz，9一H)，L801.74(1H，m,12—H),1.72~1.70(1H,m，6-H),1.701.60(2H,m,ll-H)，1.41(3H,s，CH3)，1.35(3H,s，CH3),1.21—1.18(1H，m,5_H),1.05(3H,s,CH3,18_H)，L041.02(1H，m,1—H)，0.91(3H,s,CH3,17-H),0.78(3H，s,CH3，20—H)。13CNMR(100MHz,CDC13):"139.1，127.8(Cl4)，108.8,80.l(Cl5)，66.1(CI9),65,6(C,6),65.0(C2),55.4(C5),50.8(C9)，48.5(d),44.7(G),40.7(C4)，40.4(CJ,39.9(C1())，36.5(G),36.1(CI3),32.1(CI2)，27.5(C1S)，26.5，25.5，22.8(C17),22.4(C6),18.7(C"),17.l(C加)。2.將奇壬醇50rag溶于2ml環(huán)己酮中，加入催化量的對甲苯磺酸，恥'C下攪拌反應9h。圖2化合物2核磁共振碳譜qrc23-13C圖4化合物4核磁共振碳譜qrc29b-13C圖6化合物6核磁共振碳譜qrc24a-13C圖8化合物8核磁共振碳譜qrc25-13C圖10化合物10核磁共振碳譜qrcl7a-13C圖12化合物12核磁共振碳譜qrc28a-13C圖14化合物14核磁共振碳譜qrcl9-l-13C圖16化合物16核磁共振碳譜qrc34-1-13C圖18化合物18核磁共振碳譜qrc02a-13C圖20化合物20核磁共振碳譜qrc02d-13C圖22化合物22核磁共振碳譜qrc06b-13C向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，以除去因作催化劑而存在于反應體系中的對甲苯磺酸。然后用食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲垸溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(3:1)洗脫，得15,16-環(huán)己叉基奇壬醇(化合物2)42mg，產(chǎn)率84%?；衔?:C2eH4204(Mr.418)，白色固體，mp.201-202。C，MS(EI)歷/z(D:418.2[M+，0.2]。'HNMR(400MHz，CDC13)3—5.08(1H,s,14-H),3.98(1H，t,/=7,06Hz，15-H),3.883.84(1H,m，16-H)，3.883.80(1H，m，2-H)，3.71(1H,d,10.80Hz，19一H)，3.733.70(1H,m,16—H)，3.41(1H，d'/=10.80Hz，19-H),2.282.24(1H，m,7—H)，2.21(1H,dt，/=12.68'2.44Hz,3-H)，2.072.04(1H'm，1-H)，1.03(3H，s，CH:!,18-H)'0.91(3H，s，CH3，17-H)，0.77(3H,s,CH3，20-H)。13C蘭R(100MHz,CDCl])138.7,127.7(C14)，109.0,79.5(CI5)，65.7(C19)，65.l(Cie),64.7(C2),55.1(C5)，50.5(C9),48.2(d),44.4(C3)，40.5(C4)，39.7(C10)，36.3(C7)，35.9，35.8，34.9(C12),27.2(C,8)，27.2，25.3,24.0,23.9,22.8(C17),22.2(C6),18.6(C")，16.9(C2。)。3.將奇壬醇50mg和溶于2ml丁酮中，加入催化量的對甲苯磺酸中，90°C下攪拌反應lh。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，以除去反應體系中的對甲苯磺酸。然后將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲垸溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15，16-異丁叉基奇壬醇(化合物3)46mg，產(chǎn)率92%?；衔?:C24H4。04(Mr.392),白色固體，mp.195-196。C。MS(EI)頂/z(%):392.3[M+，0.2]。LHNMR(400MHz，CDC13)5—5.09(1H,s,14-H)，4.OO(IH,dd，/=6.68,7.84Hz，15_H)，3.88-3.83(IH，m，16-H),3.88-3.80(1H，m,2-H),3.72(1H,d,J=10.84Hz，19_H)，3.74-3.67(1H，m，16-H),3.42(1H,d,/=10.84Hz，19-H),2.28-2.24(1H,m,7_H),2.20(1H,dt,/=12.52,3.24Hz,3-H)，2.07-2.02(1H，m，1-H)，1.80-1.76(1H，m,12_H)，1.29(3H,s,CH3)，L04(3H,s，CH3,18—H),0.94(3H,s，CH3)，0.92(3H,s,CH3)，0.78(3H，s，CH3,20—H)。K'C薩R(100MHz，CDClJ5—138.8，138.7,127.6,127.5，110.6，110.3,80.4(C15),79.6'65.8(C19),65.6'65.5,64.7(C2)，55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(d),44.5(C3)，40.5(C4)，39.7(C10),36.3(C7),35.9，35.8,32.5，32.0，31.9，31.6,27.2(C18)，23.7，23.0，22.8,22.7，22.2,18.5。4.將奇壬醇50mg溶于3ml3-甲基-2-丁酮中，加入催化量的PPTS，7080°C下攪拌反應6h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15，16-(4-甲基)異丁叉基奇壬醇的差向異構(gòu)體混合物，經(jīng)制備液相分離得化合物4和化合物5的單體，產(chǎn)率分別為40%、44%。化合物4:C25H4204(Mr.406)，白色固體，mp.196-197°C，MS(EI)邁A(%):406.2[M+,0.1]。'H醒R(400MHz，CDC13)5—5.09(1H,s，14_H)，4.OO(IH,dd,/=6.50，8.22Hz,16—H),3,883.80(2H，m)，3.72(1H，d,/=10.84Hz，19—H)，3.64(1H，t,/=8.06Hz，15_H)，3.42(1H,d，/=10.84Hz,19-H)，2.282.24(1H'm,7-H),2.20(1H,dt，/=12.76，3.48Hz，3-H),2.082.04(1H，m,1—H),1.85(1H，q，/=6.88Hz，12—H),1.22(3H,s,CH3),L04(3H,s，CH3,18-H),(X95(3H，s,CH3)，0.92(3H，s,CH3,17_H)，0.92(3H，s,CH3),0.78(3H，s,CH3，20-H)。13C_NMR(100MHz,CDC13)5—138.6，127.7(C14),112.1'79.5(C15)，65.8(C19)，65.7(C16),64.8(C2)，55.1(C5),50.5(C9)，48.2(C),44.4(C3)，40.5(C》，39.7(C10)，36.9，36.3(C7),35,9(C13),32.0(C,2)，27.2(C'8)，22.3(C6),22.2，19.7,18.6(CU)，17.6，17.5,16.9(C2。)。化合物5:C25H4204(Mr.406)，白色固體mp.196-197°C。MS(EI)歷/z(%):363.3[M+-CH3CH3CH，,CDC13)<55.08(1H,s，14一H)，3,933.89(1H,dd，/=6.08，8.44Hz，16-H),3.873.80(2H，m)，3.72(1H，d，/=10.84Hz,19-H),3.743.68(1H，m)，3.43(1H，d，/=10.84Hz,19—H)，2.282.24(1H，m,7—H),2.20(1H，dt，/=12.78,2.92Hz，3-H),2.072.04(1H，m,l-H)，1.85(1H,t，/=6.86Hz,12-H)，1.24(3H，s，CH》，1.04(3H,s，CH3,18—H),0.93(3H,s,CH》'0.92(3H，s，CH3,17—H),0.78(3H，s,C仏，20-H)。13C-NMR(100MHz，CDCl3)^拜138.6，127.6(C14)，112.5,80.7(C15),65.7(C19),65.6(CI6)，64.7(C2),55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(C,),44.4(C3),40.5(C4)，39.7(C1())，36.3(C7)，36.2,35.7(C,3)，32.1(C12),27.2(C,8),22.9(C,7),22.2(U),20.7，18.6(C)，17.7，17.4，16.8(C2。)。5.將奇壬醇50mg溶于3ml甲基異丁基甲酮中，加入催化量的PPTS，7080°C下攪拌反應10h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，然后用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲垸溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15，16-(4-甲基)異戊叉基奇壬醇的差向異構(gòu)體混合物，經(jīng)制備液相分離得化合物6、化合物7的單體，產(chǎn)率分別為36%、32%?；衔?:C26H440.,(Mr.420)，白色粉末，mp.193-195。C，MS(EI)歷/z(%):405.3[M+-CH3，1.0]。'H麗R(400MHz,CDC13)5卿5.09(1H，s，14-H)，3.99(1H，t，7.16Hz,15-H),3.883.81(1H,m，2-H)，3.84(1H，dd，/=6.88,7.72Hz，16-H),3.72(1H,d，/=10.76Hz，19-H)，3.68(1H，t，/=7.88Hz'16-H)，3.43(1H,d，10.76Hz,19-H)，2.282.24(1H，m'7—H)，2.222.18(1H'm，3—H),2.092.04(1H,m，1—H),L84(1H,q,/=6.52Hz'12-H)'1.29(3H,s，CH3,1，-H)，1.221.18(1H'm,5_H)，1.05(3H，s，CH3，18_H)，0.96(3H,s，CH:,),0.95(3H，s,CH3),0.92(3H，s,CH3，17-H)，0.78(3H，s，CH3，20-H)。'3CNMR(lOOMHz，CDC13)5—138.7，127.7(CH)，110.3，79.4(C15)，65.9(C19)，65.l(C丄64.8(C2)，55.2(C5)，50.5(C9)，48.2,48.1，44.5(C3),40.5(C4),39.8(Cl0)，36.3(G),36.0(C13),32.1(C,2)，27.2(C18)，24.2，23.9，23.5,22.8(C17),22.2(C6)，18.5(d》，16.9(C20)?；衔?:C26H4404(Mr.420)，白色粉末，即.193-195°C。MS(EI)歷/z(%):420.3[M+,0.7]。lHNMR(400MHz,CDCL)^^:5.09(1H，s,14-H)，3.94(1H，dd'/=8.12,7.8Hz，15-H)，3.88-3.81(1H，m,2—H)，3.84(1H,t,/=5.4Hz,16-H)'3.72(1H，d，/=10.84Hz,19-H),3.70(1H，t,/=5.4Hz,16—H)，3.43(1H，d，/=10.84Hz，19-H)，2.282.24(1H,m，7-H)，2.222.18(1H，m,3—H)，2.082.04(1H,m,l-H)，1.77(1H，t，9.16Hz,9-H)，1.80L74(1H，m，12—H)，1.741.65(1H，m，6_H),L54(2H，m，11-H),1.50(2H,d，/=6.24Hz，3'—H),1.35(3H，s,CH3，1'—H),1.21—1.18(1H,m,5—H),L15L06(IH，m,12—H),1.05(3H,s，CH3，18-H)，1.041.02(1H,m，1—H)，0.94(3H,s，CH3，17—H),0.93(3H，s,CH3)，0.92(3H，s，CH3),0.78(3H，s，CH3,20-H)。'3C麗R(400MHz,CDC13)3，138.7，127.6(CI4)，110.5，80.1(C15)，65.8(C,9),65.2(CI6),64.8(C2),55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(d),46.8(C3.),44.5(C3),40.5(C4)，39,7(C10),36.3(G),35.7(C13),32.0(C12)，27.2(C18)，24.6(C,.),24.5(C4')，24.0,23.8,22.7(C17)，22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C2。)。6.將奇壬醇50mg溶于3ml乙酰丙酮中，加入催化量的PPTS，708(TC下攪拌反應12h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次，將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，并經(jīng)制備液相分離得15，16-(2-氧)-異戊叉基奇壬醇(化合物8)23mg，產(chǎn)率46%。化合物8:C25H4。05(Mr.420)，白色固體mp.199-201。C。MS(EI)，4(%):402.2[M+-H20，0.1]。'H麗R(400MHz,CDC13)5卿5.08(1H，s,14_H)，4.00(1H'dd，/=6.70,7.70Hz，15-H),3.92(1H，t，/:7.88Hz,16-H)，3.883.81(1H，m，2—H)，3.76(1H，t,/=8.08Hz，16-H)，3.72(1H,d，/=10.80Hz,19-H)，3.44(1H,d，/=10.80Hz，19-H)，2.74(2H，dd,/=13.14,16.1Hz),2.282.24(1H，m,7_H),2.21(3H，s，CH3)，2.202.17(IH，m,3—H),2.082.03(1H，m,1—H),L43(3H，s，CH3),1.05(3H,s，CH3,18—H),0.92(3H，s，CH3，17-H)，0.79(3H,s，CH3，20—H)。l3CNMR(400MHz,CDC13)5—139.2，127.1(C,4)，107.9，80.5(C15),65.9(C19),65.6(C16),64.7(C2),55.1(C5),52.5，50.5(C9),48.2(d),44.5(C3),40.5(C4)，39.7(C10),36.3(C7),35.7(CI3)，31.9，31.5,27.2(C18)，24.9，22.7(C口),22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C20)。7.將奇壬醇50mg和二苯甲酮16mg溶于4ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080°C下攪拌反應10h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15,16-(1，3-二苯基)異丙叉基奇壬醇(化合物9)33mg，產(chǎn)率66%?；衔?:C33H4204(Mr.502)，白色固體，mp.196-197°C。MS(EI)歷/z(%):487.2[M+-CH3,0.2]。'H麗R(400MHz，CDC13)7.537.46(4H，m，Ar),7.367.23(5H，m'Ar),5.11(1H,s，14-H),3.99(1H,t'/=7.02Hz，15-H),3.93(1H,d，/=7.46Hz，16-H),3.85(1H，d，/=7.46Hz，16-H),3.833.77(1H,m，2-H),3.67(1H，d'/=10.8Hz，19-H),3.39(1H,d,/=10.8Hz，19-H)，1.77(1H，t,/=7.62Hz，12-H),L03(3H，s，CH3，18-H)，1.04L02(1H，m，1-H),0.95(3H,s,CH3，17-H),0.65(3H，s,CH3，20-H)。13CNMR(100MHz，CDC13)5卿142.9，142.4,139.0，128.1，127.9,127.8，127.7'127.4,126.2，126.1'109.2，80.6(C15)，66.0，65.8(C19),64.7(C2)，55.1(C5)，50.4(C9),48.1(d),44.5(C3),40.4(C4)，39.8(C10)，36.3(C7),36.2(C13),31.9(C12),27.2(C1S),22.9(C"),22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C20)。8.將奇壬醇50mg和3，4-二甲氧基苯甲醛15mg溶于3ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080。C下攪拌反應15h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15，16-(3,4-二甲氧基)苯甲叉基奇壬醇差向異構(gòu)體混合物，經(jīng)制備液相分離得化合物10、化合物ll的單體，產(chǎn)率分別為38%、34%?；衔?0:C29H4206(Mr.486)，白色固體，mp.191-192°C。MS(EI)tz/z(%):486.1[M+，1.2]。NMR(400MHz,CDC13)5,:7.056.85(3H,m，Ar)，5.70(1H，s),5.14(1H，s,14-H),4.11(1H,t，/=7.08Hz，15—H),3.97—3.92(2H，m，16—H),3.89(3H,s，OCH3)，3.88(3H,s,0CH3)，3.853.82(1H，ra，2-H),3.71(1H'd,/=10.84Hz，19-H),3.39(1H，d,/=10.84Hz，19-H),2.292.26(1H,ra，7—H)，2.212.18(1H,m,3-H),L04(3H，s，CH3，18-H),L01(3H，s，CH3，17-H),0.78(3H，s，CH3,20-H)。13CNMR(100MHz，CDC13)5聊149.9,149.0，139.4,130.0,127.4(CM),119.6，110.8,109.7，103.7,80.6(C1S)，66.1(C,9),65.6(C16)，64.7(C2),55.9，55.8，55.1，50.6'48.1(d),44.4,40.4(C4),39.7(C,。),36.3(C7)，36.2(C13)，31.8(CI2),27.2(C18)，22.5(C17),22.1(C6)，18.5(C")，16.9(C20)?；衔飈l:C29H4206(Mr.486)，白色固體，mp.191-192°C。MS(EI)歷A(%):486.1[M+，0.9]。麗R(400MHz,CDC13)7.036.85(3H,m，Ar)，5.84(1H，s),5.13(1H，s,14-H)，4.164.09(2H，m),3.90(3H，s,0CH3),3.88(3H，s,0CH3)，3.903.87(1H,m，16-H),3.853.78(1H，m，2-H),3.71(1H，d,/=10.84Hz,19—H)，3.40(1H,d，/=10.84Hz，19-H)，2.302.26(1H,m，7-H),2.19(1H，dt，./=2.32，12.60Hz,3-H),1.03(3H，s,CH3，18-H)，1.02(3H，s，CH3,17-H)，0.77(3H，s，CH3，20-H)。13C醒R(400MHz,CDC13,3，)149.7，149.1,139.4，131.2，126.8(CI4)，119.0，110.9,109.3,104.3，80.4(C15)，66.8(C19)，65.7(C16),64.7(C2)，56.0，55.9,55.1,50.5，48.1(d),44.4,40.4(C4),39.7(CI0),36.9(C7)，36.3(C13)，32.2(C,2)，27.2(C18)，22.9(C17),22.1(CB)，18.5(CU),16.8(C20)。9.將奇壬醇50mg和對羥基苯甲醛8mg溶于3ml甲苯中，加入催化量的PPTS，70-80°C下攪拌反應14h。向反應混合物中加入一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15,16-對羥基苯甲叉基奇壬醇差向異構(gòu)體混合物23mg，經(jīng)制備液相分離得化合物12、化合物13的單體，產(chǎn)率分別為30%、32%。化合物12.C27H3805(Mr.442)，白色固體，mp.190-192°C。MS(EI)歷/z(%):442.3[M+，0.1]。LHNMR(400MHz,CDC13)5:7.31—6.77(4H，m,Ar)，5.61(1H,s)，5.19(1H，s，14—H)，4.12(1H,t，J=7.12Hz,15-H)，3.963.93(1H,m，16—H)，3.88(1H，t，J=7.74Hz，16-H),3.803.74(1H，m，2-H)，3.67(1H，d，/=11.0Hz)，3.343.30(1H，m,19-H)，2.30(1H，dd,/=1.84，14.36Hz,7—H)，2.192.16(1H,m,3—H),L01(3H，s，CH3，18-H)，0.98(3H,s，CH3，17—H)，0.82(3H,s,CH3,20-H)。13CNMR(100MHz'CDCl.》3w:160.0'140.9，129.6，129.4，128.3(C14),115.9,105.1，82.0(C15)，66.9，65,7(C19)，56.5(C5)，52.0(C9),45.1(C3),41.4(C4),40.7(C1()),37.5(C7),37.3(C,3)，32.9(CI2)，28.0(C18)，23.3(C17)，23.0(C6),19.6(CU)，17.3(C20)?；衔?3:C27H3805(Mr.442)，白色固體，mp.190-192°C，MS(EI)//"%):442.3[M+，0.3]。'H-麗R(400MHz,CDC13)7.266.76(4H，m，Ar)，5.78(1H's)'5.17(1H，s,14-H)，4.11(1H，t，J=6.62Hz,15—H)，4.094.06(1H,m，16—H),3.89(1H，t,/=8.12Hz，16-H)，3.76(1H,m，2_H)，3.67(1H,d，/=11.00Hz),3.353.30(1H，m,19-H),2.29(1H,m,7—H)，2.192.16(1H,m，3—H)，L01(3H，s，CH3，18_H)，1.00(3H,s,CH3，17—H),0.81(3H，s，CH3,20-H)。'3CNMR(100MHz，CDC13)5卿159.4，141.0，131.0，129.0，127.9(C14)，116.0,105.9，81.8(C5)，67.8，65.7(C19),65.2'56.5(C5),52.0(C9)，45.1(C3),41.4(C4),40.7(C10),37.5(C7),33.4(C12),28.1(C18),23.4(C17)，23.3(C6)，19.6(d),17.3(C20)。10.將奇壬醇50mg溶于3ml水楊醛中，加入催化量的PPTS，7080°C下攪拌反應16h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，然后用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15,16-(2-羥基)苯甲叉基奇壬醇的差向異構(gòu)體混合物23mg，經(jīng)制備液相分離得化合物14、化合物15的單體，產(chǎn)率分別為36%、40%。化合物14:C27H3S05(Mr.442)，白色固體，rap.193-194°C，MS(EI):442.1[M+,0.2]。LH麵R(400MHz,CDC13)^釁7.77(1H,s)，7.276.86(4H,m'Ar)，5.85(1H,s)，5.10(1H's，14—H)，4.15(1H，t,/=7.28Hz,15-H),3.983.91(2H,m,16-H),3.863.78(1H，m，2—H),3.733.68(1H，m,19—H),3.37(1H,d，/=10.92Hz,19—H),2.29—2.25(1H,m，7-H)，2.212.18(1H，m,3-H)，2.041.98(1H,m,1—H)，1.03(3H，s,CH3，18_H)，0.96(3H,s，CH3，17-H),0.77(3H，s，CH3，20-H)。13CNMR(100MHz，CDCL)3,:130.6，128.4，127.7，126.5，120.5，119.7,116.9,104.0，80.9(C15),65.8(CI9)，65.4(C16),64.5(C2)，58.2，55.0(C5),50.5(C9)，47.9(d),44.2(C3),40.4(C4)，39.6(C10),36.1，31.8(Cl2),27.2(Cl8)，22.7(Cl7),22.0(C6),18.4，18.3，16.8(C20)?；衔?5:C27H3805(Mr.442)，白色固體，mp.193-194°C，MS(EI):394.1[M+，0.2]。'H醒R(400MHz,CDC13)5—7.93(1H,s)，7.276.86(4H,m，Ar),6.07(1H，s)，5.II(IH,s，14—H)，4.184.07(2H，m),3.91(1H,t，/=7.62Hz，16—H),3.863.78(1H,m，2—H)，3.70(1H,d，/=10.80Hz,19-H)，3.39(1H，d,/=10.80Hz,19-H)，2.302.26(1H，m,7-H),2.19(1H,dt'/=2.32，12.60Hz,3-H)，1.04(3H，s，CH3,18-Ii)，1.02(3H's，CH3,17-H)，0.74(3H，s，CH3,20-H)。1:!CNMR(100MHz,CDC13)5—155.5，155.3'140.0'130.7，130.5,128.5'128.2，127.8,126.5,126.2，121.6，119.9,119.7，117.1，117.0,104.5，104.4，81.0，80.4(C15),66.3，65.8(C19)，65.7(C16),64.7,64.6，63.4，55.1(C5),50.8，50.4,48.1(d),44.4(C3)，40.4(C4)，39.7(C10),36.6,36.3,36.2,36.0,32.0,31.8，27.3(C'》，23.0(C17)，22.9(C6),22.3(C)，22.1(C20)。11.將奇壬醇50mg和香蘭素20mg溶于4ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080°C下攪拌反應20h。向反應混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(5:1)洗脫，得15，16-(3-甲氧基-4-羥基)苯甲叉基奇壬醇的差向異構(gòu)體混合物23mg，經(jīng)制備液相分離得化合物16、化合物17的單體，產(chǎn)率分別為38%、34%?；衔?6:C28H4。06(Mr.472)，白色固體，即.192-193。C。MS咖//"%):472.0[M+，0.2]。'H陋R(400MHz，CDCU^，7.00-6.89(3H,m,Ar),5.82(1H,s),5.12(1H，s,14-H)，4.10(1H,d，/=7.22Hz,15-H)，4.09(1H，d,/=7.26Hz'16-H),3.92(3H,s,0CH3),3.88(1H,t,/=7.62Hz,16-H),3.863.80(1H,m，2-H)，3.71(1H,d，/=10.88Hz，19-H),3.43(1H,d，/=10.88Hz,19—H)，2.302.26(1H,m，7-H),2.222.17(1H，m,3—H)，2.04(1H，dt，/=12.12,2.48Hz,1—H)，L88(1H,dt,13.24,4.12Hz，12-H),1.80(1H,t，/=7.80Hz，9-H)，1.731.66(1H,tn，6—H),1.241,21(1H,m，5-H),1.191.13(1H，m，12-H),1.05(3H,s，CH3，18-H)，1.061.00(1H，m，1-H)，1.02(3H,s,CH3,17-H),0.77(3H，s，CH3,20-H)。'3C腿(100MHz,CDCi3)5鵬146.5，139.4'130.6，126.9(C,4),119.9'114.1,108.7'104.4,80.5(CI5)，66.8(C19),65.9(C16),64.8(C2)，56.0,55.2(C5),50.6(C9)，48.2,44.6(C3),40.5(C4),39.8(C,。)，36.9(C7)，36.3(C13),32.2(C12)，27.3(C18),22.9(C17),22.2(C6)，18.5(CU),16.9(C20)?；衔?7:C28H4。06(Mr.472)，白色固體，mp.192-193°C，MS(EI):472.0[M+，0.1]。'HNMR(400MHz'CDCl:,)57.036.89(3H,m，Ar),5.67(1H，s),5.14(1H，s,14-H),4.134.IO(IH,m,15—H)，3.973.92(1H,m，16—H),3.93(1H,t'J=7.72Hz,16—H)，3.90(31-1,s,OCHO,3.883.80(1H，m,2-H),3.72(1H,d，/=10.80Hz,19-H),3.42(1H，d，/=10.80Hz'19-H),2.302.26(1H,m'7-H)，2.20(1H,dt'12.70,2.40Hz,3-H)，2.062.03(1H，m，1—H)，1.88(1H'dt,13.22，4.04Hz，12—H),1.831.79(1H，m,9-H),1.231.21(1H,m,5_H)，L05(3H,s，CH3,18-H),1.00(3H's,CH3，17-H)，0.78(3H,s，CH3,20-H)。'3CNMR(100MHz，CDC13)3—146.5,139.4'129.3，127.5(C14)，120.4，114.1,109.0，103.8，80.6(C15),66.1(C,9),65.8(C16),64.7(C2)，55.9,55.1(C5),50.6(C9)，48.2(d),44.5(C3),40.5(C4),39.7(C,。)，36.3(C7),36.2(CK,)，32.0(C12),27.2(C18)，22.4(C17)，22.2(C6)，18.5(C丄16.9(C2。)12.將奇壬醇100mg溶于1.5ml乙酸酐中，于80'C攪拌反應。用TLC跟蹤反應，2h后原料點消失，反應停止。反應產(chǎn)物加低濃度稀鹽酸，以中和過量的乙酸酐。然后將產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取三次，使產(chǎn)物全部進入乙酸乙酯相中。將乙酸乙酯相用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，以中和殘留的乙酸酐。然后將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取以除去水，最后將有機相用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲垸溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮體系(3:1)洗脫，得到化合物18、化合物19、化合物20共三個單體的乙?；苌铮a(chǎn)率分別為30%、24%、15%。化合物18(2,15，16,19-四乙酰基奇壬醇)C28H4208(Mr.506)，無色油狀液體。'H-剛R(400MHz，CDCl3)S，5.17(1H,s,14-H),5.135.IO(IH，dd,/=2.28,9.12Hz'15-H)，4.974.90(1H,m，2_H)，4.364.32(1H，dd,,/=2.32，11.64Hz，16_H)，4.14(1H，d,/=11.18Hz,19-H)，4.094.04(1H，dd，/=9.2，11.64Hz'16_H)，3.98(1H，d,/=11.18Hz，19—H),2.30(1H，dt，/=2.30，14.20Hz,7—H)，2.13(1H，dt，/=2.14，12.68Hz,3-H),2.08(3H，s，CH3)，2.06(3H,s'CH3),2.02(3H，s，CH:,),2.01(3H，s，CH3)，1.79(1H，t,/=8.14，9-H)，1.72(1H，dt，/=2.82，12.84Hz，6-H),L611.50(2H,m，11-H),1.36(1H，qd，/=4.36,12.88Hz,6-H),1.23(1H，dd，，/=2.08，13.08Hz，5—H),1.IO(IH，t，/=12.14Hz，3—H)，1.03(3H,s,CH3，18—H)，0.96(3H,s,CH:,，17—H)，0.91(3H，s,CH3,20-H)。"C-NMR(100MHz'CDCl3)171.0,170.9'170.4,170.2'139.2,127.2(C14)，74.4(C15)，68.0(C,9)，66.9(C2)，63.7(C16)，55.1(C5),50.7(C9)，43.9(d),41.1(C3)，39.5，38.6,36.9，36.0(C7)，31.8(C12),27.8(C,8)，23.3(CI7),22.1(C6)，21.3,20.9，20.8，20.7，18.5(CU)，16.2(C2。)化合物19(2，16，19-三乙酰基奇壬醇)C26H4。07(Mr.464)，無色油狀液體。lH-剛R(400MHz，CDCl3)3,:5.18(1H，s,14-H),4.964.88(1H,m),4.23(1H'dd，，/=2.08，11.32Hz，16—H)，4.14(1H,d,/=11.2Hz'19—H)，4.05(1H，dd，/=9.16,11.32Hz，16—H),3.95(1H,d,/=11.2，19-H),3.71(1H，dd,/=1.84,9,04Hz,15-H),2.322.28(IH，m,7—H)，2.10(3H，s，CH3)，2.06(3H,s，CH3)，2.03(3H，s,CH3)'1.04(3H，s,CH3),0.92(3H,s,CH3),0.85(3H，s,CH3)。13C_NMR(100MHz，CDC13)5，171.7,171.3,170.6，138.9，128.5(CI4)，74.0(C15),68.4(C2),67.2(C19)，66.9(Cie),55.3(C5),51.0(C9),44.2(C,)，41.3(C3)，39.7，38.8，37.6，36.2(C7)，31.6(C12)，28.0(C,8),22.9(C17),22.3(C6)，21.6，21.2,21.1，18.8(C)，16.5(C20)?；衔?0(16,19-二乙?；嫒纱?(:2晶806(Mr.422)，無色油狀液體。'H-醒R(400MHz,CDC13)5聊5.17(1H，s，14-H),5,13-5.IO(IH,dd，,2.28Hz;9.12Hz,15-H),4.97-4.90(IH，m)，4.36-4.32(1H,dd，".32Hz;11.64Hz,16—H),4.14(1H'd，,11.18Hz,19_H)，4.06(1H,dd，,9.2Hz;11.64Hz，16—H),3.98(1H,d，,11.18，19-H)'2.32—2.10(2H，m)，2.08(3H，s，CH3),2.07(3H，s，CH3)，2.02(3H,s，CH3),2.01(3H，s,CH3)，1.82-1.70(2H，m)，1,61-1.50(3H，m),1.42-1.07(5H,m),1.00-0.85(lH,m)，1.03(3H,s，CH3),0.96(3H，s，CH3),0.91(3H,s，CH3)。13C-NMR(100MHz,CDC13),5卿171.4，170.5，139.0，128.2,73,8(C,5)，67.8(C2)，67.2(CI9)，66.6(CI6)，55.0(C5)，50.7(C9)，45.O(C,)，42.9(C3)，39.5,38.7，37.6,36.1(C7),31.5(C12)，28.0(C18)，23.3(C17),22.2(C6)，21.0,20.9，20.7，20.7，18.5(CU)，16.1(C2。)。12.將奇壬醇lOOmg于0°C下溶于5mlDMF中，嚴格無水條件下滴加NaH(120mg)、DMF(7ml)形成的懸濁液，30-50°C反應lh，再于0°C條件下滴加Me2S(X0.lml〈過量)反應0.5h。向反應混合物中加氨水，然后用乙酸乙酯萃取三次。將乙酸乙酯相用飽和碳酸氫鈉溶液萃取。然后將乙酸乙酯相用飽和食鹽水萃取除水，并用無水硫酸鈉干燥過夜。將干燥過夜的乙酸乙酯相濃縮，以二氯甲烷溶解后上硅膠柱層析，以石油醚-丙酮梯度洗脫，得到化合物18、化合物19、化合物20共三個單體的甲醚化衍生物，產(chǎn)率分別為24%、22%、15%?；衔?1(2，15，16-三甲氧基奇壬醇):C23H4。04(Mr.380)，白色固體，mp.195-196。C。'H-NMR(400MHz，CDCl3)5w:5,14(1H's，14-H)，3.72(1H，d,/=10.76Hz，19-H)，3.59(1H，dd，/=2.12,10.32Hz，16-H)，3.51(3H，s,0CH3),3.43(1H，d，/=10.32Hz，16-H),3.37(3H,s,0CH3)，3.35(3H，s,0CH3)，3.373.29(1H,m，2-H),3.20(1H，dd,/=2.08，7.52Hz,15-H)，3.00(1H,s)，2.89(1H，s),2.312.27(1H，m，7-H)，2.272.24(1H，m，3—H)，2.09(1H，dt，/=2.92，12.12Hz，卜H),2.121.92(1H,m，7—H),1.94(1H，dt，/=3,08，13.72Hz，12-H)1.80(1H，t，/=8.36Hz,9—H),1.721.67(1H,m，6-H)，1.631.47(2H,m，1卜H)，1.29(1H，qd，，/=4.36，12.72Hz，6—H),1.22(1H，dd,/=1.32,13.12Hz,5-H)1.271.20(lH,m,5-H),1.04(3H''s,CH3,18-H)，0.85(3H's'CH3,17_H),0.80(3H，s,CH3，20-H)。。C-醒R(100MHz,CDCl3)4:137.7，129.2(C14)，84.7(Cl5),74.6,73.7'65.8，60.4，59.0,55.4(C5)，51.1(C9)，50.7(C,)，44.5(C3)，40.5，40.1，39.2,37.9(C7)，36.2，31.9(C12)，27.3(C,》，23.3(CI7),22.2(C6),18.9(C"),16.8(C20)?；衔?2(15,16，19-三甲氧基奇壬醇)C23FiA(Mr.380)，白色固體，mp.194-1%°C。'H-NMR(400MHz'CDCl3)5，5.14(1H，s,14-H)，3.89-3.81〈IH,ro,2-H)，3.60〈1H,dd，/=2,16,10.28Hz,16-H),3.50(3H，s>0CH3)，3.43(1H,dd，/=7.6,10.28Hz,16-H)，3.40(1H,d,/=9.01Hz，19—H)，3.35(3H，s,0CH》，3.29(3H,s,0CH》，3.20(1H，dd,/=2.16，7.48Hz，15—H)，3,ll(lH,d'/=9.01Hz'19-H),2.26(1H,ddd,1.96,4.32，14.12Hz,7-H)，2.24(1H,ddd，/=2.44,3.76,12.56Hz,3—H),1.961.92(1H，m,12—H),丄.79(1H，t,/=8.36Hz,9-H)，L711.67(1H，m，6-H),1,631.56(2H'm,11—H)，L29(1H,qd，/=4.46，12.88Hz，6-H)，1.13(1H,dd，2.24,12.72Hz,5-H)，1.041.02(1H,m,1-H)，1.02(3H，s,CH.,,18-H)，0.86(3H,s,CH3,17-H),0.82(3H,s，CH:i，20-H)。'3C-N服(100MHz，CDCl》^卿137.8，129.2(CM)，84.7(C5)，74.7(C16),65.O(C丄60.4,59.3,59.0，55.2(C5),51.1(G),48.1(Ck)，45.4(C3),39.7,39.6,38.0(G),36.3'32.0(Cl2),28.1(C18)，23.4(CI7)，22.3(C6),18.9(CJ,16.7(C2?！??；衔?3(15,16二甲氧基奇壬醇):C22fm(Mr.366)，白色固體，卿.198-200。C。'H-剛R(400MHz,CDC13)3啊5.18(1H's,14-H)，3.81-3.73(IH，m'2-H),3.68(1H'd，/=11.00Hz,19-H),3.62(1H，dd，/=2.12，10.40Hz，16-H),3.48(3H's，0CH3)，3.42(1H,dd，/=7.48'10.44Hz,16-H)，3.34-3.31(1H，m,19-H),3.32(3H,s,0CH3)，3.25(1H,dd,/=2.10,7.46Hz,15-H)，2.27(1H,dt，./=2.08,12.62Hz'7_H)，2.17(1H，dt，/=2.32,12.72Hz，3-H),1.95(1H,dt,.7=3.42,13.80Hz,12-H)，L83(1H't，/=8.32Hz，9-H),1.75-1.70(1H，m，6-H)，1.651.50(2H，ra,ll-H)，1.31(1H'qd,/=4.32，12.88Hz'U-H),L22(1H,dd，L76，12.84Hz,5—H)，1.06—0.99(1H,m,1-H)，1.01(3H，s，CH3，18-H),0.83(3H,s,CH3，17-H)，0.83(3H,s,CH3，20-H)。13C-NMR(100MHz,CDCl》5P，139.5,130.2(C14)，86.0(CS)'75.6(Cie),65.7(C19)，65.2(C2)，60.7,59.2，56.5(C5),52.5(C》，49.l(C')，45.l(C》，41.4，40.6,39.1,37.4(C》，33.2(C12)，28.0(C18)，23.7(C17),23.3(C6),20.l(C,)，17.2(C2。)。實施例2奇壬醇衍生物體外抑制前炎癥因子TNF-a及IL-10釋放的實驗研究實驗材料1.細胞正常人外周血單核細胞(PMBC)受試藥物奇壬醇及其衍生物，由山東靶點藥物研究公司分離制備。2.陽性對照地塞米松(美國Sigma公司產(chǎn)品)3.試劑Ficoll-PaquePlus(AmershamBioscience);內(nèi)毒素(LPS'^sc力arz'c力/acoj7肌六B4，Sigma)和地塞米松(DEX，Ca皿。chetn);TNF-a及IL-1e的ELISA測定試劑盒(晶美生物工程公司)；二甲基亞砜(DMS0,Sigma);胰蛋白酶(A虹esco);RPMI1640培養(yǎng)基、青霉素、鏈霉素及胎牛血清(Gibco)。4.儀器CKX31型倒置顯微鏡(01卿us);恒溫C02培養(yǎng)箱(Thermo);5810R型臺式高速低溫離心機(E卯endorf);全自動酶標儀(Biotek)。實驗方法新鮮血液以EDTA為抗凝劑，F(xiàn)icoll分離血細胞，重懸細胞于含有10%胎牛血清的RIMP1640培養(yǎng)基中。在96孔板中加入100nL密度為1X1()5細胞/mL新分離的細胞，每孔細胞總數(shù)為104個，每個樣品作3個孔。(1)在細胞中加入指定濃度的試藥(終濃度分別為3，10，30，100，300pg/mL，加樣量為lOuL)和陽性對照(地塞米松，10uM)。置于37°0含5%0)2的培養(yǎng)箱中保溫15分鐘；(2)加入10yL濃度為100ug/mL的LPS，置于37。C含5%C02的培養(yǎng)箱中保溫16小時；(3)于1000rpm下離心15分鐘，將上清轉(zhuǎn)移入新的板中，ELISA法測定TNF-a及IL-10的濃度；或凍藏于-2CTC，避免反復凍融。(4)按下式計算抑制率，并求算IC5。值。藥物處理組一空白組抑制率(％)二(1內(nèi)毒素處理組一空白組)X100實驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表2.奇壬醇衍生物化合物9抑制TNF-a表達呈劑量依賴關(guān)系<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3.奇壬醇衍生物化合物9抑制il-ie表達呈劑量依賴關(guān)系<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>以上實驗表明，在正常人外周血單核細胞中奇壬醇衍生物能明顯抑制內(nèi)毒素誘導的前炎癥因子TNF-a和IL-ip的表達，且呈劑量依賴關(guān)系。實施例3奇壬醇衍生物體外抑制RAW264.7細胞釋放NO的實驗研究實驗材料1.細胞小鼠單核巨噬細胞株RAW264.7，購自中科院上海細胞庫(ATCC)受試藥物奇壬醇及其衍生物，由山東靶點藥物研究公司分離制備。2.試劑RPMI1640培養(yǎng)基、青霉素、鏈霉素、胎牛血清購自Gibco公司；胰蛋白酶購自Amresco公司；LPS(&c力er/c力/acoJj'W7六B4)購自Sigma公司產(chǎn)品。其他常用試劑均為國產(chǎn)分析純。3.儀器CKX31型倒置顯微鏡(Olympus);恒溫(302培養(yǎng)箱(Thermo);5810R型臺式高速低溫離心機(Eppendorf);全自動酶標儀(Biotek)。實驗方法-RAW264.7細胞用含10%胎牛血清、100pgmL—'鏈霉素，IOO單位mL—'青霉素的RPMI1640培養(yǎng)液于37'C下在C02培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，隔天傳代，細胞于對數(shù)生長期呈半貼壁狀態(tài)生長。取對數(shù)生長期的RAW264.7細胞，用0.25%胰蛋白酶消化，制成每毫升含5X105個細胞的單細胞懸液，接種于96孔細胞培養(yǎng)板(每孔200rtJ，每組設(shè)3個平行孔。培養(yǎng)lh后分別加入不同濃度的受試藥物及LPS(終濃度lWmL—')，同時設(shè)LPS組和空白對照組，置37'C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，吸取培養(yǎng)液上清100叱至酶標板屮，加入等體積的Griess試劑(Griess試劑A:1g/LN-萘乙二胺鹽酸鹽；Griess試劑B:體積分數(shù)^(H3P04)=5%,10g/L對氨基苯磺酰胺。使用前等體積混合試劑A和B即得)，室溫反應5min后測定540nm的吸光值。用濃度為0、1、2、5、10、20、50、100MmolL—1的NaN02繪制標準曲線，計算細胞培養(yǎng)上清液中NO—2的濃度以及對N0釋放的抑制率，并計算IQ值。N0釋放抑制率(％)=100X丄PS十樣品2JiKS,2J空白實驗結(jié)果表4.奇壬醇衍生物體外抑制RAW264.7細胞釋放NO<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>權(quán)利要求1.通式(I)和通式(II)的化合物通式(I)通式(II)其中，通式(I)中，R1、R2、R3、R4可以相同或不同，并且獨立地代表-OH、-SH、-NH2、-OR5、-O(CO)R5、-NHR5、-N(R5)2、-NHCOR5、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-OSO3H、-OSO2R5、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br或-I，且不同時為-OH；R5獨立地代表C1-6烷基、C6-14芳基、單或多不飽和的、直鏈或支鏈的C1-12鏈烯基、具有3-14個環(huán)成員的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的雜環(huán)；通式(II)中，R1、R2可以相同或不同，并且獨立地代表C1-6烷基、C6-14芳基、-(C1-6烷基)(CO)(C1-6烷基)、單或多不飽和的、直鏈或支鏈的C1-12鏈烯基、具有3-14個環(huán)成員的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子的單、雙或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)、苯基，其中苯基可被下列基團一次或多次取代-H、-OH、-SH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-NH(C1-6烷基)2、-O(C1-6烷基)、-O(CO)(C1-6烷基)、-S(C1-6烷基)、-SO(C1-6烷基)、-SO2(C1-6烷基)、-OSO3H、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I；或者R1、R2以交聯(lián)的形式形成含5-8個環(huán)單位的飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(I)化合物，其特征在于R,、R2、R3、R,為-OH或-0CH3，且不同時為-0H。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(I)化合物，其特征在于Rs優(yōu)選為N、0或S的單、雙或三環(huán)飽和的或單或多不飽和的雜環(huán)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(II)化合物，其特征在于R,、&優(yōu)選為Cw烷基、-CH2C0CH3、^>其中Re、R為-H、-0H或-0CH3。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的通式(n)化合物，其特征在于R,、R2交聯(lián)為6—8個碳原子的飽和碳環(huán)。6.權(quán)利要求1的化合物的生理可接受的鹽，其特征是通過將堿用無機酸或有機酸中和、或通過將酸用無機堿或有機堿中和、或?qū)⑹灏芳句@化生成季銨鹽得到。7.通式(I)和通式(II)的化合物及其鹽作為治療活性成分，用于制備治療由前炎癥細胞因子TNF-a、白介素(IL)-及炎性分子NO介導的疾病的藥物。8.—種藥物組合物，包括治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1中的化合物、常規(guī)的生理上可接收的載體和/或稀釋劑或助劑。全文摘要本發(fā)明涉及奇壬醇衍生物及其作為前炎癥細胞因子抑制劑的應用。通式(I)及通式(II)所表示的奇壬醇衍生物能夠抑制前炎癥細胞因子腫瘤壞死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、炎性分子一氧化氮(NO)的作用，并且適用于制備藥物。文檔編號C07C35/00GK101597212SQ20081001644公開日2009年12月9日申請日期2008年6月2日優(yōu)先權(quán)日2008年6月2日發(fā)明者關(guān)玉昆,珂劉,劉軍鋒,梁冬冬,卉許,烽趙申請人:山東靶點藥物研究有限公司