專利名稱：一種提取純化玉蘭素b的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥提取技術領域，涉及一種提取純化玉蘭素B的方法。
背景技術：
玉蘭素B (Anolignan A),分子式為C21H24O5,分子量為356. 42,是從木蘭科(Magnoliaceae)玉蘭Magnolia denudata Desr.葉中分離出的一種木脂素類化合物。藥理研究表明，玉蘭素B具有PAF受體拮抗劑，治療風濕性關節(jié)炎和哮喘，在抑制PAF與受體結合的試驗中，10μ g/ml濃度下，抑制率為100%，5μ g/ml時為80. 1% ;鈣拮抗作用，在濃度28 μ M時，活性為100% ;松弛血管平滑肌，抑制Ca2+內(nèi)流，增加cGMP，達到血管松弛作用；抗血小板作用，具有非特異的抗血小板作用，PAF拮抗作用，IC50為7. 5 μ M ;抑制淋巴細胞增殖，有一定免疫抑制作用。
目前，國內(nèi)尚未檢索到玉蘭素B的制備方法報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種提取純化玉蘭素B的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案
一種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于包括以下步驟以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，按一定固液體積比加入60-85%乙醇浸泡O. 5-2h，采用超高壓法進行萃取，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)高速逆流色譜分離，即可獲得玉蘭素B。所述固液體積比為1:10-1:18。所述超高壓萃取壓力為400MPa，保壓時間為2_4min。所述石油醚-丙酮體積比為17:1-2:1。所述高速逆流色譜分離溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為(1-2):(4-6)(3-4):(4-7)。本發(fā)明采用超高壓萃取、柱層析及高速逆流色譜分離純化，具有生產(chǎn)過程簡單，節(jié)省能源，生產(chǎn)成本低，易于實現(xiàn)工業(yè)化等優(yōu)點。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，取1kg，按固液體積比1:15加入65%乙醇浸泡lh，采用超高壓法進行萃取，萃取壓力為400MPa，保壓時間為3min，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑至浸膏，將浸膏用少量硅膠混合拌樣，低溫烘干，上樣至100目的硅膠低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:6)，用石油醚-丙酮按體積比17:1、12:1、7:1、2:1進行梯度洗脫，收集目標洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按體積比為2 6 4 7混合，靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900r/min,取下相溶解粗品注入色譜儀，紫外在線檢測，檢測波長為235nm，收集目標流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到玉蘭素B產(chǎn)品，含量為96. 7%。實施例2:
以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，取1kg，按固液體積比1:15加入85%乙醇浸泡lh，采用超高壓法進行萃取，萃取壓力為400MPa，保壓時間為3min，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑至浸膏，將浸膏用少量硅膠混合拌樣，低溫烘干，上樣至120目的硅膠低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:6)，用石油醚-丙酮按體積比16:1、10:1、8:1、2:1進行梯度洗脫，收集目標洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按體積比為I :5
3.5 4混合，靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900r/min，取下相溶解粗品注入色譜儀，紫外在線檢測，檢測波長為235nm，收集目標流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到玉蘭素B產(chǎn)品，含量為97. 6%。實施例3
以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，取1kg，按固液體積比1:18加入60%乙醇浸泡2h，采用超高壓法進行萃取，萃取壓力為400MPa，保壓時間為4min，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑至浸膏，將浸膏用少量硅膠混合拌樣，低溫烘干，上樣至100目的硅膠低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:6)，用石油醚-丙酮按體積比16: I、11: 1、7: 1、3:1進行梯度洗脫，收集目標洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按體積比為2 6 3 7混合，靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900r/min,取下相溶解粗品注入色譜儀，紫外在線檢測，檢測波長為235nm，收集目標流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到玉蘭素B產(chǎn)品，含量為97. 2%。實施例4:
以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，取1kg，按固液體積比1:10加入75%乙醇浸泡O. 5h，采用超高壓法進行萃取，萃取壓力為400MPa，保壓時間為2min，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑至浸膏，將浸膏用少量硅膠混合拌樣，低溫烘干，上樣至200目的硅膠低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:6)，用石油醚-丙酮按體積比15:1、10:1、6:1、2:1進行梯度洗脫，收集目標洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按體積比為
I.5 4 3 5混合，靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900r/min，取下相溶解粗品注入色譜儀，紫外在線檢測，檢測波長為235nm，收集目標流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到玉蘭素B產(chǎn)品，含量為96. 9%。
權利要求
1.ー種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于包括以下步驟以玉蘭葉為原料，粉碎至60目，按一定固液體積比加入60-85%こ醇浸泡O. 5-2h，采用超高壓法進行萃取，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)高速逆流色譜分離，即可獲得玉蘭素B。
2.如權利要求I所述的ー種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于所述固液體積比為1:10-1:18。
3.如權利要求I所述的ー種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于所述超高壓萃取壓カ為400MPa，保壓時間為2-4min。
4.如權利要求I所述的ー種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于所述石油醚-丙酮體積比為17:1-2:1。
5.如權利要求I所述的ー種提取純化玉蘭素B的方法，其特征在于所述高速逆流色譜分離溶劑系統(tǒng)為正己烷-こ酸こ酷-甲醇-7K，體積比為(1-2) :(4-6) :(3-4) : (4-7)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取純化玉蘭素B的方法，該方法是將原料粉碎，用60-95%乙醇浸泡0.5-2h，采用超高壓法進行萃取，將萃取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用硅膠拌樣上柱，石油醚-丙酮進行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)高速逆流色譜分離，即可獲得玉蘭素B。本發(fā)明操作簡單、快速高效、得率高、產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D307/80GK102863412SQ201210366709
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月28日 優(yōu)先權日2012年9月28日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司