本發(fā)明涉及間充質(zhì)干細胞
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種檢測人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞抗氧化能力的方法。
背景技術(shù)：
：：間充質(zhì)干細胞(Mesenchymastemcell,MSCs)，由于其強大的抗氧化及抗炎能力，目前已得到廣泛的關(guān)注。MSCs作為成體干細胞的一種，可以從多種組織細胞中分離出來，體外擴增后可用于人體疾病的治療。間充質(zhì)干細胞在抗氧化方面的應(yīng)用，基于以下特性：(1)能夠分泌抗氧化酶類物質(zhì)抑制機體氧化反應(yīng)；(2)能夠分泌小分子物質(zhì)清除機體氧化自由基。MSCs在體外無血清培養(yǎng)的過程中，可以分泌抗氧化酶類以及其他小分子物質(zhì)釋放到培養(yǎng)上清中。收集其培養(yǎng)上清進行抗氧化指標(biāo)的檢測，可以發(fā)現(xiàn)其具有一定抗氧化能力，并可以清除氧化自由基，但具體的抗氧化成分還有待研究。氧化應(yīng)激是諸多疾病的始動因素。機體在遭受氧化損傷后，由于氧化應(yīng)激作用會產(chǎn)生活性氧簇(Reactiveoxygenspecies,ROS)，其中主要包括清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)、羥自由基(·OH)、超氧陰離子(O2—)、一氧化氮離子(NO2—)、過氧化氫離子(H2O2)等。正常生理狀況下，人體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除處于動態(tài)平衡狀態(tài)，自由基也是人體不可或缺的物質(zhì)，參與有氧呼吸電子傳遞，細胞信號傳導(dǎo)和基因調(diào)控、誘導(dǎo)細胞增殖和凋亡、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、維持個體的正常生長發(fā)育及抵抗細菌、病毒和癌癥等方面起著重要作用。然而，當(dāng)機體遭受外來刺激時，會導(dǎo)致機體遭受氧化應(yīng)激，自由基就會大量產(chǎn)生打破平衡，而多余的自由基就會攻擊生物膜引發(fā)一系列的自由基鏈反應(yīng)，引發(fā)機體蛋白質(zhì)，酶，脂質(zhì)和核酸的氧化損傷，進而引發(fā)疾病。臨床現(xiàn)已證明多種疾病與自由基相關(guān)，主要包括：(1)神經(jīng)退行性疾?。号两鹕?PD)、阿爾茨海默病(AD)、肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)、亨廷頓病(HD)和中風(fēng)等；(2)心腦血管疾病：動脈粥樣硬化、高血壓、缺血性心臟病等；(3)癌癥：膀胱癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌等癌癥；(4)糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，骨質(zhì)增生異常綜合癥，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、白內(nèi)障、哮喘、小兒肺炎，缺血再灌注損傷等其他疾病相關(guān)。因此，在治療此類疾病時，針對其發(fā)病機制的抗氧化以及清除自由基方面的治療變得尤為重要，或許可以推測，如果外界干預(yù)治療可以清除機體多余的氧化自由基，便可以在根本上治愈此類疾病，療效可以優(yōu)于當(dāng)前臨床治療上針對于疾病表現(xiàn)所采取的治療措施，以“本”代“標(biāo)”。當(dāng)前關(guān)于間充質(zhì)干細胞的大多數(shù)研究主要針對于間充質(zhì)干細胞本身的抗炎作用以及其多向分化能力，而一些動物實驗證明間充質(zhì)干細胞同樣具有抗氧化作用。SALLYM.SHALABY等人將大腸桿菌通過氣管進入到大鼠體內(nèi)，造成大鼠急性肺損傷模型，然后將骨髓來源的間充質(zhì)干細胞通過尾靜脈注射到大鼠體內(nèi)，結(jié)果顯示：間充質(zhì)干細胞能明顯減輕大鼠肺損傷，且接受間充質(zhì)干細胞的實驗組大鼠血清的抗氧化酶類物質(zhì)，如超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等與對照組相比均有不同程度的提高。ShirongNi等也同樣在體內(nèi)實驗中證實了間充質(zhì)干細胞具有修復(fù)損傷肺組織的能力，且此修復(fù)能力是通過Nrf2抗氧化信號通路進行的。而究其作用機制，有些觀點認(rèn)為間充質(zhì)干細胞的抗氧化能力是通過其旁分泌作用發(fā)揮功能的。間充質(zhì)干細胞在分裂增殖的過程中，會向外周分泌微泡/外泌體，其表面攜帶小分子蛋白，此類小分子可以通過調(diào)控抗氧化信號通路來發(fā)揮抗氧化作用，或者分泌一些抗氧化酶類物質(zhì)，酶類抗氧化物在銅、鋅、錳、鐵等輔因子的協(xié)助下通過分解或消除自由基以達到抗氧化的目的，此過程反應(yīng)復(fù)雜、需多步才能完成，其間可能會引發(fā)自由基鏈反應(yīng)，產(chǎn)生新的自由基或氧化物。因此，申請人認(rèn)為不僅間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)治療中可以發(fā)揮作用，其在體外培養(yǎng)過程中將抗氧化活性物質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中，所得的培養(yǎng)上清也具有抗氧化作用。為此，提供一種檢測間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清的清除自由基能力以及其中的抗氧化酶活性的方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：：本發(fā)明的目的旨在拓展間充質(zhì)干細胞在臨床治療方面的應(yīng)用，為臨床上間充質(zhì)干細胞的無細胞治療提供依據(jù)，提供一種檢測人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)所得上清抗氧化能力的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：一種檢測人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞抗氧化能力的方法，該方法是應(yīng)用人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清作為實驗對象，檢測所述培養(yǎng)上清中人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞分泌的抗氧化成分的抗氧化能力，從而間接推斷出人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞及其培養(yǎng)上清中的抗氧化能力，為其后期的研究及應(yīng)用提供依據(jù)。上述檢測人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞抗氧化能力的方法，包括如下步驟：從胎盤中提取人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞得原代人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞；將原代人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞進行培養(yǎng)得第一代間充質(zhì)干細胞，并進行凍存；收集不同個體的第一代間充質(zhì)干細胞，復(fù)蘇后進行體外培養(yǎng)至第六代，收集第二代到第六代無血清培養(yǎng)上清，檢測其總抗氧化能力、清除自由基能力以及抗氧化酶類物質(zhì)活性。上述方法具體步驟為：(1)人胎盤間充質(zhì)干細胞的分離從人胎盤中取得胎兒側(cè)胎盤，將其剪碎后經(jīng)過漂洗、離心、離心上清收集、過篩后得到原代人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞；(2)原代人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞的原代培養(yǎng)將原代人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)10～15天，待局部融合度達到80％后進行傳代，得到第一代間充質(zhì)干細胞，并進行凍存；(3)第一代間充質(zhì)干細胞的傳代培養(yǎng)復(fù)蘇第一代間充質(zhì)干細胞至培養(yǎng)皿中，使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)至80％融合后收集上清，部分凍存后進行傳代培養(yǎng)至第六代，每代次收集上清離心分裝后于-80℃凍存，進行檢測；(4)將檢測得到的各組數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，分別進行樣本組與空白對照組相比，觀察所得數(shù)據(jù)是否有統(tǒng)計學(xué)差異。上述檢測內(nèi)容主要包括：①總抗氧化能力(T-AOC)測定：上清中的抗氧化物質(zhì)可以將Fe3+還原成Fe2+，后者可與菲啉類物質(zhì)形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，通過比色法測定出其抗氧化能力的高低。由于抗壞血酸/維生素C(VC)是已知并公認(rèn)的抗氧化物質(zhì)，故在預(yù)實驗中首先檢測出所得上清的大致范圍，再用培養(yǎng)基配制成不同濃度的VC溶液，檢測其抗氧化活性，然后選取其數(shù)值為上清抗氧化能力2倍左右的VC溶液作為后續(xù)實驗的標(biāo)準(zhǔn)陽性對照，同時使用空白培養(yǎng)基作為陰性對照。正式實驗中，采用此法分別檢測對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清的總抗氧化能力。②清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)能力的檢測：DPPH·是一種以氮為中心的自由基，含有一個單電子，在517nm處有強烈的吸收峰，其乙醇溶液呈深紫色，加入培養(yǎng)上清后，測定清除DPPH·而引起的吸光度的減少可以反映其抗氧化能力的強弱。本實驗采用此法分別檢測對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清的清除DPPH·自由基的能力。③抑制羥自由基(·OH)能力：羥自由基是一種氧化能力很強的自由基，其性質(zhì)很活潑，氧化各種有機物和無機物的速率極快，是造成組織脂質(zhì)過氧化、核酸斷裂、蛋白質(zhì)和多糖分解的主要因素，與機體衰老、腫瘤、輻射孫損傷和細胞吞噬能力有關(guān)。Fenton反應(yīng)是最常見的產(chǎn)生羥自由基的化學(xué)反應(yīng)，H202的量和Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的·OH量成正比，當(dāng)給予電子受體后，用griess試劑顯色，形成紅色物質(zhì)，其呈色與·OH的多少成正比關(guān)系。依據(jù)此原理檢測出對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清的抑制羥自由基的能力。④抗超氧陰離子自由基(O2—)能力：此實驗?zāi)M機體中黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)，產(chǎn)生超氧陰離子自由基，加入電子傳遞物質(zhì)及gress顯色劑，使反應(yīng)體系呈現(xiàn)紫紅色，可用分光光度計測其吸光度。當(dāng)抗超氧陰離子的物質(zhì)可抑制該反應(yīng)使超氧陰離子自由基減少，故比色時顏色變淺；依據(jù)形成物的顏色深淺計算出抑制或產(chǎn)生超氧陰離子自由基的能力強弱。依據(jù)此原理檢測出對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清的抗超氧陰離子自由基(O2—)的能力。⑤超氧化物歧化酶(SOD)活力測定：SOD是人體內(nèi)清除超氧陰離子自由基的酶，在維持機體自由基平衡上有重要作用。本實驗通過模擬黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基，后者氧化羥胺形成亞硝酸鹽，在顯色劑作用下呈現(xiàn)紫紅色，用可見光分光光度計測定其吸光度。當(dāng)被測樣本中含SOD時，則亞硝酸鹽減少，比色管吸光度值降低。依據(jù)此原理檢測出對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清的超氧化物歧化酶活力。⑥谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性測定：谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—PX)是機體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過氧化物分解的酶，它特異地催化還原型谷胱甘肽(GSH)對氫過氧化物的還原反應(yīng)。一般認(rèn)為它在細胞內(nèi)能清除有害的過氧化物代謝產(chǎn)物，阻斷脂質(zhì)過氧化鏈鎖反應(yīng)，從而起到保護細胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。GSH和二硫代二硝基苯甲酸作用生成5-硫代二硝基苯甲酸陰離子呈現(xiàn)較穩(wěn)定的黃色，在412nm處測其吸光度即可算出GSH的量。依據(jù)此原理檢測出對照組、VC組以及間充質(zhì)干細胞上清谷胱甘肽過氧化物酶的活力。以上各組數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，分別進行實驗組和VC組與對照組進行兩樣本均數(shù)比較，P＜0.05時認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。本發(fā)明的有益效果在于：該方法通過測定人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清的抗氧化能力，進而推斷間充質(zhì)干細胞的總體抗氧化能力，為后續(xù)的實驗奠定基礎(chǔ)。由其結(jié)果得知：(1)在總抗氧化能力方面，人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清具有一定的抗氧化能力，其中總抗氧化能力(T-AOC)約相當(dāng)于30-70μmol/LVC的總抗氧化能力，且其總抗氧化能力與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；(2)在清除自由基能力上，人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清在清除DPPH·、·OH和O2—自由基上均具有一定作用，且其清除自由基能力與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；(3)在抗氧化酶類活性測定上，人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清中可以檢測到超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GDH-PX)活性，且與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。附圖說明：圖1是本發(fā)明中不同濃度VC的總抗氧化能力的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；圖2是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的總抗氧化能力的對比圖；圖3是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的清除二苯基苦基苯肼自由基能力的對比圖；圖4是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的抑制羥自由基能力的對比圖；圖5是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的抗超氧陰離子自由基能力的對比圖；圖6是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的超氧化物歧化酶活力的對比圖；圖7是本發(fā)明中對照組、VC組以及樣本組的谷胱甘肽過氧化物酶活性的對比圖。具體實施方式：通過下面的實施例可以對本發(fā)明進行進一步的描述，然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本發(fā)明檢測人胎盤胎兒側(cè)間充質(zhì)干細胞抗氧化能力的方法，包括如下步驟：S1：人胎盤間充質(zhì)干細胞的分離及原代培養(yǎng)(1)將胎盤放入無菌托盤中，剝離外層薄膜，利用已消毒的手術(shù)剪將胎兒側(cè)胎盤剪至厚度約為0.5cm的組織塊，此過程盡量避開血管，立即浸泡至含有雙抗(兩性霉素、鏈霉素)的PBS中，漂洗三次至液體變?yōu)橥该骰蛭⒓t；(2)將上述組織剪至碎末狀，并始終保持組織濕潤，將組織塊轉(zhuǎn)入50ml無菌離心管中，根據(jù)收集的組織量加入相應(yīng)的膠原酶A(5mg/ml)，放入37℃水浴中消化2h；(3)收集上述上清至離心管中，PBS重懸沉淀的細胞團塊，加速度為9，離心力為500g進行離心，當(dāng)離心力接近500g時，加速度降至1并按停止離心取上清，此操作重復(fù)3次；(4)將收集的上清離心(500g/min，10min)，棄去上清，加入DMEM培養(yǎng)基使細胞重懸，并進行過篩，即100μm濾網(wǎng)過篩后再置于40μm濾網(wǎng)進行過篩；(5)將過篩后的懸液離心(1000r/min，4min)，棄去上清，加入間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基使細胞重懸，并將細胞懸液接種到已包被的10cm培養(yǎng)皿中，放入37℃，5％CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，即得原代間充質(zhì)干細胞；(6)剩余的細胞使用凍存液重懸后轉(zhuǎn)入凍存管中，放入凍存盒，-80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮罐中保存，即原代間充質(zhì)干細胞；(7)10-15天內(nèi)觀察步驟(5)中培養(yǎng)的細胞，觀察到原代間充質(zhì)干細胞呈梭形或多角形，待局部融合度達80％后進行傳代及凍存，此時細胞為第一代間充質(zhì)干細胞。S2：第一代間充質(zhì)干細胞的傳代培養(yǎng)及培養(yǎng)上清收集(1)取9ml原代間充質(zhì)干細胞無血清完全培養(yǎng)基加入到已包被的10cm培養(yǎng)皿中，放入37℃，5％CO2細胞培養(yǎng)箱中平衡；(2)從液氮罐中取出第一代間充質(zhì)干細胞，37℃水浴復(fù)蘇后與2ml培養(yǎng)基完全混合，離心去除上清，加入1ml培養(yǎng)基重懸細胞，接種到已平衡至37℃的培養(yǎng)皿中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；(3)48h后鏡下觀察細胞融合率約為80％時，收集培養(yǎng)上清，離心后去除死細胞，再將上清按需進行分裝，與-80℃進行保存；此次收集的即為第二代間充質(zhì)干細胞上清；(4)培養(yǎng)皿中的細胞使用37℃的PBS沖洗后，使用間充質(zhì)干細胞專用消化酶進行消化，并按照1：3進行傳代，其中2/3細胞進行凍存，1/3細胞用于傳代，培養(yǎng)時間同樣為48h，細胞融合率達到80％；(5)按照以上操作收集第三代至第六代間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清，以上操作為培養(yǎng)及收集單個個體的樣本，本發(fā)明重復(fù)三個人的樣本。S3：人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清的各項抗氧化指標(biāo)的檢測(1)各項抗氧化指標(biāo)檢測前，先將第二代至第六代間充質(zhì)干細胞上清取出，放入4℃融解，使用前平衡至室溫；(2)不同濃度VC及樣本組(三個不同個體第二代至第六代上清)的總抗氧化能力(T-AOC)的檢測稱取m＝0.176gVC，雙蒸水配制VC母液，即VC母液＝1000μmol/L；再按照下表1配制不同濃度的VC溶液，溶劑為間充質(zhì)干細胞完全培養(yǎng)基：C母取樣量(μl)加入培養(yǎng)基量(μl)VC終濃度(μmol/L)0100001099010209802040960408092080100900100200800200每個樣本測定包含測定管和對照管，各設(shè)置三次平行重復(fù)。測定管需要將100μl樣品加入反應(yīng)體系中，再與已加入反應(yīng)體系的對照管同時置于37℃中水浴30min后加入顯色終止液，最后向?qū)φ展苤屑尤?00μl樣品，混勻后靜置10min，在520nm處測定各管吸光度值。根據(jù)公式：計算出各樣本總抗氧化能力。由圖1、圖2所示，不同濃度VC及樣本組的總抗氧化能力的檢測結(jié)果對比可知：人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清具有一定的抗氧化能力，其中總抗氧化能力(T-AOC)約相當(dāng)于30-70μmol/LVC的總抗氧化能力，且其總抗氧化能力與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。(3)VC組、對照組、樣本組(三個不同個體第二代至第六代上清)DPPH·清除率的測定DPPH溶液配制：稱取DPPH顆粒0.01g于少量無水乙醇混合，充分?jǐn)嚢枞芙?，再?0％乙醇為溶劑定容至50ml，配制成0.2g/L母液，臨時使用時用50％乙醇稀釋10倍成DPPH溶液，按下式加樣；每組三次平行重復(fù)：A0：3.5mlDPPH溶液+0.5ml試樣溶劑A：3.5mlDPPH溶液+0.5ml試樣B：3.5mlDPPH溶液的溶劑(50％無水乙醇)+0.5ml試樣根據(jù)公式：DPPH·自由基清除率(％)＝[1-(A-B/A0)]*100％(4)對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)的抑制羥自由基(·OH)能力的測定實驗分為空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、對照管和測定管，每管平行測定三次；其中空白管使用雙蒸水作為對照，標(biāo)準(zhǔn)管使用0.03％H2O2作為對照。測試前先將各試劑在37℃中水浴平衡，且需在37℃水浴中將各組樣品加入反應(yīng)體系，準(zhǔn)確反應(yīng)1min后加入顯色劑，混勻后室溫放置20min，在波長為550nm處測定各管吸光度值。根據(jù)公式：計算出各管抑制羥自由基能力。(5)對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)的抗超氧陰離子自由基(O2—)能力的測定實驗分為對照管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管，每管平行測定三次；其中空白管以雙蒸水作為對照，標(biāo)準(zhǔn)管以0.15mg/ml的VC標(biāo)準(zhǔn)品作為對照，測定管則加入上清樣品。將各組樣品加入反應(yīng)體系后，37℃水浴40min后加入顯色劑，混勻后室溫放置10min，在波長為550nm處測定各管吸光度值。根據(jù)公式：計算出各管抗超氧陰離子活力單位。由圖3～圖5所示，對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)在清除自由基能力的測定結(jié)果可知：人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清在清除DPPH·、·OH和O2—自由基上均具有一定作用，且其清除自由基能力與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。(6)對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)的超氧化物歧化酶(SOD)活力的測定實驗分為對照管和測定管，每管平行測定三次。其中空白管以雙蒸水作為對照，測定管則加入上清樣品。將各組樣品加入反應(yīng)體系后，37℃水浴40min后加入顯色劑，混勻后室溫放置10min，在波長為550nm處測定各管吸光度值。根據(jù)公式：計算出各管SOD活力。(7)對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)的谷胱甘肽過氧化物酶(GDH-PX)活性的測定實驗分為酶促反應(yīng)和顯色反應(yīng)兩階段進行①酶促反應(yīng)：實驗分為非酶管和酶管，每管平行重復(fù)三次。其中酶管需在37℃水浴前加入待測樣品，而非酶管在水浴后加入待測樣品。酶促反應(yīng)完成后充分混勻，3800r/min離心10min，取上清1ml做后續(xù)顯色反應(yīng)。②顯色反應(yīng)：實驗分為空白管、對照管、非酶管和酶管，每管平行重復(fù)三次。其中空白管加入GSH標(biāo)準(zhǔn)溶劑應(yīng)用液，標(biāo)準(zhǔn)管加入20μmol/L的GSH標(biāo)準(zhǔn)液，非酶管和酶管分別加入1ml酶促反應(yīng)所得上清。將上述樣品顯色反應(yīng)體系后，混勻后室溫放置15min，在波長為412nm處測定各管吸光度值。根據(jù)公式：計算出各管GSH-PX活力單位。由圖6、圖7所示，對照組、VC組以及樣本組(間充質(zhì)干細胞上清)在抗氧化酶類活性測定結(jié)果可知：人胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)上清中可以檢測到超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GDH-PX)活性，且與空白對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。當(dāng)前第1頁1 2 3