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一種用于甘薯黑斑病抗性鑒定中的黑斑病菌培養(yǎng)方法與流程

文檔序號:11144743閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于甘薯黑斑病抗性鑒定中的黑斑病菌培養(yǎng)方法,其特征在于,所述培養(yǎng)方法包括如下步驟:

(1)病原菌分離和純化:從田間采集黑斑病發(fā)病薯塊,通過組織分離法分離黑斑病菌,分離時洗去薯塊表面泥土,并用75%酒精進(jìn)行表面消毒,在超凈工作臺上將病斑表皮去除,取病斑部并切成小塊接種在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)分離純化和柯赫氏法驗證確定為黑斑病菌;

(2)甘薯液體培養(yǎng)基制備:將2g薯塊,加水煮沸并攪拌,使薯塊徹底勻漿在溶液中,紗布過濾,將濾液高壓滅菌;

(3)黑斑病菌的培養(yǎng)和孢子懸浮液制備:將分離純化的黑斑病菌接入甘薯液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)20-24h,紗布過濾去除菌絲后,在轉(zhuǎn)速為4000-6000rpm的離心機(jī)中離心5min,之后用無菌水懸浮獲得孢子懸浮液,并將其OD600調(diào)至1.0。

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