1.一種用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的制備方法，其特征是：包括以下步驟：
a、蓋玻片的處理：
用等離子表面清洗機(jī)對(duì)蓋玻片正反兩面進(jìn)行處理，然后將處理后的蓋玻片浸泡于的改性溶液中，放置一段時(shí)間，取出，溶劑淋洗，自然風(fēng)干，備用；
b、聚合物涂層的制備：
將單體、交聯(lián)劑、紫外光引發(fā)劑和溶劑按比例混合均勻，用移液器吸取聚合物溶液滴加在PET膜上，再將步驟a得到的蓋玻片蓋在液滴上，輕輕擠壓排出空氣，紫外聚合，得到聚合物涂層；
步驟b中單體為：甲基丙烯酸羥乙酯A、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化銨溶液E、甲基丙烯酸環(huán)己酯L、甲基丙烯酸-2-(二乙氨基)乙酯K，聚合物涂層為：E1K1L1、E3K1L2、E3A1L2，數(shù)字為各單體之間的質(zhì)量比。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的制備方法，其特征是：所述的步驟a中等離子表面清洗機(jī)功率500w，時(shí)間120s；蓋玻片的規(guī)格為φ30mm；改性溶液包括乙腈、三乙胺和3-(異丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，乙腈、三乙胺和3-(異丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷的體積比為60～61：0.4～0.42：0.85～0.87。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的制備方法，其特征是：所述的步驟a中處理后的蓋玻片浸泡于的改性溶液中，在恒溫振蕩器震蕩24h后，取出蓋玻片，用丙酮清洗2～3次，自然風(fēng)干，保存在-25℃冰箱中待用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的制備方法，其特征是：所述的步驟b中交聯(lián)劑為N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺，紫外光引發(fā)劑為1-羥環(huán)己基苯酮，溶劑為1-甲基-2-吡咯烷酮，單體固含量為50％，交聯(lián)劑和紫外光引發(fā)劑分別占單體總質(zhì)量的10％和5％，步驟b中聚合物溶液為10μL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的制備方法，其特征是：所述的步驟b中聚合物涂層具體制備方法為：用365nm紫外光照射30min后，將PET薄膜剝離，得到復(fù)合有聚合物涂層的載玻片，將載玻片放置在40℃烘箱中12h，用丙酮和乙醇各沖洗兩次，自然風(fēng)干。
6.權(quán)利要求1所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的應(yīng)用，其特征是：包括：
c、人類脂肪干細(xì)胞在聚合物涂層上的長(zhǎng)期培養(yǎng)：
收集人類脂肪干細(xì)胞消化并計(jì)數(shù)，接種到聚合物涂層表面進(jìn)行長(zhǎng)期體外培養(yǎng)；
d、誘導(dǎo)人類脂肪干細(xì)胞向成脂、成骨、成軟骨細(xì)胞的分化：
待c中的人類脂肪干細(xì)胞生長(zhǎng)至80％融合時(shí)，分別更換成脂、成骨、成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液，以加入L-DMEM培養(yǎng)基組作為陰性對(duì)照組于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
e、對(duì)誘導(dǎo)后的三種成體細(xì)胞分別進(jìn)行染色定性：
成脂、成骨、成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)一段時(shí)間后分別進(jìn)行油紅O染色、茜素紅染色、阿利新藍(lán)染色，然后進(jìn)行拍照觀察。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的應(yīng)用，其特征是：所述的c中聚合物涂層表面進(jìn)行長(zhǎng)期體外培養(yǎng)的具體操作為：收集第2代人類脂肪干細(xì)胞，將細(xì)胞濃度調(diào)整為1×105/mL，接種于載玻片的聚合物涂層上，載玻片置于6孔板中，每孔加2.5mL細(xì)胞懸液，用一個(gè)沒有聚合物涂層的TC板作為對(duì)照組；每3天換一次培養(yǎng)液，待對(duì)照組的細(xì)胞長(zhǎng)到90％融合時(shí)，將所有實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的細(xì)胞分別脫壁計(jì)數(shù)，仍按1×105/mL的濃度分別接種于對(duì)應(yīng)的聚合物涂層表面進(jìn)行傳代長(zhǎng)期培養(yǎng)。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的應(yīng)用，其特征是：所述的d中三種誘導(dǎo)培養(yǎng)液為：成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液：含10％FBS的H-DMEM、0.5mmol/L的3-異丁基甲基黃嘌呤、10μmol/L胰島素、1μmol/L地塞米松和200μmol/L吲哚美辛；成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液：含10％FBS的H-DMEM、10mmol/L的β-甘油磷酸鈉、10-7mol/L地塞米松、50μmol/L抗壞血酸；成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液：含10％FBS的H-DMEM、10-7mol/L地塞米松、37.5μg/mL抗壞血酸、40μg/mL脯氨酸、100μg/mL丙酮酸鈉、50mg/mL ITS、100ng/mL TGF-β3。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的應(yīng)用，其特征是：所述的d中人類脂肪干細(xì)胞于37℃、5％CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3d換液1次。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于人類脂肪干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)的聚合物涂層的應(yīng)用，其特征是：所述的e中三種誘導(dǎo)后的成體細(xì)胞染色具體操作為：成脂誘導(dǎo)3周后進(jìn)行油紅O染色：細(xì)胞進(jìn)行染色之前，先用10％的甲醛溶液固定30min后用PBS沖洗兩次，用0.1μg/mL DAPI染色20min后用PBS沖洗兩次，再用60％的異丙醇溶液浸洗5min，然后再加入油紅O染色液室溫染色30min，最后用60％異丙醇水溶液清洗2-3次后用顯微鏡進(jìn)行拍照觀察；成骨誘導(dǎo)4周后進(jìn)行茜素紅染色：吸棄培養(yǎng)液，先用PBS清洗一次，再10％的甲醛溶液固定30min，后用PBS沖洗兩次，然后用2％的茜素紅水溶液染色20min，最后用PBS緩沖液清洗2-3次后進(jìn)行拍照觀察；成軟骨誘導(dǎo)4周后進(jìn)行阿利新藍(lán)染色：細(xì)胞進(jìn)行染色之前，先用10％的甲醛溶液固定30min，再用PBS沖洗兩次，加Alcian酸化液浸泡3min，然后加Alcian染色液染色15-30min，最后用去離子水沖洗2-3次后進(jìn)行拍照觀察。