本發(fā)明涉及細(xì)胞分選，具體的是涉及一種磁性細(xì)胞分選方法、裝置及設(shè)備。

背景技術(shù)：

1、細(xì)胞學(xué)研究中，對某種特定的細(xì)胞進(jìn)行功能研究，如對細(xì)胞培養(yǎng)上清液通過elisa分析檢測細(xì)胞因子、細(xì)胞共培養(yǎng)檢測細(xì)胞功能等，都需要得到高純度的目的細(xì)胞。因此，高效地分離所需要的目的細(xì)胞是進(jìn)行細(xì)胞功能研究的先決條件。

2、細(xì)胞分選是指根據(jù)細(xì)胞所具有的特性把某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，它是對某一特定細(xì)胞進(jìn)行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。

3、磁性細(xì)胞分選：是用結(jié)合有抗體的免疫磁珠與樣品細(xì)胞進(jìn)行孵育，表達(dá)有相應(yīng)抗原的細(xì)胞就會特異性的結(jié)合在包被有抗體的免疫磁性微粒上，當(dāng)孵育形成的混合細(xì)胞樣本緩慢的經(jīng)過磁場時，結(jié)合有磁珠的目標(biāo)細(xì)胞(即陽性細(xì)胞)就會滯留在磁鐵上，而未結(jié)合有磁珠的非目標(biāo)細(xì)胞(即陰性細(xì)胞)仍存在于混合細(xì)胞樣本中，從而達(dá)到分離純化細(xì)胞的目的。磁性分選只是讓細(xì)胞處于一個低磁場中，基本可以忽略對細(xì)胞的影響，分離得到的細(xì)胞具有較高的復(fù)蘇率及細(xì)胞活性，對于下游應(yīng)用影響較小。

4、現(xiàn)有對磁性細(xì)胞進(jìn)行分選主要是采用手工分選，步驟如下：

5、將分選柱置于磁場中；

6、將已孵育好的細(xì)胞樣本通過磁場中的分選柱，目標(biāo)細(xì)胞在磁場的作用下吸附在分選柱的內(nèi)壁上，從而達(dá)到分離目的；

7、將分選柱取出磁場，并用向分選柱通入分選液以將目標(biāo)細(xì)胞洗脫出來。

8、該種分選方式雖然具有高靈敏度、高純度、易操作、對目的細(xì)胞刺激較小等優(yōu)點，但手工分選大細(xì)胞量時，分選時間長，降低了分選效率，操作人員需持續(xù)保持專注，人工強(qiáng)度大，且容易出現(xiàn)操作失誤，造成細(xì)胞污染的可能性增加，且因人員差異，分選的細(xì)胞的純度可能存在較大差異，不利于后續(xù)的研究。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種磁性細(xì)胞分選方法、裝置及設(shè)備，縮短了分選時間，提高了分選效率，不易出現(xiàn)操作失誤，降低了人工強(qiáng)度以及降低了目標(biāo)細(xì)胞污染的風(fēng)險，保證了分選的目標(biāo)細(xì)胞的純度，不會出現(xiàn)差異太大的情況。

2、本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

3、本發(fā)明的第一方面提供一種磁性細(xì)胞分選方法，包括以下步驟：對管路結(jié)構(gòu)中的分選柱施加磁場，開啟管路結(jié)構(gòu)上位于樣品容器和陰選收集容器之間的控制閥，通過蠕動泵驅(qū)動樣品容器內(nèi)的細(xì)胞樣本朝陰選收集容器的方向流動，其中，細(xì)胞樣本中的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中，非目標(biāo)細(xì)胞隨著細(xì)胞樣本的流動進(jìn)入陰選收集容器；通過緩沖液對所述管路結(jié)構(gòu)進(jìn)行沖洗，令管路結(jié)構(gòu)中殘留的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中；開啟陽選收集容器所對應(yīng)的控制閥，對磁場解除后的所述分選柱進(jìn)行洗脫，通過蠕動泵將所述分選柱中的目標(biāo)細(xì)胞洗脫至陽選收集容器中。

4、本發(fā)明的第二方面提供一種磁性細(xì)胞分選裝置，采用上述的磁性細(xì)胞分選方法進(jìn)行細(xì)胞分選，包括管路結(jié)構(gòu)、蠕動泵以及磁場施加單元，所述管路結(jié)構(gòu)具有第一接口、第二接口、第三接口、第四接口和第五接口，所述管路結(jié)構(gòu)上設(shè)有多個控制閥、循環(huán)閥以及分選柱，所述蠕動泵設(shè)置在所述管路結(jié)構(gòu)上，所述磁場施加單元用于對所述分選柱施加磁場以及用于將施加在所述分選柱上的磁場解除。

5、本發(fā)明的第三方面提供一種磁性細(xì)胞分選設(shè)備，其特征在于，包括管路結(jié)構(gòu)、蠕動泵、磁場施加單元以及執(zhí)行上述的磁性細(xì)胞分選方法的控制器，所述管路結(jié)構(gòu)具有第一接口、第二接口、第三接口、第四接口和第五接口，所述管路結(jié)構(gòu)上設(shè)有多個控制閥、循環(huán)閥以及分選柱，所述蠕動泵設(shè)置在所述管路結(jié)構(gòu)上，所述磁場施加單元用于對所述分選柱施加磁場以及用于將施加在所述分選柱上的磁場解除，所述蠕動泵、多個控制閥、循環(huán)閥以及磁場施加單元均與所述控制器電連接。

6、本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的磁性細(xì)胞分選方法，通過控制管路結(jié)構(gòu)上的控制閥、蠕動泵動作，從而可自動完成對細(xì)胞的分選，相對現(xiàn)有采用人工的方式，縮短了分選時間，提高了分選效率，不易出現(xiàn)操作失誤，降低了人工強(qiáng)度以及降低了細(xì)胞污染的風(fēng)險，保證了分選的細(xì)胞的純度，不會出現(xiàn)差異太大的情況，利于后續(xù)的研究。

技術(shù)特征：

1.一種磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述通過緩沖液對所述管路結(jié)構(gòu)進(jìn)行沖洗，令管路結(jié)構(gòu)中殘留的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中之后，所述開啟陽選收集容器所對應(yīng)的控制閥之前，還包括：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述將施加在分選柱上的磁場解除，開啟管路結(jié)構(gòu)上的循環(huán)閥，通過蠕動泵驅(qū)動管路結(jié)構(gòu)中的循環(huán)管路內(nèi)的緩沖液進(jìn)行循環(huán)流動，包括：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述通過緩沖液對所述管路結(jié)構(gòu)進(jìn)行沖洗，令管路結(jié)構(gòu)中殘留的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中，包括：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述對管路結(jié)構(gòu)中的分選柱施加磁場，開啟管路結(jié)構(gòu)上位于樣品容器和陰選收集容器之間的控制閥之前，包括：將盛裝有緩沖液的緩沖液容器、盛裝有細(xì)胞樣本的樣品容器、陰選收集容器、陽選收集容器、廢液容器分別與管路結(jié)構(gòu)的第一接口、第二接口、第三接口、第四接口、第五接口連接。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述將施加在分選柱上的磁場解除，開啟管路結(jié)構(gòu)上的循環(huán)閥并控制內(nèi)循環(huán)清洗所對應(yīng)的控制閥，通過蠕動泵驅(qū)動管路結(jié)構(gòu)中的循環(huán)管路內(nèi)的緩沖液進(jìn)行循環(huán)流動的過程中，包括：

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的磁性細(xì)胞分選方法，其特征在于，所述將盛裝有緩沖液的緩沖液容器、盛裝有細(xì)胞樣本的樣品容器、陰選收集容器、陽選收集容器、廢液容器分別與管路結(jié)構(gòu)的第一接口、第二接口、第三接口、第四接口、第五接口連接之后，包括：開啟管路結(jié)構(gòu)上的位于緩沖液容器和廢液容器之間的控制閥，通過蠕動泵驅(qū)動緩沖液容器內(nèi)的緩沖液朝廢液容器的方向流動以灌注管路結(jié)構(gòu)以及排出分選柱內(nèi)的氣泡。

8.一種磁性細(xì)胞分選裝置，采用如權(quán)利要求1-7中任一項所述的磁性細(xì)胞分選方法進(jìn)行細(xì)胞分選，其特征在于，包括管路結(jié)構(gòu)、蠕動泵以及磁場施加單元，所述管路結(jié)構(gòu)具有第一接口、第二接口、第三接口、第四接口和第五接口，所述管路結(jié)構(gòu)上設(shè)有多個控制閥、循環(huán)閥以及分選柱，所述蠕動泵設(shè)置在所述管路結(jié)構(gòu)上，所述磁場施加單元用于對所述分選柱施加磁場以及用于將施加在所述分選柱上的磁場解除。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的磁性細(xì)胞分選裝置，其特征在于，所述管路結(jié)構(gòu)包括第一管路、第二管路、第三管路、第四管路、第五管路、第六管路、泵管、第七管路、第八管路、第九管路、第十管路、第十一管路、第十二管路、循環(huán)流動管路以及第十三管路，所述第一管路、第九管路、第七管路依次連接，所述第一管路的遠(yuǎn)離第九管路的一端具有所述第一接口，所述第二管路、第三管路、第四管路、第五管路依次連接，所述第二管路的遠(yuǎn)離第三管路的一端具有所述第二接口，所述分選柱連接在所述第五管路和第六管路之間，所述泵管連接在所述第六管路和第七管路之間，所述蠕動泵設(shè)置在所述泵管上，所述第八管路的一端與所述第七管路連接，所述第八管路的另一端具有所述第三接口，所述第十管路的一端連接在所述第一管路和第九管路之間，所述第十管路的另一端連接在所述第二管路和第三管路之間，所述第十一管路的一端連接在所述第九管路和第七管路之間，所述第十一管路的另一端連接在所述第四管路和第五管路之間，所述第十二管路的一端與所述第七管路連接，所述第十二管路的另一端具有所述第四接口，所述循環(huán)流動管路的一端連接在所述泵管和第七管路之間，所述循環(huán)流動管路的另一端與所述第五管路連接，所述第十三管路的一端與所述第七管路連接，所述第十三管路的另一端具有所述第五接口；

10.一種磁性細(xì)胞分選系統(tǒng)，其特征在于，包括管路結(jié)構(gòu)、蠕動泵、磁場施加單元以及執(zhí)行如權(quán)利要求1至7中任一項所述的磁性細(xì)胞分選方法的控制器，所述管路結(jié)構(gòu)具有第一接口、第二接口、第三接口、第四接口和第五接口，所述管路結(jié)構(gòu)上設(shè)有多個控制閥、循環(huán)閥以及分選柱，所述蠕動泵設(shè)置在所述管路結(jié)構(gòu)上，所述磁場施加單元用于對所述分選柱施加磁場以及用于將施加在所述分選柱上的磁場解除，所述蠕動泵、多個控制閥、循環(huán)閥以及磁場施加單元均與所述控制器電連接。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種磁性細(xì)胞分選方法、裝置及設(shè)備，該分選方法包括以下步驟：對管路結(jié)構(gòu)中的分選柱施加磁場，開啟管路結(jié)構(gòu)上位于樣品容器和陰選收集容器之間的控制閥，通過蠕動泵驅(qū)動樣品容器內(nèi)的細(xì)胞樣本朝陰選收集容器的方向流動，其中，細(xì)胞樣本中的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中，非目標(biāo)細(xì)胞隨著細(xì)胞樣本的流動進(jìn)入陰選收集容器；通過緩沖液對管路結(jié)構(gòu)進(jìn)行沖洗，令管路結(jié)構(gòu)中殘留的目標(biāo)細(xì)胞被吸附在分選柱中；開啟陽選收集容器所對應(yīng)的控制閥，對磁場解除后的分選柱進(jìn)行洗脫，通過蠕動泵將分選柱中的目標(biāo)細(xì)胞洗脫至陽選收集容器中。本發(fā)明提高了分選效率，降低了目標(biāo)細(xì)胞污染的風(fēng)險，保證了分選的目標(biāo)細(xì)胞的純度。

技術(shù)研發(fā)人員：郭霄亮,張金鑫,李海鴻,劉婷婷,吳東穎,關(guān)國堅,陳靜,商院芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳賽橋生物創(chuàng)新技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15