本文中提供了用于治療代謝相關(guān)疾病，諸如代謝相關(guān)脂肪肝疾病(mafld)的靶標(biāo)。還提供了用于治療所述疾病的藥劑和使用所述藥劑的方法。
背景技術(shù)：
1、在哺乳動(dòng)物中，95％的多外顯子基因經(jīng)歷一個(gè)或多個(gè)可變剪接(as)事件，產(chǎn)生多種亞型1,2，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄多樣性和復(fù)雜性3。已經(jīng)提出as對(duì)于建立和維持組織特異性蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)4-6和組織同一性6是至關(guān)重要的。相比之下，特異性as程序是否調(diào)節(jié)生理適應(yīng)尚不清楚，并且它們?cè)诖x疾病中的作用不明。這是因?yàn)樘囟▉喰偷墓δ鼙碚鞑患岩约吧婕霸隗w內(nèi)鑒定特定上游調(diào)節(jié)剪接因子的技術(shù)挑戰(zhàn)。因此，在剪接因子及它們調(diào)節(jié)的亞型的水平上，關(guān)于涉及代謝重編程的剪接網(wǎng)絡(luò)的信息有限。除了增加我們對(duì)健康和疾病中的代謝調(diào)節(jié)的了解之外，參與代謝調(diào)節(jié)的剪接因子和亞型的表征可導(dǎo)向增強(qiáng)或拮抗特定亞型的基于rna的治療劑的開發(fā)。使肝臟中的特定基因(例如apob或pcsk9)失活的基于rna的治療劑正在成為代謝病理學(xué)的有希望的治療策略7，8。然而，尚未探索剪接轉(zhuǎn)換rna治療劑的開發(fā)。
2、在全球肥胖率增加的同時(shí)，代謝相關(guān)的脂肪肝疾病(mafld)已成為最普遍的非傳染性肝臟病理，影響全世界高達(dá)25％的人口9。mafld的范圍從癥狀前肝脂肪變性(脂肪肝)到非酒精性脂肪性肝炎(nash)，其特征在于另外的炎癥、肝細(xì)胞損傷和纖維化，并且可進(jìn)展為肝功能衰竭、肝硬化和肝細(xì)胞癌(hcc)10。
3、雖然促進(jìn)從脂肪變性向nash的進(jìn)展的確切機(jī)制尚未完全了解，但有證據(jù)表明，慢性營養(yǎng)過剩和高熱量西式飲食起一定作用。這部分由于生物活性和/或毒性脂質(zhì)物類(諸如磷脂、飽和脂肪酸、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺和膽固醇)的失調(diào)11-13。此外，有證據(jù)表明mafld有助于2型糖尿病和心血管疾病的發(fā)病機(jī)制，其中冠狀動(dòng)脈疾病是這些患者的首要死因14,15。鑒于mafld有未滿足的臨床需求，因此有興趣了解將mafld與提高的心血管風(fēng)險(xiǎn)和進(jìn)行性肝損傷聯(lián)系起來的分子機(jī)制，以便鑒定新的治療靶標(biāo)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、在一方面，提供了能夠誘導(dǎo)b類i型清道夫受體(scarb1)的外顯子12的跳躍的藥劑。該藥劑可結(jié)合scarb1的前體mrna。例如，該藥劑可結(jié)合scarb1前體mrna內(nèi)影響外顯子12的剪接的位點(diǎn)。該藥劑可以是核酸類似物或核酸。該藥劑可以是反義寡聚物。
2、在一方面，提供了能夠誘導(dǎo)b類i型清道夫受體(scarb1)的外顯子12的跳躍的反義寡聚物。該反義寡聚物能夠誘導(dǎo)人scarb1的外顯子12的跳躍。該反義寡聚物的長度可以為10-45個(gè)核堿基、12-40個(gè)核堿基、15-35個(gè)核堿基、18-30個(gè)核堿基、或19-25個(gè)核堿基。
3、反義寡聚物可包含根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列，并且可包含5、4、3、2、1個(gè)或更少的取代、缺失或插入。反義寡聚物可包含根據(jù)seqid?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列，以及取代為能夠與相同類型的核堿基進(jìn)行堿基配對(duì)的經(jīng)修飾核堿基的一個(gè)或多個(gè)核堿基。反義寡聚物可包含根據(jù)seqid?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列。反義寡聚物可包含根據(jù)seqid?no：5、8、10、11、18或19中任一個(gè)的核堿基序列。反義寡聚物的核堿基序列可以為根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中的任一個(gè)。
4、反義寡聚物可包含至少一個(gè)2’-o-甲基核苷酸和/或至少一個(gè)2’-o-甲氧基乙基核苷酸。反義寡聚物可以是2’-o-甲基核酸寡聚物和/或2’-o-甲氧基乙基核酸寡聚物。反義寡聚物可包含至少一個(gè)硫代磷酸酯核苷酸間連接(internucleotide?linkage)。在一些實(shí)施方案中，反義寡聚物中的所有核苷酸間連接是硫代磷酸酯核苷酸間連接。
5、在一個(gè)實(shí)施方案中，反義寡聚物是寡核苷酸，并具有根據(jù)seq?id?no：5、8、10、11、18或19的核堿基序列，并且其中-o-ch3或-o-ch2-ch2-o-ch3附接至每個(gè)核苷酸的糖部分的2’位置。
6、本文提供了具有根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的序列的反義寡核苷酸，其中核苷酸間連接是硫代磷酸酯核苷酸間連接，并且其中-o-ch3或-o-ch2-ch2-o-ch3附接至每個(gè)核苷酸的糖部分的2’位置。
7、本文提供了包含如本文中公開的任何反義寡聚物或反義寡核苷酸的藥物組合物。
8、本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用作藥物。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防代謝相關(guān)疾病的方法中。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防肥胖癥和/或致肥胖飲食的病理效應(yīng)的方法中。病理效應(yīng)可以是肝臟炎癥、脂毒性、肝細(xì)胞損傷和/或纖維化。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防肝臟炎癥的方法中。肝臟炎癥可以是肥胖誘導(dǎo)的。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防代謝相關(guān)的脂肪肝疾病(mafld)的方法中。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防癥狀前肝脂肪變性的方法中。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防非酒精性脂肪性肝炎(nash)的方法中。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療或預(yù)防受試者的肝細(xì)胞癌(hcc)的方法中。該受試者可患有肝臟炎癥、癥狀前肝脂肪變性或nash。本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防膽結(jié)石疾病、2型糖尿病、心血管疾病和冠狀動(dòng)脈疾病中的任一種或其組合。
9、本文提供了如本文中公開的任何反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用在治療方法中，其中該方法包括在有需要的受試者中降低膽固醇水平。
10、本文提供了提高細(xì)胞中b類i型清道夫受體(scarb1)亞型sr-bii相對(duì)于亞型sr-bi的表達(dá)的任何方法，該方法包括使細(xì)胞與包含如本文中公開的反義寡聚物或反義寡核苷酸的組合物接觸。該方法可以是體內(nèi)的，并且可以將該組合物施用于有需要的受試者。
1.能夠誘導(dǎo)b類i型清道夫受體(scarb1)的外顯子12的跳躍的反義寡聚物。
2.權(quán)利要求1的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物能夠誘導(dǎo)人scarb1的外顯子12的跳躍。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物的長度為10-45個(gè)核堿基、12-40個(gè)核堿基、15-35個(gè)核堿基、18-30個(gè)核堿基、或19-25個(gè)核堿基。
4.權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列，并且包含5、4、3、2、1個(gè)或更少的取代、缺失或插入。
5.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列，并且一個(gè)或多個(gè)核堿基取代為能夠與相同類型的核堿基進(jìn)行堿基配對(duì)的經(jīng)修飾核堿基。
6.權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的核堿基序列。
7.權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含根據(jù)seq?id?no：5、8、10、11、18或19中任一個(gè)的核堿基序列。
8.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物的核堿基序列為根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)。
9.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物與根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的反義寡聚物與之互補(bǔ)的5、10、15、16、17、18、19、20個(gè)或所有堿基互補(bǔ)。
10.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物與sso8.18(seq?id?no：51)與之互補(bǔ)的5、10、15、16、17、18、19個(gè)或所有20個(gè)堿基互補(bǔ)。
11.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含至少一個(gè)2’-o-甲基核苷酸和/或至少一個(gè)2’-o-甲氧基乙基核苷酸。
12.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物是2’-o-甲基核酸寡聚物和/或2’-o-甲氧基乙基核酸寡聚物。
13.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物包含至少一個(gè)硫代磷酸酯核苷酸間連接。
14.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物中的所有核苷酸間連接均為硫代磷酸酯核苷酸間連接。
15.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物是寡核苷酸，并具有根據(jù)seq?id?no：5、8、10、11、18或19的核堿基序列，并且其中-o-ch3或-o-ch2-ch2-o-ch3附接至每個(gè)核苷酸的糖部分的2’位置。
16.具有根據(jù)seq?id?no：4、5、7、8、9、10、11、12、18或19中任一個(gè)的序列的反義寡核苷酸，其中核苷酸間連接是硫代磷酸酯核苷酸間連接，并且其中-o-ch3或-o-ch2-ch2-o-ch3附接至每個(gè)核苷酸的糖部分的2’位置。
17.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物是sso8.5(seq?id?no：38)、sso8.8(seq?id?no：41)、sso8.10(seq?id?no：43)、sso8.11(seq?id?no：44)、sso8.18(seqid?no：51)、sso8.19(seq?id?no：52)或sso8.21(seq?id?no：54)或包含其。
18.任何前述權(quán)利要求的反義寡聚物，其中所述反義寡聚物是sso8.18(seq?id?no：51)或包含其。
19.包含權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)的反義寡聚物或反義寡核苷酸的藥物組合物。
20.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用作藥物。
21.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防代謝相關(guān)疾病的方法中。
22.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防肥胖癥和/或致肥胖飲食的病理效應(yīng)的方法中。
23.用于權(quán)利要求22的使用的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其中所述病理效應(yīng)是肝臟炎癥、脂毒性、肝細(xì)胞損傷和/或纖維化。
24.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防肝臟炎癥的方法中。
25.用于權(quán)利要求24的使用的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其中所述肝臟炎癥是肥胖癥誘導(dǎo)的。
26.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防代謝相關(guān)的脂肪肝疾病(mafld)的方法中。
27.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防癥狀前肝脂肪變性的方法中。
28.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防非酒精性脂肪性肝炎(nash)的方法中。
29.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防受試者的肝細(xì)胞癌(hcc)的方法中。
30.用于權(quán)利要求29的使用的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其中所述受試者患有肝臟炎癥、癥狀前肝脂肪變性、或nash。
31.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療或預(yù)防膽結(jié)石疾病、2型糖尿病、心血管疾病和冠狀動(dòng)脈疾病中的任一種或其組合。
32.權(quán)利要求1至19任一項(xiàng)的反義寡聚物、反義寡核苷酸或藥物組合物，其用于治療方法中，其中所述方法包括在有需要的受試者中降低膽固醇水平。
33.提高細(xì)胞中b類i型清道夫受體(scarb1)亞型sr-bii相對(duì)于亞型sr-bi的表達(dá)的方法，所述方法包括使所述細(xì)胞與包含權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)的反義寡聚物或反義寡核苷酸的組合物接觸。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述方法是體內(nèi)的，并將所述組合物施用于有需要的受試者。