本公開總體上涉及與其野生型對應物(counterpart)相比具有增加的犬中的半衰期的多肽(例如，諸如多肽-fc區(qū)融合物等融合多肽；或諸如抗體或受體-fc融合物的配體結合部分等結合分子)。

背景技術：

1、抗體的fc區(qū)起到許多功能性作用，包括但不限于，保護抗體免于通過溶酶體途徑的降解和介導抗體效應器功能。隨著犬抗體作為治療劑的使用增加，不僅更加關注選擇最佳的fab，還關注將其與合適的fc組合以實現(xiàn)期望的半衰期和效應器功能。

2、本領域幾乎沒有涉及增加犬用多肽治療劑(例如，抗體)的半衰期的指導。本公開通過提供改善多肽(例如，抗體)在犬中的血清持久性的fc區(qū)變體來改進。

技術實現(xiàn)思路

1、本文提供了涉及有用于治療性多肽的犬ch2、ch3和fc序列的平臺技術。本公開的特征在于具有比對照多肽(例如，野生型對應物igg犬fc區(qū))增加的與犬fcrn的結合的多肽。在一些情況中，這些多肽在任何ph下(例如，在約5.0至約8.0之間的任何ph下)具有比對照多肽增加的與犬fcrn的結合。在一些情況中，這些多肽在ph?5.5和/或ph?6.5下具有比對照多肽增加的與犬fcrn的結合。在一些情況中，這些多肽可以，例如在酸性ph(例如，ph?5.5或ph?6.5)下比在中性ph(例如，ph?7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、或7.5)下以更高水平結合至犬fcrn。在一些情況中，這些多肽在ph?5.5下比在ph?7.4下以更高水平結合至犬fcrn。本公開部分地涉及具有比其野生型對應物增加的犬中的半衰期的多肽。例如，提供了相對于這些結合分子未連接至本文所公開的fc區(qū)(例如，ch2、ch3、或ch2+ch3區(qū))的形式，具有增加的半衰期的結合分子(例如，抗體或受體的配體結合部分)。還提供了酶-fc區(qū)融合物、配體-fc區(qū)融合物、和肽-fc區(qū)融合物，其中所述融合物與其野生型對應物相比具有增加的半衰期。除了具有增加半衰期的一種或多種取代(相對于野生型犬fc區(qū))以外，fc區(qū)還可包括例如增加效應器功能、減少效應器功能、和/或減少多肽的異質性(heterogeneity)(例如，通過去除fc區(qū)中的一種或多種翻譯后修飾)等其它取代。犬ch2、ch3、和fc區(qū)序列可來自任何犬抗體。在一些情況中，犬ch2、ch3、和fc區(qū)序列來自犬igg(例如，igg.a、igg.b、igg.c、或igg.d)。

2、本公開的特征在于重組蛋白，其包含(1)結合結構域、或其片段，其特異性結合至配體、或蛋白的表位，其中所述結合結構域連接至(2)含有本文所公開的ch2區(qū)、ch3區(qū)、或fc區(qū)(ch2+ch3區(qū))的結構域。在一些情況中，結合結構域包括(i)犬或人/人源化抗體的六個互補決定區(qū)(cdr)；(ii)犬、犬源化、人源化、或人抗體的vh和/或vl；(iii)納米抗體；(iv)scfv；(v)fab；或(vi)結合配體的可溶性受體-結合結構域、或其配體結合片段。

3、本公開還提供組合物，其包含：(1)第一多肽，其包括含有本文所描述的犬igg?fc區(qū)變體的第一fc區(qū)(例如，ch2區(qū)、ch3區(qū)、ch2+ch3區(qū))；和(2)第二多肽，其包括含有本文所描述的犬igg?fc區(qū)變體的第二fc區(qū)。第一和第二多肽可通過第一和第二fc區(qū)相關聯(lián)。在一些情況中，第一和第二fc區(qū)的氨基酸序列相同。在其它情況中，第一和第二fc區(qū)的氨基酸序列不同(例如，不同于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、或25個氨基酸)。在一些情況中，fc區(qū)變體是犬igg.b抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，fc區(qū)變體是犬igg.a抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，fc區(qū)變體是犬igg.c抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，fc區(qū)變體是犬igg.d抗體fc區(qū)的變體。

4、還公開了包含本文所公開的犬igg?fc區(qū)變體和多肽的融合分子。在一些實施方案中，犬igg?fc區(qū)變體共價連接至多肽(例如，通過鉸鏈區(qū)或連接子)。在一些情況中，多肽是犬受體蛋白的配體結合結構域、犬受體蛋白的胞外結構域、或抗原結合結構域。在一些情況中，多肽選自犬il-13rα1、或il-13rα2、犬epo、犬ctla4、犬lfa3、犬vegfr1/vegfr3、犬il-1r、犬glp-1受體激動劑、和犬血小板生成素結合肽的配體結合結構域或胞外結構域。在一些情況中，多肽為scfv、納米抗體、或單結構域抗體。在一些情況中，igg?fc區(qū)變體是犬igg.b抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，igg?fc區(qū)變體是犬igg.a抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，igg?fc區(qū)變體是犬igg.c抗體fc區(qū)的變體。在一些情況中，igg?fc區(qū)變體是犬igg.d抗體fc區(qū)的變體。

5、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch2區(qū)變體的一種或多種多肽，所述ch2區(qū)變體包含與seq?id?no:1中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

6、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

7、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

8、氨基酸位置252處的除arg以外的氨基酸、

9、氨基酸位置254處的除thr以外的氨基酸、

10、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

11、氨基酸位置285處的除his以外的氨基酸、

12、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

13、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

14、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

15、氨基酸位置309處的除glu以外的氨基酸、

16、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、或

17、氨基酸位置315處的除thr以外的氨基酸。

18、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch2區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch2區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

19、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:1中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

20、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch2區(qū)變體的一種或多種多肽，所述ch2區(qū)變體包含與seq?id?no:2中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

21、氨基酸位置250處的除thr以外的氨基酸、

22、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

23、氨基酸位置252處的除leu以外的氨基酸、

24、氨基酸位置254處的除ala以外的氨基酸、

25、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

26、氨基酸位置285處的除gln以外的氨基酸、

27、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

28、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

29、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

30、氨基酸位置309處的除gly以外的氨基酸、

31、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、或

32、氨基酸位置315處的除lys以外的氨基酸。

33、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch2區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch2區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

34、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:2中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

35、在一方面，本公開還提供包含犬igg?fc?ch2區(qū)變體的一種或多種多肽，所述ch2區(qū)變體包含與seq?id?no:3中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

36、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

37、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

38、氨基酸位置252處的除val以外的氨基酸、

39、氨基酸位置254處的除ala以外的氨基酸、

40、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

41、氨基酸位置285處的除gln以外的氨基酸、

42、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

43、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

44、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

45、氨基酸位置309處的除gly以外的氨基酸、

46、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、或

47、氨基酸位置315處的除ser以外的氨基酸。

48、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch2區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch2區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同。

49、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:3中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

50、在一方面，本公開涉及包含犬igg?fc?ch2區(qū)變體的一種或多種多肽，所述ch2區(qū)變體包含與seq?id?no:4中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

51、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

52、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

53、氨基酸位置252處的除arg以外的氨基酸、

54、氨基酸位置254處的除thr以外的氨基酸、

55、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

56、氨基酸位置285處的除his以外的氨基酸、

57、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

58、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

59、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

60、氨基酸位置309處的除glu以外的氨基酸、

61、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、或

62、氨基酸位置315處的除thr以外的氨基酸。

63、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch2區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch2區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

64、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:4中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

65、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含以下的至少一者：

66、氨基酸位置250處的glu或gln、

67、氨基酸位置251處的asp或glu、

68、氨基酸位置252處的tyr、

69、氨基酸位置254處的thr、

70、氨基酸位置256處的asp、glu、或phe、

71、氨基酸位置285處的asn或asp、

72、氨基酸位置286處的asp、

73、氨基酸位置307處的arg、gln、或ala、

74、氨基酸位置308處的pro、

75、氨基酸位置309處的pro、

76、氨基酸位置311處的val、或

77、氨基酸位置315處的asp。

78、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含以下的至少一者：

79、氨基酸位置252處的tyr或met、

80、氨基酸位置254處的thr、或

81、氨基酸位置256處的glu。

82、在一些實施方案中，所述犬igg?fc?ch2區(qū)變體包含以下的至少一者：

83、(i)氨基酸位置252處的tyr、氨基酸位置254處的thr、和氨基酸位置256處的glu；

84、(ii)氨基酸位置428處的leu和氨基酸位置434處的ser；

85、(iii)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置307處的arg、和氨基酸位置311處的val；

86、(iv)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置315處的asp、和氨基酸位置378處的val；

87、(v)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置286處的asp、氨基酸位置307處的arg、和氨基酸位置311處的val；

88、(vi)氨基酸位置285處的asn、氨基酸位置307處的gln、和氨基酸位置315處的asp；或

89、(vii)氨基酸位置251處的asp、和氨基酸位置309處的pro。

90、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch3區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬iggfc?ch3區(qū)變體包含與seq?id?no:5中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

91、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

92、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

93、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

94、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

95、氨基酸位置433處的除gln以外的氨基酸、

96、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

97、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

98、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

99、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch3區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch3區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

100、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:5中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

101、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch3區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬iggfc?ch3區(qū)變體包含與seq?id?no:6中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

102、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

103、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

104、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

105、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

106、氨基酸位置433處的除his以外的氨基酸、

107、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

108、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

109、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

110、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch3區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch3區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

111、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:6中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

112、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch3區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬iggfc?ch3區(qū)變體包含與seq?id?no:7中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

113、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

114、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

115、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

116、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

117、氨基酸位置433處的除his以外的氨基酸、

118、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

119、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

120、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

121、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch3區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch3區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同。

122、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:7中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

123、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc?ch3區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬iggfc?ch3區(qū)變體包含與seq?id?no:8中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

124、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

125、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

126、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

127、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

128、氨基酸位置433處的除gln以外的氨基酸、

129、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

130、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

131、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

132、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc?ch3區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc?ch3區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比一種或多種對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

133、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:8中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

134、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含以下的至少一者：

135、氨基酸位置378處的val、

136、氨基酸位置380處的ala、

137、氨基酸位置428處的leu、

138、氨基酸位置430處的ala或lys、

139、氨基酸位置433處的lys、

140、氨基酸位置434處的ser、ala、或phe、

141、氨基酸位置435處的try、

142、氨基酸位置436處的his。

143、在一些實施方案中，所述犬igg?fc?ch3區(qū)變體包含：

144、(i)氨基酸位置428處的leu、和氨基酸位置434處的ser；

145、(ii)氨基酸位置428處的leu、和氨基酸位置434處的ala；

146、(iii)氨基酸位置430處的lys、和氨基酸位置433處的lys；或

147、(iv)氨基酸位置435處的tyr、和氨基酸位置436處的his。

148、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含氨基酸位置434處的tyr、trp、arg、或his。

149、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬igg?fc區(qū)變體包含與seq?id?no:9中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

150、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

151、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

152、氨基酸位置252處的除arg以外的氨基酸、

153、氨基酸位置254處的除thr以外的氨基酸、

154、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

155、氨基酸位置285處的除his以外的氨基酸、

156、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

157、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

158、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

159、氨基酸位置309處的除glu以外的氨基酸、

160、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、

161、氨基酸位置315處的除thr以外的氨基酸、

162、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

163、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

164、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

165、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

166、氨基酸位置433處的除gln以外的氨基酸、

167、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

168、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

169、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

170、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

171、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:9中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

172、在一方面，本公開還提供包含犬igg?fc區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬igg?fc區(qū)變體包含與seq?id?no:10中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

173、氨基酸位置250處的除thr以外的氨基酸、

174、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

175、氨基酸位置252處的除leu以外的氨基酸、

176、氨基酸位置254處的除ala以外的氨基酸、

177、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

178、氨基酸位置285處的除gln以外的氨基酸、

179、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

180、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

181、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

182、氨基酸位置309處的除gly以外的氨基酸、

183、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、

184、氨基酸位置315處的除lys以外的氨基酸、

185、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

186、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

187、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

188、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

189、氨基酸位置433處的除his以外的氨基酸、

190、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

191、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

192、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

193、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

194、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:10中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

195、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬igg?fc區(qū)變體包含與seq?id?no:11中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

196、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

197、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

198、氨基酸位置252處的除val以外的氨基酸、

199、氨基酸位置254處的除ala以外的氨基酸、

200、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

201、氨基酸位置285處的除gln以外的氨基酸、

202、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

203、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

204、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

205、氨基酸位置309處的除gly以外的氨基酸、

206、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、

207、氨基酸位置315處的除ser以外的氨基酸、

208、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

209、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

210、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

211、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

212、氨基酸位置433處的除his以外的氨基酸、

213、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

214、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

215、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

216、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同。

217、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:11中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

218、在一方面，本公開提供包含犬igg?fc區(qū)變體的一種或多種多肽，所述犬igg?fc區(qū)變體包含與seq?id?no:12中記載的序列具有至少75％同一性且包含以下的至少一者的氨基酸序列：

219、氨基酸位置250處的除ile以外的氨基酸、

220、氨基酸位置251處的除leu以外的氨基酸、

221、氨基酸位置252處的除arg以外的氨基酸、

222、氨基酸位置254處的除thr以外的氨基酸、

223、氨基酸位置256處的除thr以外的氨基酸、

224、氨基酸位置285處的除his以外的氨基酸、

225、氨基酸位置286處的除thr以外的氨基酸、

226、氨基酸位置307處的除pro以外的氨基酸、

227、氨基酸位置308處的除ile以外的氨基酸、

228、氨基酸位置309處的除glu以外的氨基酸、

229、氨基酸位置311處的除gln以外的氨基酸、

230、氨基酸位置315處的除thr以外的氨基酸、

231、氨基酸位置378處的除asp以外的氨基酸、

232、氨基酸位置380處的除glu以外的氨基酸、

233、氨基酸位置428處的除met以外的氨基酸、

234、氨基酸位置430處的除glu以外的氨基酸、

235、氨基酸位置433處的除gln以外的氨基酸、

236、氨基酸位置434處的除asn以外的氨基酸、

237、氨基酸位置435處的除his以外的氨基酸、或

238、氨基酸位置436處的除tyr以外的氨基酸。

239、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽具有：(1)比一種或多種對照多肽增加的犬中的半衰期，其中所述一種或多種對照多肽除了具有代替igg?fc區(qū)變體的相應的野生型犬igg?fc區(qū)以外，與所述一種或多種多肽相同；和/或(2)比對照多肽增加的與犬fcrn的結合；和其中所述氨基酸位置基于eu編號。

240、在一些實施方案中，所述氨基酸序列與seq?id?no:12中記載的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％同一性。

241、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含以下的至少一者：

242、氨基酸位置250處的glu或gln、

243、氨基酸位置251處的asp或glu、

244、氨基酸位置252處的tyr、

245、氨基酸位置254處的thr、

246、氨基酸位置256處的asp、glu、或phe、

247、氨基酸位置285處的asn或asp、

248、氨基酸位置286處的asp、

249、氨基酸位置307處的arg、gln、或ala、

250、氨基酸位置308處的pro、

251、氨基酸位置309處的pro、

252、氨基酸位置311處的val、

253、氨基酸位置315處的asp、

254、氨基酸位置378處的val、

255、氨基酸位置380處的ala、

256、氨基酸位置428處的leu、

257、氨基酸位置430處的ala或lys、

258、氨基酸位置433處的lys、

259、氨基酸位置434處的ser、ala、或phe、

260、氨基酸位置435處的try、或

261、氨基酸位置436處的his。

262、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽包含以下的至少一者：

263、氨基酸位置252處的tyr或met、

264、氨基酸位置254處的thr、

265、氨基酸位置256處的glu、或

266、氨基酸位置434處的tyr、trp、arg、或his。

267、在一些實施方案中，犬igg?fc區(qū)變體包含以下的至少一者：

268、(i)氨基酸位置252處的tyr、氨基酸位置254處的thr、和氨基酸位置256處的glu；

269、(ii)氨基酸位置428處的leu和氨基酸位置434處的ser；

270、(iii)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置307處的arg、和氨基酸位置311處的val；

271、(iv)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置315處的asp、和氨基酸位置378處的val；

272、(v)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置286處的asp、氨基酸位置307處的arg、和氨基酸位置311處的val；

273、(vi)氨基酸位置285處的asn、氨基酸位置307處的gln、和氨基酸位置315處的asp；

274、(vii)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置307處的arg、氨基酸位置311處的val、和氨基酸位置378處的val；

275、(viii)氨基酸位置285處的asp、氨基酸位置311處的val、和氨基酸位置378處的val；

276、(ix)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置285處的asp、和氨基酸位置378處的val；

277、(x)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置311處的val、和氨基酸位置378處的val；

278、(xi)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置285處的asp、氨基酸位置286處的asp、氨基酸位置307處的arg、和氨基酸位置378處的val；

279、(xii)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置286處的asp、氨基酸位置307處的arg、氨基酸位置311處的val、和位置378處的val；

280、(xiii)氨基酸位置307處的gln、氨基酸位置311處的val、和氨基酸位置378處的val；

281、(xiv)氨基酸位置285處的asp、氨基酸位置307處的gln、和氨基酸位置378處的val；

282、(xv)氨基酸位置256處的asp、氨基酸位置285處的asp、氨基酸位置307處的arg、氨基酸位置311處的val、和氨基酸位置378處的val；

283、(xvi)氨基酸位置307處的gln、氨基酸位置380處的ala、氨基酸位置434處的ser或ala；

284、(xvii)氨基酸位置428處的leu、和氨基酸位置434處的ser或ala；或

285、(xviii)氨基酸位置250處的gln和氨基酸位置428處的leu。

286、在一些實施方案中，所述一種或多種多肽是一種或多種抗原結合結構域。

287、在一些實施方案中，所述一種或多種抗原結合結構域結合至選自由以下組成的組的抗原：ngf、trka、adamts、il-1、il-2、il-4、il-4r、血管緊張素1型(at1)受體、血管緊張素2型(at2)受體、il-5、il-12、il-13、il-31、il-33、tnf-α、ige、pd-1、pd-1配體、cd3、cd20、cd47、cd52、ox40、ox40配體、ctla4、vegf、egfr、nav?1.7、和補體系統(tǒng)復合物(例如，c1復合物、c2復合物、c3復合物、c4復合物、c5復合物、c6復合物、c7復合物、c8復合物、c9復合物)。

288、在一些實施方案中，所述一種或多種抗原結合結構域為scfv、scfab、或納米抗體。

289、在一些實施方案中，本文所描述的一種或多種多肽還包括蛋白。在一些實施方案中，所述蛋白選自由以下組成的組：epo、ctla4、lfa3、vegfr1/vegfr3、il-1r、il-4r、glp-1受體激動劑、和血小板生成素結合肽。

290、在一方面，本公開提供了藥物組合物，其包含(i)本文所描述的一種或多種多肽，和(ii)藥學上可接受的賦形劑。

291、在一方面，本公開提供了編碼本文所描述的一種或多種多肽的一種或多種核酸。

292、在一方面，本公開提供了包含本文所描述的一種或多種核酸的一種或多種表達載體。

293、在一方面，本公開提供了包含本文所描述的一種或多種核酸或本文所描述的一種或多種表達載體的宿主細胞。

294、在一方面，本公開提供了制備一種或多種多肽的方法，所述方法包括

295、(a)提供本文所描述的一種或多種核酸；

296、(b)在宿主細胞培養(yǎng)物中表達所述一種或多種核酸，從而產(chǎn)生所述一種或多種多肽；和

297、(c)從宿主細胞培養(yǎng)物收集(b)中產(chǎn)生的所述一種或多種多肽。

298、在一些實施方案中，所述方法還包括將所述一種或多種多肽配制成藥物制劑。

299、在一方面，本公開提供了治療有需要的犬中的犬疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述犬施用有效量的包括本文所描述的藥物組合物的組合物。

300、在一方面，本公開提供了預防有需要的犬中的犬疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述犬施用有效量的包括本文所描述的藥物組合物的組合物。

301、在一些實施方案中，所述疾病或病癥為過敏性疾病、慢性痛、急性痛、炎性疾病、自身免疫性疾病、內分泌疾病、胃腸疾病、心血管疾病、腎臟疾病、生育相關病癥、傳染病或癌癥。

302、在一些實施方案中，所述疾病或病癥為異位性皮膚炎、過敏性皮膚炎、骨關節(jié)炎痛、關節(jié)炎、貧血、或肥胖。

303、除非另外指出，否則本文所使用的所有技術和科學術語具有與本發(fā)明所屬技術領域普通技術人員通常所理解的相同的含義。盡管在本發(fā)明的實踐或試驗中可使用與本文所描述的那些類似或等同的方法和材料，以下描述示例性方法和材料。本文提及的所有出版物、專利申請、專利、和其它參考文獻以其整體引用結合在此。在沖突的情況下，本技術，包括定義，將占主導。材料、方法、和實例僅為說明性的，而不旨在進行限制。

304、本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將從以下詳細描述和從權利要求書中顯而易見。