本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體而言，涉及一種用于抑制prdx1o-glcnac修飾的短肽及其應用。

背景技術(shù)：

1、非小細胞肺癌(nsclc)是全球癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一，放療是其主要治療手段之一。然而，腫瘤細胞對放療的抵抗性嚴重限制了放療的效果。因此，抑制prdx1的o-glcnac修飾成為增強放療敏感性的潛在策略。

2、現(xiàn)有技術(shù)中，主要通過小分子抑制劑來抑制o-glcnac修飾的關(guān)鍵酶ogt，從而廣泛抑制細胞內(nèi)的糖基化過程。然而，這種策略存在以下不足之處：

3、首先就是非特異性抑制帶來的副作用，ogt抑制劑由于廣泛抑制細胞糖基化，可能導致多種不良副作用，包括影響正常細胞的功能和代謝，甚至引發(fā)系統(tǒng)性毒性。其次治療效果有限非特異性抑制可能無法有效針對特定的病理過程，如prdx1的o-glcnac修飾，導致治療效果有限，無法充分增強腫瘤細胞對放療的敏感性。而且小分子抑制劑在細胞內(nèi)的遞送效率和特異性方面存在挑戰(zhàn)，可能無法有效到達作用靶點，從而影響治療效果?，F(xiàn)有技術(shù)缺乏對prdx1?o-glcnac修飾的精準調(diào)控手段，無法實現(xiàn)特異性、高效的靶向治療。因此我們對此做出改進，提出一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽及其應用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于：針對目前存在的背景技術(shù)提出的問題。為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案：一種序列為

2、fitc-ygrkkrrqrrr-mssgnakighpapn(cpp-g1)的短肽，其中mssgnakighpapn為prdx1蛋白前14位原始氨基酸序列，能夠發(fā)生o糖基化修飾。其中fitc為熒光標記物，用于指示短肽的細胞攝??；ygrkkrrqrrr(cpp)為細胞穿透肽段，用于促進短肽進入細胞；cpp穿透細胞膜的肽段ygrkkrrqrrr。

3、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，還包括另一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽，短肽的序列為fitc-ygrkkrrqrrr-maagnakighpapn(cpp-sa)，其中fitc為熒光標記物，用于指示短肽的細胞攝??；ygrkkrrqrrr(cpp)為細胞穿透肽段，用于促進短肽進入細胞；cpp穿透細胞膜的肽段ygrkkrrqrrr，maagnakighpapn為prdx1蛋白前14位氨基酸序列中第2位和第3位的絲氨酸(s)突變?yōu)楸彼?a)后的序列，用于模擬prdx1蛋白但不能發(fā)生o-glcnac糖基化修飾，作為陰性對照。

4、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，短肽在制備用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的藥物中的應用。

5、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，包含短肽以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。

6、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽的藥物組合物在制備用于治療由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的藥物中的應用。

7、一種用于檢測prdx1?o-glcnac修飾狀態(tài)的方法，包括以下步驟：

8、步驟一、將權(quán)利要求1所述的短肽(cpp-g1)或權(quán)利要求2所述的短肽(cpp-sa)引入待測細胞或組織中；

9、步驟二、檢測熒光信號以確認短肽是否成功進入細胞；

10、步驟三、通過比較與o糖基轉(zhuǎn)移酶的結(jié)合情況或o-glcnac修飾水平的變化，評估prdx1的o-glcnac修飾狀態(tài)。

11、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，針對prdx1的o-glcnac修飾位點的競爭性結(jié)合短肽在增強非小細胞肺癌的放療敏感性中的應用。

12、一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的方法，使用短肽與待處理的細胞或組織接觸，從而抑制prdx1的o-glcnac修飾。

13、作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的方法在制備用于治療由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的治療方案中的應用。

14、一種用于靶向由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的試劑，包含短肽，以及用于實施的試劑。

15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

16、1.特異性抑制，減少副作用：通過設計含有prdx1上s1/2位點的短肽，實現(xiàn)了對原本結(jié)合prdx1的ogt的競爭性結(jié)合，從而抑制該位點的o-glcnac修飾，而不干擾細胞整體的糖基化過程。相比ogt的小分子抑制劑，這種策略顯著降低了因廣泛抑制糖基化而導致的不良副作用風險。

17、2.增強放療敏感性：短肽能夠下調(diào)prdx1表達，從而增加非小細胞肺癌(nsclc)細胞對放療的敏感性。這一特性為nsclc的放療提供了新的增敏策略，有望提高放療效果，減少放療劑量，進而降低放療帶來的副作用。

18、3.高效遞送與細胞內(nèi)定位：利用細胞穿透肽(cpp)將短肽序列有效遞送到細胞內(nèi)。熒光標記fitc的應用使得短肽的細胞內(nèi)定位可視化，便于實時監(jiān)測短肽的遞送效率和分布情況。這種遞送系統(tǒng)確保了短肽在細胞內(nèi)的有效濃度，從而增強了其生物活性。

19、4.劑量依賴性效應：不同濃度的cpp-g1肽處理對prdx1?o-glcnac化和表達呈現(xiàn)劑量依賴性減少，這種可控的調(diào)節(jié)方式為臨床應用提供了靈活的劑量調(diào)整空間，有助于優(yōu)化治療效果并減少潛在毒性。

20、5.特異性與準確性：選擇prdx1前14位氨基酸序列作為短肽設計的基礎(chǔ)，既保證了短肽能夠模擬prdx1與糖基轉(zhuǎn)移酶的結(jié)合，又通過較短的長度提高了細胞膜穿透效率和特異性，減少了非特異性結(jié)合，從而提高了治療的準確性和有效性。

21、6.陰性對照驗證：通過設計s2/3位點突變?yōu)閍的cpp-sa短肽作為陰性對照，進一步驗證了cpp-g1短肽的特異性作用機制，增強了實驗結(jié)果的可靠性和說服力。

22、7.體內(nèi)實驗驗證安全性與有效性：在balb/c裸鼠模型中進行的體內(nèi)實驗顯示，瘤內(nèi)注射cpp-短肽后，小鼠對短肽具有良好的耐受性，未引起明顯的毒性或致死性副作用。同時，短肽聯(lián)合放療顯著抑制了腫瘤生長，證明了該治療方案的安全性和有效性，為臨床應用提供了有力的實驗依據(jù)。

23、8.潛在的臨床應用價值：該技術(shù)方案為nsclc的放療增敏提供了新的治療策略，具有潛在的臨床應用價值。通過特異性抑制prdx1的o-glcnac修飾，結(jié)合放療，有望提高nsclc患者的治療效果，提高生活質(zhì)量。

技術(shù)特征：

1.一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽，其特征在于，短肽的序列為fitc-ygrkkrrqrrr-mssgnakighpapn(cpp-g1)的短肽，其中mssgnakighpapn為prdx1蛋白前14位原始氨基酸序列，能夠發(fā)生o糖基化修飾；其中fitc為熒光標記物，用于指示短肽的細胞攝?。粂grkkrrqrrr(cpp)為細胞穿透肽段，用于促進短肽進入細胞；cpp穿透細胞膜的肽段ygrkkrrqrrr。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽，其特征在于，還包括另一種短肽序列fitc-ygrkkrrqrrr-maagnakighpapn(cpp-sa)，maagnakighpapn為prdx1蛋白前14位氨基酸序列中第2位和第3位的絲氨酸(s)突變?yōu)楸彼?a)后的序列，用于模擬prdx1蛋白但不能發(fā)生o-glcnac糖基化修飾；作為陰性對照。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的短肽在制備用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的藥物中的應用。

4.一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽的藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1或2所述的短肽以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的短肽的藥物組合物在制備用于治療由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的藥物中的應用。

6.一種用于檢測prdx1?o-glcnac修飾狀態(tài)的方法，其特征在于，包括以下步驟：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于針對prdx1的o-glcnac修飾位點的競爭性結(jié)合短肽在增強非小細胞肺癌的放療敏感性中的應用。

8.一種用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的方法，其特征在于，使用權(quán)利要求1或2所述的短肽與待處理的細胞或組織接觸，從而抑制prdx1的o-glcnac修飾。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于抑制prdx1?o-glcnac修飾的方法在制備用于治療由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的治療方案中的應用。

10.一種用于靶向由prdx1?o-glcnac修飾異常引起的疾病的試劑，包含權(quán)利要求1或2所述的短肽，以及用于實施的試劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種用于抑制PRDX1O?GlcNAc修飾的短肽及其應用，通過化學合成含有細胞穿透肽(CPP)、熒光標記FITC及PRDX1前14位氨基酸的短肽(CPP?G1)，并構(gòu)建S2/3位點突變的對照肽(CPP?SA)。實驗顯示，CPP?G1能有效進入非小細胞肺癌A549細胞，并通過競爭性結(jié)合O?GlcNAc修飾位點，下調(diào)PRDX1表達，增強細胞對放療的敏感性。體內(nèi)實驗進一步證實，瘤內(nèi)注射CPP?G1短肽聯(lián)合放療顯著抑制腫瘤生長，且小鼠對該短肽具有良好的耐受性，未出現(xiàn)明顯副作用。為NSCLC的放療增敏提供了新的潛在治療途徑。

技術(shù)研發(fā)人員：張然,劉峰,陳大衛(wèi)
受保護的技術(shù)使用者：山東第一醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院（山東省腫瘤防治研究院、山東省腫瘤醫(yī)院）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15