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一種基于微滴式數(shù)字PCR的DNA降解程度的檢測(cè)引物組合及其應(yīng)用

文檔序號(hào):41984838發(fā)布日期:2025-05-23 16:41閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種dna降解程度的檢測(cè)引物組合,其特征在于,所述檢測(cè)引物組合包括檢測(cè)235bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針,檢測(cè)145bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針,檢測(cè)75bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針;

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)引物組合,其特征在于,所述檢測(cè)235bp靶標(biāo)的探針帶有紫色cy5熒光標(biāo)記;所述檢測(cè)145bp靶標(biāo)的探針帶有藍(lán)色fam熒光標(biāo)記;所述檢測(cè)75bp靶標(biāo)的探針帶有綠色vic熒光標(biāo)記。

3.權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物組合在制備評(píng)估dna降解程度的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述產(chǎn)品包括試劑或試劑盒。

5.一種評(píng)估dna降解程度的微滴式數(shù)字pcr試劑盒,其特征在于,包含權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物組合。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微滴式數(shù)字pcr試劑盒,其特征在于,所述微滴式數(shù)字pcr試劑盒中還包含復(fù)合擴(kuò)增反應(yīng)混合液。

7.權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物組合或權(quán)利要求5或6所述的微滴式數(shù)字pcr試劑盒在評(píng)估dna降解程度中的應(yīng)用。

8.一種評(píng)估dna降解程度的方法,其特征在于,包括如下步驟:

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述微滴式數(shù)字pcr的反應(yīng)體系為:復(fù)合擴(kuò)增反應(yīng)混合液10.0μl,檢測(cè)235bp靶標(biāo)的引物混合物0.9μl,檢測(cè)145bp靶標(biāo)的引物混合物0.9μl,檢測(cè)75bp靶標(biāo)的引物混合物0.9μl,檢測(cè)235bp靶標(biāo)的探針0.5μl,檢測(cè)145bp靶標(biāo)的探針0.5μl,檢測(cè)75bp靶標(biāo)的探針0.5μl,模板dna?1.0μl,去離子水補(bǔ)至20μl;

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述檢測(cè)235bp靶標(biāo)的引物混合物中正向引物和反向引物的濃度均為20μm/l;


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種基于微滴式數(shù)字PCR的DNA降解程度的檢測(cè)引物組合及其應(yīng)用,屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。所述檢測(cè)引物組合包括檢測(cè)235bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針,檢測(cè)145bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針,檢測(cè)75bp靶標(biāo)的引物對(duì)及探針。本發(fā)明利用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)大、中、小三種不同長(zhǎng)度的靶標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),利用三種靶標(biāo)的數(shù)量,能夠準(zhǔn)確評(píng)估DNA降解程度,幫助確定后續(xù)STR分型方法,為法醫(yī)學(xué)高度降解檢材的評(píng)估及檢測(cè)提供了一種新的簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)、快速有效的技術(shù)手段。

技術(shù)研發(fā)人員:李介男,符肖益,王岳鵬,蔡繼峰
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中南大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/5/22
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