本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種白頭翁囊泡及其制備方法和在腸道炎癥中的應用。

背景技術：

1、炎癥性腸病（ibd）是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，臨床上，ibd表現(xiàn)出多種臨床癥狀，包括腹部不適、腹瀉、血便、發(fā)燒、疲勞和體重減輕等等，除了上述經常報道的癥狀外，ibd患者還經常表現(xiàn)出腸外并發(fā)癥，可能涉及皮膚?。ńY節(jié)性紅斑和壞疽性膿皮?。?、眼部疾?。ńY膜炎、葡萄膜炎）、風濕性疾病（強直性脊柱炎和外周關節(jié)炎）、肝膽疾病（原發(fā)性硬化膽管炎）和泌尿系統(tǒng)疾?。I結石）等等。

2、ibd主要包括潰瘍性結腸炎（uc）和克羅恩?。╟d），二者具有相同的臨床過程，差異僅限于發(fā)炎病變的部位和性質不同。其中，uc的特征為結腸粘膜彌漫性炎癥，病程呈反復緩解期。目前迫切需要開發(fā)更好的uc治療藥物，特別是能在發(fā)炎結腸局部發(fā)揮作用，且無全身暴露和相關副作用的藥物，對uc結腸炎的治療具有重要意義。

3、細胞外囊泡是指細胞主動分泌的具有膜結構的微小囊泡的統(tǒng)稱，根據大小、生物特性和形成過程不同主要分為外泌體（exosome）、微囊泡（microvesicles）和凋亡小體（apoptoticbodies）三大類。細胞外囊泡具有典型的脂質雙分子層結構，攜帶蛋白質、脂類、rna等多種物質，在細胞通訊、細胞遷移、癌癥疾病發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。

4、白頭翁（ pulsatilla?chinensis（bunge）?regel）對細菌脂多糖的白頭翁刺激巨噬細胞分泌il-6具有明顯的抑制作用，并隨著時間的推移而增強，從而減少過度的炎癥反應和全身損傷；白頭翁及其復合物抑制皮膚真菌、酵母、錐體、白色念珠菌；白頭翁新鮮汁、炸劑對金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌敏感性最高；對痢疾、傷寒細菌也有很好的抑制作用。

5、目前尚未有白頭翁類細胞外囊泡的研究，因此，開發(fā)白頭翁類細胞外囊泡對治療炎癥性腸病是非常有必要的。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對現(xiàn)有技術存在的問題，提供了一種白頭翁囊泡及其制備方法和在腸道炎癥中的應用。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案如下：

3、一種白頭翁囊泡的制備方法，包括如下步驟：

4、（1）先將白頭翁鮮品加水榨汁，過濾，收集濾液；

5、（2）再將濾液離心，收集上清液；

6、（3）最后將上清液離心，收集沉淀，以pbs混懸沉淀，干燥，即得，

7、其中，步驟（2）中所述離心依次為150?×g-250?×g離心10?min-20?min，3500?×g-4500?×g離心15?min-25?min，

8、步驟（3）中所述離心依次為10000?×g-14000?×g離心35?min-45?min，80000?×g-120000?×g離心65?min-75?min。

9、優(yōu)選地，所述白頭翁鮮品和水的質量體積比為150?g-240?g:800?ml-1500?ml。

10、優(yōu)選地，步驟（1）中所述榨汁的次數(shù)為2次-4次。

11、優(yōu)選地，步驟（2）和（3）中離心的溫度均為3.5℃-4.5℃。

12、優(yōu)選地，步驟（3）中所述沉淀與pbs的質量體積比為0.3?g-0.5?g:8?ml-12?ml。

13、優(yōu)選地，步驟（3）中所述干燥的溫度為-80℃~-90℃，干燥的時間為10?h-14?h。

14、本發(fā)明還提供了上述制備方法制備得到的白頭翁囊泡。

15、優(yōu)選地，所述白頭翁囊泡的粒徑為180?nm-190?nm，白頭翁囊泡的分子量為52kda-105k?da。

16、本發(fā)明還提供了上述白頭翁囊泡在制備治療腸道炎癥藥物中的應用。

17、優(yōu)選地，所述藥物還包括藥學上可接受的輔料。

18、優(yōu)選地，所述藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、口服液體劑及顆粒劑中的任意一種或多種。

19、相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明具有以下有益效果：

20、（1）本發(fā)明制備的白頭翁囊泡粒徑小，為納米級載體；且攜帶脂質、蛋白質等豐富的活性物質，通過多組分協(xié)同作用，對病變部位具有天然靶向性。

21、（2）本發(fā)明制備的白頭翁囊泡屬于天然來源，安全性高，免疫原性低，無倫理爭議。

技術特征：

1.一種白頭翁囊泡的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述白頭翁鮮品和水的質量體積比為150?g-240?g:800?ml-1500?ml。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述榨汁的次數(shù)為2次-4次。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）和（3）中離心的溫度均為3.5℃-4.5℃。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中所述沉淀與pbs的質量體積比為0.3?g-0.5?g:8?ml-12?ml；所述干燥的溫度為-80℃~-90℃，干燥的時間為10?h-14?h。

6.一種如權利要求1-5任一項所述的制備方法制備得到的白頭翁囊泡。

7.根據權利要求6所述的白頭翁囊泡，其特征在于，所述白頭翁囊泡的粒徑為180?nm-190?nm，白頭翁囊泡的分子量為52k?da-105k?da。

8.一種如權利要求6或7所述的白頭翁囊泡在制備治療腸道炎癥藥物中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物還包括藥學上可接受的輔料。

10.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、口服液體劑及顆粒劑中的任意一種。

技術總結
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種白頭翁囊泡及其制備方法和在腸道炎癥中的應用。該制備方法包括如下步驟：將白頭翁鮮品加水榨汁，過濾，收集濾液；再將濾液低速離心，收集上清液；最后將上清液離心，收集沉淀，以PBS混懸沉淀，干燥，即得。本發(fā)明制備的白頭翁囊泡粒徑小，為納米級載體；且攜帶脂質、蛋白質等豐富的活性物質，通過多組分協(xié)同作用，對病變部位具有天然靶向性；且安全性高，免疫原性低，無倫理爭議。

技術研發(fā)人員：張治國,閻琪琪,楊玉琴,萬欣雨,程鼎,劉海霞,朱如愿
受保護的技術使用者：中國中醫(yī)科學院中醫(yī)基礎理論研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/22