專(zhuān)利名稱(chēng)：含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥品的無(wú)菌檢測(cè)方法，具體涉及一種注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
藥品的無(wú)菌檢測(cè)是藥品安全性的重要指標(biāo)之一。目前隨著藥品劑型的日益發(fā)展和藥品標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，及時(shí)有效的進(jìn)行藥品無(wú)菌檢測(cè)是擺在藥品檢驗(yàn)工作人員面前的重大課題。薄膜過(guò)濾法是消除藥品抑菌成分的最有效方法。但由于一些含精蛋白注射液含有較大顆粒而無(wú)法采用薄膜過(guò)濾法，例如精蛋白重組人胰島素注射液為精蛋白和重組人胰島素的滅菌混懸液。其中，胰島素是由胰島P細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素是機(jī)體內(nèi)唯一降低血糖的激素，也是唯一同時(shí)促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成的激素。作用機(jī)理屬于受體酪氨酸激酶機(jī)制。主要用于治療糖尿病、消耗性疾病。市場(chǎng)上糖尿病治療使用較多的胰島素注射液按藥效時(shí)間長(zhǎng)短分類(lèi)[1]主要包括1、超短效；2、短效(速效)；3、中效(低精蛋白鋅胰島素)；4、長(zhǎng)效(精蛋白鋅胰島素)；5、預(yù)混即將短效與中效預(yù)先混合，可一次注射，且起效快(30分鐘)，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)16 20小時(shí)。為了延長(zhǎng)胰島素在體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間，可使用與精蛋白結(jié)合的精蛋白胰島素，其中預(yù)混的延時(shí)制劑處方中，在含有少量鋅離子和苯酚或苯酚的衍生物的中性條件下，帶負(fù)電荷的胰島素與帶正電荷的硫酸精蛋白結(jié)合形成棒狀晶型的白色沉淀，在人體液中溶解度降低從而達(dá)到延時(shí)釋放的目的[2]。本發(fā)明實(shí)驗(yàn)中為人胰島素與硫酸精蛋白中性無(wú)菌混懸液，硫酸精蛋白是強(qiáng)堿性蛋白硫酸鹽，精蛋白是富含堿性氨基酸的低分子蛋白，等電點(diǎn)12.1。人胰島素的等電點(diǎn)5. 3，人胰島素與硫酸精蛋白等當(dāng)量結(jié)合形成絡(luò)合物，故在中性溶液中呈白色混懸狀，結(jié)晶人胰島素沉淀產(chǎn)生中效作用。在顯微鏡下觀察，晶體呈棒狀，且絕大多數(shù)晶體不得小于I U m,不得大于60 u m,無(wú)聚合體存在，該產(chǎn)品由于晶體顆粒半徑較大而使得無(wú)法采用薄膜過(guò)濾法。

發(fā)明內(nèi)容
我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，硫酸精蛋白是一種強(qiáng)堿，能與強(qiáng)酸性肝素鹽形成穩(wěn)定的鹽而使肝素失去抗凝作用。含精蛋白注射液加入肝素鹽注射液后，溶液立即變澄清透明，可以完全通過(guò)薄膜。本文結(jié)合執(zhí)行2010年版《中國(guó)藥典》，按照中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范，參考有關(guān)文獻(xiàn)資料，以3種不同規(guī)格批次的精蛋白重組人胰島素注射液為供試品，建立了以肝素鈉注射液作為中和劑，并通過(guò)薄膜過(guò)濾結(jié)合沖洗液的方法，對(duì)精蛋白重組人胰島素注射液進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)，并對(duì)其標(biāo)準(zhǔn)操作方法進(jìn)行了探討。因此，本發(fā)明的目的是提供一種含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法。該方法是基于將肝素鹽作為精蛋白的中和劑。所述方法包括如下步驟I)含精蛋白注射液中加入無(wú)菌肝素鹽溶液至溶液澄清；2)無(wú)菌薄膜過(guò)濾；3)無(wú)菌檢測(cè)。
其中，上述方法在步驟2)和步驟3)之間還包括沖洗步驟，沖洗液優(yōu)選為無(wú)菌蛋白胨水溶液，進(jìn)一步優(yōu)選為0.1 %無(wú)菌蛋白胨水溶液。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，在上述方法中，所述肝素鹽為肝素鈉或者肝素鈣，所述肝素鹽溶液為肝素鹽的0. 9%氯化鈉溶液。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，為了更精確的實(shí)施本發(fā)明的檢測(cè)方法，需要研究肝素鹽和精蛋白的具體配比，以達(dá)到最佳效果。每Irng精蛋白可拮抗100單位肝素，以此配比確定肝素鹽溶液的具體加入量。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的含精蛋白注射液優(yōu)選為精蛋白重組人胰島素注射液、精蛋白鋅胰島素注射液、低精蛋白鋅胰島素注射液等產(chǎn)品。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明方法中無(wú)菌薄膜過(guò)濾和無(wú)菌檢測(cè)步驟采用本領(lǐng)域中任何常規(guī)方法進(jìn)行。本發(fā)明的方法以肝素鹽為中和劑，實(shí)現(xiàn)對(duì)精蛋白重組人胰島素注射液無(wú)菌檢測(cè)，可以在含有精蛋白注射液中應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種簡(jiǎn)單、高效的含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明下面以精蛋白重組人胰島素注射液為例具體驗(yàn)證了本發(fā)明的可行性。下述實(shí)施例中所用試劑均可從商業(yè)途徑獲得。試驗(yàn)用菌種菌種
權(quán)利要求
1.一種含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法，該方法包括如下步驟 1)含精蛋白注射液中加入無(wú)菌肝素鹽溶液至溶液澄清； 2)無(wú)菌薄膜過(guò)濾； 3)無(wú)菌檢測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述方法在步驟2)和步驟3)之間還包括沖洗步驟。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述沖洗步驟中使用的沖洗液為無(wú)菌蛋白胨水溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述無(wú)菌蛋白胨水溶液為0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述肝素鹽為肝素鈉或者肝素鈣。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述肝素鹽溶液為肝素鹽的0.9%氯化鈉溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，以每Img精蛋白拮抗100單位肝素的配比確定肝素鹽溶液的具體加入量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述含精蛋白注射液為精蛋白重組人胰島素注射液、精蛋白鋅胰島素注射液或低精蛋白鋅胰島素注射液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法，其中使用肝素鹽作為中和劑，具體包括步驟含精蛋白注射液中加入無(wú)菌肝素鹽溶液至溶液澄清；無(wú)菌薄膜過(guò)濾；無(wú)菌檢測(cè)。本發(fā)明解決了含精蛋白注射液不能采用薄膜過(guò)濾法的問(wèn)題，提供了一種簡(jiǎn)單、高效的含精蛋白注射液的無(wú)菌檢測(cè)方法。
文檔編號(hào)G01N1/28GK103063807SQ20121055916
公開(kāi)日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月20日
發(fā)明者高春, 牛振東, 江志杰, 劉文杰, 張光華, 王似錦, 王志斌, 趙明, 郭洪祝, 周建平, 戴紅 申請(qǐng)人:北京市藥品檢驗(yàn)所