專利名稱：水痘IgG抗體檢測(cè)卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用于快速檢測(cè)接種水痘疫苗后人體內(nèi)是否產(chǎn)生抗水痘帶狀皰疹病毒的IgG抗體的水痘IgG抗體檢測(cè)卡。
背景技術(shù)：
目前用于檢測(cè)接種水痘疫苗后人體內(nèi)是否產(chǎn)生抗水痘帶狀皰疹病毒IgG抗體多采用酶聯(lián)免疫法(市售試劑盒，水痘帶狀皰疹病毒IgG抗體測(cè)定試劑盒(酶聯(lián)免疫法))，該方法是將免疫接種水痘疫苗的人血清進(jìn)行稀釋后，加到包被水痘帶狀皰疹病毒抗原的微孔板中，37°C孵育I小時(shí)后,洗滌數(shù)次,加抗人IgG酶標(biāo)記物，再經(jīng)過(guò)洗滌、加底物顯色，根據(jù)樣品OD值的大小，判斷人血清中是否含有抗水痘帶狀皰疹病毒的IgG抗體。該方法存在的技術(shù)問(wèn)題1、操作繁瑣試驗(yàn)步驟較多。待檢血清或血漿需進(jìn)行稀釋，前兩個(gè)反應(yīng)步驟需進(jìn)行數(shù)次洗滌，最后酶標(biāo)儀讀取OD值；2、耗時(shí)長(zhǎng)試驗(yàn)過(guò)程中三個(gè)步驟(加樣品、酶標(biāo)物、底物)均需37°C孵育，加上洗滌時(shí)間，整個(gè)試驗(yàn)需要耗時(shí)3小時(shí)。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種水痘IgG抗體檢測(cè)卡，它能快速檢測(cè)接種水痘疫苗后人體內(nèi)是否產(chǎn)生抗水痘帶狀皰疹病毒的IgG抗體，檢測(cè)操作簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本低。本實(shí)用新型解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是一種水痘IgG抗體檢測(cè)卡，包括襯墊、樣品墊、玻璃纖維墊、硝酸纖維素膜和吸收墊；所述樣品墊、玻璃纖維墊、硝酸纖維素膜和吸收墊以水平方向順序相接并固定在所述襯墊上；并且所述玻璃纖維墊上噴涂有帶標(biāo)記的彩色膠乳顆粒；所述硝酸纖維素膜上設(shè)置有水痘病毒抗原構(gòu)成的試驗(yàn)線、以及與所述試驗(yàn)線平行的對(duì)照線。進(jìn)一步的，所述試驗(yàn)線位于樣品墊和對(duì)照線之間。所述試驗(yàn)線是將純化的水痘病毒抗原固定在所述硝酸纖維素膜上形成。進(jìn)一步的，所述襯墊主體為硬質(zhì)塑料或硬紙片。上述技術(shù)方案中，所述樣品墊和吸收墊均采用具有吸水性能的材料制備而成，可以均為市售的濾紙制成，優(yōu)選吸水性能較強(qiáng)的定性濾紙，這樣利于檢測(cè)，增加檢測(cè)速度。所述硝酸纖維素膜為市售的硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜又稱NC膜，在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。采用的硝酸纖維素膜型號(hào)135s、170s或180s(以秒為單位的定義每4cm膜，水的層析時(shí)間是多少秒)。玻璃纖維墊是玻璃纖維制品的一種。玻璃纖維是一種性能優(yōu)異的無(wú)機(jī)非金屬材料。英文原名為Glassfiber，成分為二氧化硅、氧化鋁、氧化鈣、氧化硼、氧化鎂、氧化鈉等。它是以玻璃球或廢丨日玻璃為原料經(jīng)高溫熔制、拉絲、絡(luò)紗、織布等工藝，最后形成各類產(chǎn)品，玻璃纖維單絲直徑從幾個(gè)微米到二十幾個(gè)微米，相當(dāng)于一根頭發(fā)絲的1/20-1/50，每束纖維原絲都有數(shù)百根甚至上千根單絲組成，通常作為復(fù)材料中的增強(qiáng)材料、電絕緣材料和絕熱保溫材料，電路基板等，廣泛用于國(guó)民經(jīng)濟(jì)各個(gè)領(lǐng)域。所述玻璃纖維墊上均勻噴涂有帶標(biāo)記的彩色膠乳顆粒，彩色膠乳顆粒一般采用紅色的膠乳顆粒，這樣顯色明顯；膠乳顆粒上進(jìn)行標(biāo)記的方法在本領(lǐng)域?yàn)槌Ｒ?guī)技術(shù)手段，發(fā)明人在此不做贅述。彩色膠乳顆粒帶的標(biāo)記可以與人血清中的IgG抗體結(jié)合，試驗(yàn)線上是抗原。作為優(yōu)選,所述玻璃纖維墊為噴涂有帶金黃色葡萄球菌A蛋白(StaphylococalProtein A，SPA)標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊。金黃色葡萄球菌A蛋白是一種從金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁分離的蛋白質(zhì)。由于SPA能與人、鼠、兔等的IgG的Fe端結(jié)合，成為免疫學(xué)上一種極為有用的工具。所述對(duì)照線是將SPA固定在硝酸纖維素膜上形成的對(duì)照線。所述對(duì)照線與標(biāo)記物對(duì)應(yīng)。作為優(yōu)選，所述玻璃纖維墊為噴涂有帶鼠抗人IgG單克隆抗體標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊。鼠抗人IgG單克隆抗體是一種較好的標(biāo)記物。所述對(duì)照線是將羊抗鼠IgG抗體固定在硝酸纖維素膜上形成的對(duì)照線。羊抗鼠IgG抗體又稱羊抗鼠IgG多克隆抗體。羊抗鼠IgG (免疫球蛋白)多克隆抗體在膠體金法快速抗體診斷產(chǎn)品中用來(lái)固定于硝酸纖維素膜上，與膠體金標(biāo)記的單克隆抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)并顯示一定的顏色，形成對(duì)照線進(jìn)行免疫診斷。本實(shí)用新型的檢測(cè)原理是本實(shí)用新型的檢測(cè)是在層析作用的推動(dòng)下完成的。當(dāng)血清樣品被添加至樣品墊上后，通過(guò)層析作用到達(dá)玻璃纖維墊，血清樣品中的IgG抗體與標(biāo)記的彩色膠乳顆粒結(jié)合形成結(jié)合顆粒，然后進(jìn)一步至硝酸纖維素膜上，在硝酸纖維素膜的層析作用下，結(jié)合顆粒向前移動(dòng)，如血清中含有抗水痘帶狀皰疹病毒的抗體時(shí)(即接種水痘疫苗后應(yīng)產(chǎn)生此抗體)，與相應(yīng)的試驗(yàn)線結(jié)合，呈現(xiàn)顆粒的顏色線條，未結(jié)合的顆粒會(huì)繼續(xù)向前移動(dòng)，與對(duì)照線結(jié)合呈現(xiàn)顆粒的顏色線條，即顯示試驗(yàn)線和對(duì)照線兩條顏色線；如血清中不含有抗水痘帶狀皰疹病毒的抗體時(shí)，顆粒與相應(yīng)的試驗(yàn)線的抗原無(wú)法結(jié)合，試驗(yàn)線不顯色，為結(jié)合的顆粒會(huì)繼續(xù)向前移動(dòng)，與對(duì)照線結(jié)合呈現(xiàn)顆粒的顏色線條，即只顯示對(duì)照線一條顏色線。因膜層析速度較快，幾分鐘內(nèi)帶標(biāo)記彩色膠乳顆粒即可移動(dòng)完整個(gè)硝酸纖維素膜條，立刻可以判讀結(jié)果，如試驗(yàn)線和對(duì)照線均顯色，血清抗體為陽(yáng)性；只有對(duì)照線一條線顯色,血清抗體為陰性。綜上所述，本實(shí)用新型的有益效果是(I)抗水痘帶狀皰疹病毒IgG抗體是接種水痘疫苗后人體內(nèi)產(chǎn)生的一種特異性保護(hù)抗體。人體內(nèi)只有具有這種特異性保護(hù)抗體時(shí)，才能在人體接觸到水痘帶狀皰疹病毒時(shí)將病毒中和殺死不被感染。本實(shí)用新型水痘IgG抗體檢測(cè)卡不僅解決了現(xiàn)有用于檢測(cè)接種水痘疫苗后人體內(nèi)是否產(chǎn)生抗水痘帶狀皰疹病毒的IgG抗體的酶聯(lián)免疫法操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)的缺陷；同時(shí)它能快速、有效地檢測(cè)人接種疫苗后體內(nèi)是否產(chǎn)生了這種特異性保護(hù)抗體。(2)本實(shí)用新型使用時(shí)，只需將待檢樣品用生理鹽水1:1稀釋，直接加到本實(shí)用新型樣品墊上即可，操作十分簡(jiǎn)便；樣品加到本實(shí)用新型樣品墊上，10分鐘肉眼即可觀測(cè)檢測(cè)結(jié)果，進(jìn)行判定，整個(gè)檢測(cè)耗時(shí)約15分鐘，耗時(shí)短。

[0017]圖1是實(shí)施例1的俯視圖；圖2是實(shí)施例1的剖視圖。圖中標(biāo)記相對(duì)應(yīng)的部件名稱是1_樣品墊，2-玻璃纖維墊，3-試驗(yàn)線，4-對(duì)照線，5-硝酸纖維素膜，6-吸收墊，7-襯墊。
具體實(shí)施方式
下面通過(guò)具體實(shí)施例，并結(jié)合附圖，對(duì)本實(shí)用新型的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說(shuō)明。實(shí)施例1如圖1和2所示，一種水痘IgG抗體檢測(cè)卡，包括襯墊7，襯墊7的主體為塑料墊，塑料墊的表面涂覆有不干膠，所述襯墊7上沿水平方向依次固定具有吸水性能的樣品墊I(濾紙，上海金標(biāo)生物技術(shù)有限公司)、玻璃纖維墊2 (Ahlstrom 8964玻纖，上海杰一生物技術(shù)有限公司，型號(hào)JY-J101)、硝酸纖維素膜5 (硝酸纖維素膜，Millipore公司，型號(hào)135s)和具有吸水性能的吸收墊6 (濾紙，上海金標(biāo)生物技術(shù)有限公司)。所述玻璃纖維墊2為均勻噴涂有帶SPA標(biāo)記的紅色膠乳顆粒(紅色聚苯乙烯膠乳顆粒，上海杰一生物技術(shù)有限公司，型號(hào)PSR030N)的玻璃纖維墊，膠乳顆粒進(jìn)行標(biāo)記的方法為本領(lǐng)域公知技術(shù)，在此不作贅述。所述硝酸纖維素膜5上設(shè)置試驗(yàn)線3和對(duì)照線4，所述試驗(yàn)線3和對(duì)照線4平行；并且試驗(yàn)線3位于樣品墊I和對(duì)照線3之間。所述試驗(yàn)線3是滅活的純化水痘帶狀皰疹病毒抗原(市售，購(gòu)買自深圳菲鵬生物股份有限公司，貨號(hào)BA-VZ-02)固定在硝酸纖維素膜5上形成。所述對(duì)照線4是將SPA (市售，鄭州百基生物技術(shù)有限公司)固定在硝酸纖維素膜5上形成。純化水痘帶狀皰疹病毒抗原、SPA固定方法均為本領(lǐng)域公知技術(shù)，在此不作贅述。本實(shí)用新型中，所述樣品墊1、玻璃纖維墊2、硝酸纖維素膜5和吸收墊6以水平方向順序相接。具體地，所述樣品墊1、玻璃纖維墊2、硝酸纖維素膜5和吸收墊6順序相接的方式是部分重疊的，即樣品墊I的尾端搭接在玻璃纖維墊2上，玻璃纖維墊2的尾端搭接在硝酸纖維素膜5的首端上，吸收墊6的首端搭接在硝酸纖維素膜5的尾端上。實(shí)施例2本實(shí)施例與實(shí)施例1基本相同，其不同部分僅在于所述襯墊I主體為硬紙片。所述玻璃纖維墊2為均勻噴涂有帶鼠抗人IgG單克隆抗體標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊，所述對(duì)照線4為將羊抗鼠IgG抗體固定在硝酸纖維素膜5上形成。實(shí)施例3本實(shí)施例與實(shí)施例1基本相同，其不同部分僅在于所述樣品墊1、玻璃纖維墊2、硝酸纖維素膜5和吸收墊6的順序相接的方式是首尾連接并且沒(méi)有重疊的。實(shí)施例4本實(shí)施例與實(shí)施例3基本相同，其不同部分僅在于所述玻璃纖維墊2為噴涂有帶鼠抗人IgG單克隆抗體標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊，所述對(duì)照線4為將羊抗鼠IgG抗體固定在硝酸纖維素膜5上形成。本實(shí)用新型使用時(shí)，只需將待檢樣品用生理鹽水1:1稀釋，直接加到本實(shí)用新型的樣品墊上即可，操作十分簡(jiǎn)便；樣品加到本實(shí)用新型樣品墊上，10分鐘肉眼即可觀測(cè)檢測(cè)結(jié)果，進(jìn)行判定，如試驗(yàn)線3和對(duì)照線4均顯色，血清抗體為陽(yáng)性；只有對(duì)照線4 一條線顯色，血清抗體為陰性。整個(gè)檢測(cè)耗時(shí)約15分鐘，耗時(shí)短。以上所述的實(shí)施例只是本實(shí)用新型的一種較佳的實(shí)施方案，并非對(duì)本實(shí)用新型任何形式上的限制，在不超過(guò)權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體以及改型。
權(quán)利要求1.一種水痘IgG抗體檢測(cè)卡，包括襯墊(7)，其特征在于，還包括樣品墊(I)、玻璃纖維墊(2)、硝酸纖維素膜(5)和吸收墊￠);所述樣品墊(I)、玻璃纖維墊(2)、硝酸纖維素膜(5)和吸收墊￠)以水平方向順序相接并固定在所述襯墊(7)上；并且所述玻璃纖維墊(2)上噴涂有帶標(biāo)記的彩色膠乳顆粒；所述硝酸纖維素膜(5)上設(shè)置有水痘病毒抗原構(gòu)成的試驗(yàn)線(3)、以及與所述試驗(yàn)線平行的對(duì)照線(4)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水痘IgG抗體檢測(cè)卡，其特征在于，所述試驗(yàn)線(3)位于樣品墊⑴和對(duì)照線⑷之間。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的水痘IgG抗體檢測(cè)卡，其特征在于，所述襯墊(7)主體為硬質(zhì)塑料或硬紙片。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的水痘IgG抗體檢測(cè)卡，其特征在于，所述玻璃纖維墊(2)為噴涂有帶SPA標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊(2)，所述對(duì)照線(4)為SPA固定在硝酸纖維素膜(5)上形成的對(duì)照線。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的水痘IgG抗體檢測(cè)卡，其特征在于，所述玻璃纖維墊(2)為噴涂有帶鼠抗人IgG單克隆抗體標(biāo)記的彩色膠乳顆粒的玻璃纖維墊(2)，所述對(duì)照線(4)為羊抗鼠IgG抗體固定在硝酸纖維素膜(5)上形成的對(duì)照線(4)。
專利摘要本實(shí)用新型公開(kāi)了一種水痘IgG抗體檢測(cè)卡，包括襯墊(7)、樣品墊(1)、玻璃纖維墊(2)、硝酸纖維素膜(5)和吸收墊(6)；所述樣品墊(1)、玻璃纖維墊(2)、硝酸纖維素膜(5)和吸收墊(6)以水平方向順序相接并固定在所述襯墊(7)上；并且所述玻璃纖維墊(2)上噴涂有帶標(biāo)記的彩色膠乳顆粒；所述硝酸纖維素膜(5)上設(shè)置有水痘病毒抗原構(gòu)成的試驗(yàn)線(3)、以及與所述試驗(yàn)線平行的對(duì)照線(4)。本實(shí)用新型水痘IgG抗體檢測(cè)卡能快速檢測(cè)接種水痘疫苗后人體內(nèi)是否產(chǎn)生抗水痘帶狀皰疹病毒的IgG抗體，檢測(cè)操作簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本低。
文檔編號(hào)G01N33/569GK202854143SQ201220591909
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月9日
發(fā)明者范亞民, 李曉霞 申請(qǐng)人:寧波天潤(rùn)生物藥業(yè)有限公司