一種提取威靈仙總皂苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提取威靈仙總皂苷的方法，屬于中草藥有效成分提取分離領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]威靈仙，屬毛莨科植物。在臨床上，它用于治療痛風(fēng)頑痹、肢體麻木、筋脈拘攣、減弱風(fēng)濕痹痛、諸骨鯁咽，減少水腫、降血壓和治療外傷等。有關(guān)威靈仙的化學(xué)成分，近年來(lái)陸續(xù)有一些報(bào)道，但研宄主要集中威靈仙的大極性組分。此外，從威靈仙的根部提取物中分離得到一系列三萜苷。威靈仙中所發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)皂苷的苷元均為齊墩果酸，其總皂苷具有抗腫瘤及抗炎鎮(zhèn)痛的作用。
[0003]目前，對(duì)威靈仙的研宄主要集中在總皂苷藥理作用上，對(duì)其總皂苷的提取方法研宄較少。皂苷提取常用的方法有:常規(guī)加熱回流提取法、索氏提取法、滲漉提取法等。對(duì)提取威靈仙總皂苷來(lái)講，都有其局限性，如索氏提取就很難控制提取液溶劑濃度的改變；滲漏提取又無(wú)法控制提取溫度的改變；而加熱回流提取法雖可控制提取溶劑濃度，但只有經(jīng)過(guò)2次或3次提取才能較完全的提出皂苷，需要較多的提取溶劑，且提取時(shí)間較長(zhǎng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種提取威靈仙總皂苷的方法，該方法具有工藝簡(jiǎn)單、能耗低、生產(chǎn)周期短等特點(diǎn)。
[0005]本發(fā)明包括以下步驟:
(1)以威靈仙為原料，干燥、粉碎，過(guò)20目篩，加入3-5倍的pH為4.0-5.0的乙醇溶液，將相當(dāng)于原料1~2%的纖維素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ；
(2)將酶解后的物料置于連續(xù)逆流超聲裝置中，于70~80°C、20~40KHz的條件下提取60~120min，過(guò)濾；
(3)將提取液用濾布孔徑為50~1.0Mm板框機(jī)過(guò)濾，其中壓力為0.1-1.0MPa，板框機(jī)過(guò)濾后的液體經(jīng)0.2-0.02Mfli的微濾裝置進(jìn)行微濾，其中保持微濾裝置壓力為0.1-0.6MPa ;
(4)微濾透過(guò)液經(jīng)過(guò)預(yù)處理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附樹脂柱后，用2~3BV的蒸餾水洗脫，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮并真空干燥，得到威靈仙總皂苷。
[0006]步驟(I)中所述的調(diào)節(jié)乙醇溶液的酸為乙酸。
[0007]步驟(4)中所述的大孔樹脂型號(hào)為八8-8、0-101、爾六-9。
[0008]本發(fā)明的有益效果在于:(1)采用纖維素酶處理，能破壞植物的細(xì)胞壁，有利于有效成分的溶出，大大縮短處理時(shí)間，提高生產(chǎn)效率；(2)采用連續(xù)逆流超聲提取，利用超聲的空化作用，加速威靈仙總皂苷的溶出；(3)本發(fā)明操作方便，工藝簡(jiǎn)單，得率高，且生產(chǎn)安全可靠。(4)該法工藝簡(jiǎn)單、能耗低、萃取溶劑無(wú)毒、易回收。
[0009]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
[0010]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
以威靈仙為原料，干燥、粉碎，過(guò)20目篩，加入3倍的pH為4.0的乙醇溶液，將相當(dāng)于原料1%的纖維素酶加入其中，于40°C酶解2h ;將酶解后的物料置于連續(xù)逆流超聲裝置中，于70°C、20KHz的條件下提取60min，過(guò)濾；將提取液用濾布孔徑為50Mm板框機(jī)過(guò)濾，其中壓力為1.0MPa，板框機(jī)過(guò)濾后的液體經(jīng)0.2Mffl的微濾裝置進(jìn)行微濾，其中保持微濾裝置壓力為
0.6MPa ;微濾透過(guò)液經(jīng)過(guò)預(yù)處理的0.5倍原料重量的AB-8的大孔吸附樹脂柱后，用2BV的蒸餾水洗脫，再改用4BV的60%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮并真空干燥，得到威靈仙總皂苷，含量為67.8%。
[0011]實(shí)施例2:
以威靈仙為原料，干燥、粉碎，過(guò)20目篩，加入5倍的pH為4.5的乙醇溶液，將相當(dāng)于原料2%的纖維素酶加入其中，于45°C酶解3h ;將酶解后的物料置于連續(xù)逆流超聲裝置中，于75°C、40KHz的條件下提取90min，過(guò)濾；將提取液用濾布孔徑為30Mm板框機(jī)過(guò)濾，其中壓力為0.5MPa，板框機(jī)過(guò)濾后的液體經(jīng)0.02Mffl的微濾裝置進(jìn)行微濾，其中保持微濾裝置壓力為0.3MPa ;微濾透過(guò)液經(jīng)過(guò)預(yù)處理的I倍原料重量的D-101的大孔吸附樹脂柱后，用3BV的蒸餾水洗脫，再改用6BV的70%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮并真空干燥，得到威靈仙總皂苷，含量為76.5%。
[0012]實(shí)施例3:
以威靈仙為原料，干燥、粉碎，過(guò)20目篩，加入4倍的pH為5.0的乙醇溶液，將相當(dāng)于原料1.5%的纖維素酶加入其中，于50°C酶解3h ;將酶解后的物料置于連續(xù)逆流超聲裝置中，于80°C、40KHz的條件下提取120min，過(guò)濾；將提取液用濾布孔徑為1.0Mm板框機(jī)過(guò)濾，其中壓力為0.1MPa，板框機(jī)過(guò)濾后的液體經(jīng)0.1Mm的微濾裝置進(jìn)行微濾，其中保持微濾裝置壓力為0.1MPa ;微濾透過(guò)液經(jīng)過(guò)預(yù)處理的1.5倍原料重量的NKA-9大孔吸附樹脂柱后，用3BV的蒸餾水洗脫，再改用5BV的80%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮并真空干燥，得到威靈仙總皂苷，含量為71.2%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種提取威靈仙總皂苷的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)以威靈仙為原料，干燥、粉碎，過(guò)20目篩，加入3-5倍的pH為4.0-5.0的乙醇溶液，將相當(dāng)于原料1~2%的纖維素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ； (2)將酶解后的物料置于連續(xù)逆流超聲裝置中，于70~80°C、20~40KHz的條件下提取60~120min，過(guò)濾； (3)將提取液用濾布孔徑為50~1.0Mm板框機(jī)過(guò)濾，其中壓力為0.1-1.0MPa，板框機(jī)過(guò)濾后的液體經(jīng)0.2-0.02Mfli的微濾裝置進(jìn)行微濾，其中保持微濾裝置壓力為0.1-0.6MPa ; (4)微濾透過(guò)液經(jīng)過(guò)預(yù)處理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附樹脂柱后，用2~3BV的蒸餾水洗脫，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮并真空干燥，得到威靈仙總皂苷。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取威靈仙總皂苷的方法，其特征在于，步驟(I)中所述的調(diào)節(jié)乙醇溶液的酸為乙酸。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取威靈仙總皂苷的方法，其特征在于，步驟(4)中所述的大孔樹脂型號(hào)為AB-8、D-101、NKA-9。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提取威靈仙總皂苷的方法，其處理步驟包括：（1）以威靈仙為原料，干燥、粉碎過(guò)篩，纖維素酶酶解；（2）連續(xù)逆流超聲提??；（3）提取液經(jīng)過(guò)板框過(guò)濾機(jī)過(guò)濾和微濾裝置純化；（3）微濾透過(guò)液再經(jīng)大孔吸附樹脂進(jìn)一步純化，濃縮干燥，即得威靈仙總皂苷。本發(fā)明所得威靈仙總皂苷具有得率高、生產(chǎn)過(guò)程簡(jiǎn)化、生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)效率高等特點(diǎn)。
【IPC分類】A61K36/716
【公開號(hào)】CN104906209
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510270040
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請(qǐng)人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請(qǐng)日】2015年5月26日