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一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法與流程

文檔序號:12199669閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法,包括無菌苗培養(yǎng)、胚狀體誘導、種球誘導、種球成熟培養(yǎng)步驟,其特征在于,

1)無菌苗培養(yǎng):將珠芽類魔芋植株的幼嫩葉片、葉柄以及叢生芽常規(guī)滅菌后,將葉片切成0.5-1.0cm2,葉柄切成0.8-1cm長,接種到常規(guī)滅菌的苗培養(yǎng)基上,在2000lux光下培養(yǎng),11h/d,培養(yǎng)溫度28±1℃,得到脫毒無菌苗;苗培養(yǎng)基組分及配比為:MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6-BA+活性炭0-3.0g/L,蔗糖30g/L,瓊脂6-8g/L,調(diào)pH至5.8-6.2;

2)胚狀體誘導:將步驟1)獲得的脫毒無菌苗,取葉片切成0.5-1.0cm2,葉柄切成0.8-1.0cm,接到常規(guī)滅菌的胚狀體誘導培養(yǎng)基上,在2000lux光下培養(yǎng),11h/d,培養(yǎng)溫度28±1℃,獲得珠芽類魔芋胚狀體;胚狀體誘導培養(yǎng)基組分及配比為:MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6-BA +0.1mg/L IAA+0.1-0.2mg/L ABA+30g/L聚乙二醇,蔗糖30g/L,瓊脂6-8g/L,調(diào)pH至5.8-6.2,或MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6-BA,蔗糖30g/L,瓊脂6-8g/L,調(diào)pH至5.8-6.2;

3)種球誘導:將未產(chǎn)生新芽之前的珠芽類魔芋胚狀體,轉移至常規(guī)滅菌的誘導培養(yǎng)基上,在2000lux光下培養(yǎng),11h/d,培養(yǎng)溫度28±1℃,得到珠芽類魔芋幼小種球;種球誘導培養(yǎng)基的組分及配比為:MS基本培養(yǎng)基+0.1mg/L NAA +3.0g/L活性炭+15g/L聚乙二醇,蔗糖30g/L,瓊脂6-8g/L,調(diào)pH至5.8-6.2;

4)種球成熟培養(yǎng):將步驟3)得到的珠芽類魔芋幼小種球轉移至常規(guī)滅菌的種球成熟培養(yǎng)基上,在2000lux光下培養(yǎng),11h/d,培養(yǎng)溫度28±1℃,當珠芽類魔芋種球上端中間有芽點,直徑大小為5mm以上,種球的外觀顏色略帶褐色時得到成熟分離的珠芽類魔芋種球;種球成熟培養(yǎng)基組分及其配比為:MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6-BA +0.2-1.0mg/LABA或30-50g/L聚乙二醇,蔗糖30-50g/L,瓊脂6-8g/L,調(diào)pH至5.8-6.2。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法,其特征在于,所述滅菌是在121-126℃下濕熱蒸汽滅菌30min。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法,其特征在于,將成熟分離的珠芽類魔芋種球直接播種于基質(zhì)上,所述基質(zhì)為泥炭與珍珠巖按重量比2:1的比例配置,置于半陰生長環(huán)境條件,溫度18~30℃。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法,其特征在于,所述4)球成熟培養(yǎng)中,將培養(yǎng)基固定包裹在可降解的塑料袋中。

5.根據(jù)權利要求1所述的一種關于珠芽魔芋組織培養(yǎng)的繁殖方法,其特征在于,所述培養(yǎng)基放置在搖床上振蕩培養(yǎng)。

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