本發(fā)明涉及醫(yī)學動物模型構(gòu)建，具體涉及肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法及應用。

背景技術(shù)：

1、肝病影響我國乃至全球數(shù)百萬人，具有發(fā)病普遍、死亡率高的特點，目前有關(guān)肝病防治的臨床藥物依然匱乏，中國傳統(tǒng)醫(yī)學特有的辯證論治診療體系越來越顯現(xiàn)出獨到的臨床價值。

2、基于動物模型的藥效評價是解決疾病診療問題的關(guān)鍵。近年來，有關(guān)肝病動物模型的建立與評價雖在不斷完善，然而現(xiàn)行的造模方法采用的是疾病造模因素，彼此割裂，不能達到“病”與“證”的統(tǒng)一，在疾病機理研究及藥物探索方面應用受限。

3、“肝熱”作為中國傳統(tǒng)醫(yī)學的核心病機之一，其貫穿多種肝病不同階段，病因均與飲食不節(jié)、外邪入侵等因素有關(guān)，目前國內(nèi)外尚無此種動物模型的建立與評價。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對上述背景技術(shù)中提到的問題，本發(fā)明提出了一種肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法及應用，本發(fā)明采用疾病造模因素與證候造模因素相疊加的方法建立病證結(jié)合“肝熱”大鼠模型，并合理地提出建立各證候宏觀表征指標定量評價體系以及對宏觀表征引入相應的微觀指標，擬助力用于肝病防治的中醫(yī)藥創(chuàng)新研究。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

3、本發(fā)明第一方面提供了一種肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，包括：

4、將成年大鼠置于溫度為（30±2）℃，濕度為（75±5%）的濕熱環(huán)境中，予以高脂飼料喂養(yǎng)，每天予以啤酒代替水飲，每周間隔兩次予以白酒灌胃，共計喂養(yǎng)12-16周；

5、將喂養(yǎng)得到的大鼠進行肝熱證候評分及肝熱疾病評分，其中，肝熱證候評分和肝熱疾病評分均設置多個觀察項目，每個觀察項目設置多個評分等級，進行分級計分；

6、當肝熱證候評分總和大于或等于預設證候標準分，且肝熱疾病評分總和大于或等于預設疾病標準分時，得到肝熱大鼠模型。

7、作為本發(fā)明的進一步說明，在大鼠進行飼料喂養(yǎng)之前，禁食12?h。

8、作為本發(fā)明的進一步說明，所述啤酒的喂養(yǎng)標準為：500ml/5只/日。

9、作為本發(fā)明的進一步說明，所述白酒的灌胃標準為：每周于周一、周五以5?ml/kg/次的白酒灌胃。

10、作為本發(fā)明的進一步說明，所述肝熱證候評分中共設置7個觀察項目，每個觀察項目設置5個評分等級，分級計分；所述肝熱疾病評分中共設置5個觀察項目，每個觀察項目設置4個評分等級，分級計分。

11、作為本發(fā)明的進一步說明，所述預設證候標準分為10分，所述預設疾病標準分為5分。

12、作為本發(fā)明的進一步說明，所述肝熱證候評分中的觀察項目為：爪甲、眼睛、毛發(fā)、舌苔、尿液、糞便及情志反應，通過觀察大鼠各個項目的狀態(tài)進行肝熱證候評分。

13、作為本發(fā)明的進一步說明，在進行肝熱證候評分時，將各觀察項目按照以下標準進行評分：

14、爪甲：淡紅為0分；偏白為1分；褶皺、有條紋為2分；干枯、不規(guī)則為3分；無血色、發(fā)黑、易折斷為4分；

15、眼睛：淡紅為0分；眼角有血絲為1分；干澀、紅腫為2分；紅腫、凸起為3分；紅腫、羞明流淚、有分泌物為4分；

16、毛發(fā)：柔順光澤為0分；不光順、逆毛為1分；掉毛，有點狀凹陷為2分；不規(guī)則脫毛為3分；片狀脫毛、毛色發(fā)黃為4分；

17、舌苔：紅潤光澤為0分；淡紅、舌苔少為1分；舌體發(fā)紅、舌中后部有黃苔為2分；舌體僵硬板直、舌中后部苔黃膩為3分；舌體凹凸不平、厚膩、發(fā)黃、邊緣不規(guī)則為4分；

18、尿液：淡黃透亮為0分；偏黃、味重為1分；深黃、味重、混濁為2分；黃褐色，刺鼻，混濁為3分；褐色，刺鼻，量少粘稠為4分；

19、糞便：黑褐色、軟硬適宜、顆粒分明為0分；黃褐色、偏軟、味臭為1分；黃褐色、不成型、腥臭為2分；褐黃色、偏干、粒小為3分；褐黑色、偏硬、有食物殘渣為4分；

20、情志反應：反應靈敏為0分；萎靡、納呆為1分；跑躥、偶有肢體抽搐為2分；狂躁、撕咬為3分；萎靡、或跑竄、或撕咬為4分。

21、作為本發(fā)明的進一步說明，所述肝熱疾病評分中的觀察項目為：肝組織形態(tài)、血清生化指標及肝臟病理組織學觀察項目中的：脂肪病變、炎癥病變及氣球樣變程度。

22、作為本發(fā)明的進一步說明，在進行肝熱疾病評分時，將各觀察項目按照以下標準進行評分：

23、肝組織形態(tài)：肝葉紅褐，質(zhì)地柔潤為0分；肝葉褐黃，略大為1分；肝葉褐黃，增大，質(zhì)地偏硬為2分；肝葉黃褐色，晦暗，偏大偏硬為3分；

24、血清生化指標：肝功、血脂正常為0分；肝功異常為1分；肝功、血脂一級異常為2分；肝功、血脂二級異常為3分；

25、脂肪病變：＜5%為0分；5-35%為1分；35%?-?65%為2分；＞65%為3分；

26、炎癥病變：無變化為0分；1?-?2個病灶為1分；3?-?4個病灶為2分；＞?4個病灶為3分；

27、?氣球樣變：無變化為0分；1?-?2個病灶為1分；3?-?4個病灶為2分；?＞?4個病灶為3分。

28、作為本發(fā)明的進一步說明，所述血清生化指標具體為肝功指標和血脂指標；其中肝功指標為ast、alt、γ-gt、akp；血脂指標為tc、tg、hdl-c、ldl-c。

29、本發(fā)明第二方面提供了上述任一項所述的肝熱大鼠模型在預防或治療肝熱引起的肝病的藥物中的應用。

30、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果：

31、本發(fā)明采用疾病造模因素與證候造模因素相疊加的方法建立病證結(jié)合“肝熱”大鼠模型，并合理地提出建立各證候宏觀表征指標定量評價體系以及對宏觀表征引入相應的微觀指標，能夠助力于肝病防治的中醫(yī)藥創(chuàng)新研究。

32、本技術(shù)方案的其它特征和優(yōu)點將在隨后的說明書中闡述，并且，部分地從說明書中變得顯而易見，或者通過實施本技術(shù)方案而了解。本技術(shù)方案的目的和其他優(yōu)點可通過在所寫的說明書以及附圖中所特別指出的結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)和獲得。

33、下面通過附圖和實施例，對本技術(shù)方案的技術(shù)方案做進一步的詳細描述。

技術(shù)特征：

1.一種肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括：

2.如權(quán)利要求1所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于：在大鼠進行飼料喂養(yǎng)之前，禁食12?h；所述啤酒的喂養(yǎng)標準為：500ml/5只/日；所述白酒的灌胃標準為：每周于周一、周五以5?ml/kg/次的白酒灌胃。

3.如權(quán)利要求1所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述肝熱證候評分中共設置7個觀察項目，每個觀察項目設置5個評分等級，分級計分；所述肝熱疾病評分中共設置5個觀察項目，每個觀察項目設置4個評分等級，分級計分。

4.如權(quán)利要求1所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述預設證候標準分為10分，所述預設疾病標準分為5分。

5.如權(quán)利要求1所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述肝熱證候評分中的觀察項目為：爪甲、眼睛、毛發(fā)、舌苔、尿液、糞便及情志反應，通過觀察大鼠各個項目的狀態(tài)進行肝熱證候評分。

6.如權(quán)利要求5所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，在進行肝熱證候評分時，將各觀察項目按照以下標準進行評分：

7.如權(quán)利要求1所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述肝熱疾病評分中的觀察項目為：肝組織形態(tài)、血清生化指標及肝臟病理組織學觀察項目中的：脂肪病變、炎癥病變及氣球樣變程度。

8.如權(quán)利要求7所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，在進行肝熱疾病評分時，將各觀察項目按照以下標準進行評分：

9.如權(quán)利要求7所述的肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述血清生化指標具體為肝功指標和血脂指標；其中肝功指標為ast、alt、γ-gt、akp；血脂指標為tc、tg、hdl-c、ldl-c。

10.權(quán)利要求1-9中任一項所述的肝熱大鼠模型在預防或治療肝熱引起的肝病的藥物中的應用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了肝熱大鼠模型的構(gòu)建方法及應用，涉及醫(yī)學動物實驗模型技術(shù)領(lǐng)域，該構(gòu)建方法包括：將成年大鼠置于溫度為（30±2）℃，濕度為（75±5%）的濕熱環(huán)境中，予以高脂飼料喂養(yǎng)，每天予以啤酒代替水飲，每周間隔兩次予以白酒灌胃，共計喂養(yǎng)12?16周；將喂養(yǎng)得到的大鼠進行肝熱證候評分及肝熱疾病評分，當肝熱證候評分總和和肝熱疾病評分總和均大于或等于預設標準分時，得到肝熱大鼠模型。本發(fā)明采用疾病造模因素與證候造模因素相疊加的方法建立病證結(jié)合“肝熱”大鼠模型，并合理地提出建立各證候宏觀表征指標定量評價體系以及對宏觀表征引入相應的微觀指標，能夠助力于肝病防治的中醫(yī)藥創(chuàng)新研究。

技術(shù)研發(fā)人員：李曉東,郭敏,程標標,魏賽雪
受保護的技術(shù)使用者：甘肅省中醫(yī)藥研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15