一種優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法，屬于農(nóng)作物育種領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，國內(nèi)有利用育種材料進行麥谷蛋白亞基遺傳分析并育成小麥品(系)種的報道；也有利用麥谷蛋白亞基分析結(jié)合60CoY射線輻照和生化標(biāo)記等育種方法的報道，但未見采用上述綜合方法育成強筋、高產(chǎn)、早熟春小麥品種的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003](一)要解決的技術(shù)問題
[0004]為解決上述問題，本發(fā)明提出了一種優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法。
[0005]( 二)技術(shù)方案
[0006]本發(fā)明的優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法，包括雜交親本選擇、雜交組合配制、雜交當(dāng)代種子輻照誘變、后代選擇與品質(zhì)測試和新品系鑒定。
[0007]1、雜交親本選擇的步驟為:
[0008]a)樣品的快速提取:選取I粒種子，磨碎后置于1.5mL離心管中，加入800 yL樣品緩沖液(62.5mmol/L Tris-HCl溶液，pH值6.8，10%丙三醇，2% SDS，5% β-巰基乙醇)立即混合后搖床振動30min，將離心管放入90°C水浴鍋中提取5min，取出離心管，800r/min離心5min，取上清液置于4°C冰箱保存。
[0009]b)凝膠配制:采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)不連續(xù)緩沖系統(tǒng)，配置分離膠用 10% 的 SDS-PAGE(T = 10.0%, C = 2.67%, Tris 0.375mol/L，ρΗ8.8)，配置濃縮膠用 4.0 % 的 SDS-PAGE (Τ = 4.0 %, C = 2.67 %, Tris 0.125mol/L，pH6.8)，膠厚1mm，雙板，樣品梳為21孔，每個樣品孔點樣8-10 μ L。
[0010]C)電泳條件:電極緩沖液為 25mmol/L TrisHCl, 192mmol/L 甘氨酸，0.1 % SDS,pH8.3。兩板用30mA穩(wěn)流電泳過液。
[0011]d)染色脫色和保存:凝膠用12%三氯乙醇固定20min，0.05%考馬斯亮藍R-250染色過液，用蒸餾水脫色。
[0012]e)麥谷蛋白亞基命名和評分:通過以上高分子量麥谷蛋白亞基電泳圖譜分析方法，獲得新品種的HMW-GS組成為1、7+9、5+10 ;原品種的HMW-GS組成為2*、7+9、2+12 ;同時又對新品種進行了籽粒蛋白質(zhì)含量、濕面筋含量以及面粉用粉質(zhì)儀、拉伸儀進行了測定和分析；烘烤了面包，新品質(zhì)達到國標(biāo)強筋標(biāo)準(zhǔn)。
[0013]2、雜交組合配制的步驟為:種植親本圃(如果兩親本抽穗時間相差較大時應(yīng)分期播種)，在母本抽穗2天后，選取母本標(biāo)準(zhǔn)穗(主穗)5穗，將每穗上端和下端小穗剔除，保留中間小花20個，將20個小花中的雄蕊去除，套袋編號；父本揚花達到40% -50%時授粉(每天在早晨的8點至12點授粉較好，如果花粉量大可采用捻穗法)。
[0014]3、雜交當(dāng)代種子輻照誘變的步驟為:雜交當(dāng)代種子用60Co γ射線輻照誘變。將輻照的種子含水量控制在14% -16%之間；測出輻照室劑量率為I戈瑞/分鐘的點；將輻照種子均勻擺放在劑量率為I戈瑞/分鐘的點上，輻照劑量為80戈瑞進行輻照誘變。
[0015]4、后代選擇與品質(zhì)測試的步驟為:雜交與60CoY射線輻照結(jié)合的后代，按照選育目標(biāo)經(jīng)過多代單株、單穗選擇和南繁加代(如果條件允許，南繁加代；如果條件不允許，也可以不南繁加代)，到4-5代時對優(yōu)良的株行或穗行混收的籽粒進行高分子量麥谷蛋白亞基電泳圖譜分析(分析方法同上)，通過高分子量麥谷蛋白亞基電泳圖譜分析以及結(jié)合田間表現(xiàn)，選擇HMW-GS組成中含有5+10優(yōu)質(zhì)亞基并在田間表現(xiàn)突出的株行或穗行。
[0016]5、新品系鑒定的步驟為:將選擇的含有5+10優(yōu)質(zhì)亞基并在田間表現(xiàn)突出的株行或穗行繼續(xù)加代和選擇，直至完全穩(wěn)定后將選育的新品系進入品系比較試驗中，進行3年的產(chǎn)量、農(nóng)藝性狀、抗逆性、抗病性以及品質(zhì)(籽粒蛋白質(zhì)含量、濕面筋含量以及面粉用粉質(zhì)儀、拉伸儀測定，烘烤面包)等的全面鑒定，可以選育出強筋、高產(chǎn)的春小麥品種。
[0017](三)有益效果
[0018]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，其具有以下有益效果:本發(fā)明的優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法，其能夠培育出新的強筋、高產(chǎn)、早熟春小麥品種。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合具體的實施方式來對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的限定，但要求保護的范圍不僅局限于所作的描述。
[0020]實施例:
[0021]通過高產(chǎn)親本(選用在新疆當(dāng)?shù)卮竺娣e種植并經(jīng)多年實踐證明的高產(chǎn)品種)和優(yōu)質(zhì)強筋親本(選用與當(dāng)?shù)赜H本遺傳距離遠且與當(dāng)?shù)赜H本性狀互補，沒有明顯缺點的種質(zhì)，采用高分子量麥谷蛋白亞基電泳圖譜分析方法，進行親本材料的麥谷蛋白亞基遺傳分析)進行育種。
[0022]本發(fā)明的優(yōu)質(zhì)強筋春小麥的育種方法:
[0023]包括雜交親本選擇、雜交組合配制、雜交當(dāng)代種子輻照誘變、后代選擇與品質(zhì)測試和新品系鑒定。
[0024]1、雜交親本選擇的步驟為:
[0025]a)樣品的快速提取:選取I粒種子，磨碎后置于1.5mL離心管中，加入800 yL樣品緩沖液(62.5mmol/L Tris-HCl溶液，pH值6.8，10%丙三醇，2% SDS，5% β-巰基乙醇)立即混合后搖床振動30min，將離心管放入90°C水浴鍋中提取5min，取出離心管，800r/min離心5min，取上清液置于4°C冰箱保存。
[0026]b)凝膠配制:采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)不連續(xù)緩沖系統(tǒng)，配置分離膠用 10% 的 SDS-PAGE(T = 10.0%, C = 2.67%, Tris 0.375mol/L，ρΗ8.8)，配置濃縮膠用 4.0 % 的 SDS-PAGE (Τ = 4.0 %, C = 2.67 %, Tris 0.125mol/L，pH6.8)，膠厚1mm，雙板，樣品梳為21孔，每個樣品孔點樣8-10 μ L。
[0027]c)電泳條件:電極緩沖液為 25mmol/L TrisHCl, 192mmol/L 甘氨酸，0.1 % SDS,pH8.3。兩板用30mA穩(wěn)流電泳過液。
[0028]d)染色脫色和保存:凝膠用12%三氯乙醇固定20min，0.05%考馬斯亮藍R-250染色過液，用蒸餾水脫色。
[0029]e)麥谷蛋白亞基命名和評分:通過以上高分子量麥谷蛋白亞基電泳圖譜分析方法，獲得新品種的HMW-GS組成為1、7+9、5+10 ;原品種的HMW-GS組成為2*、7+9、2+12