一種甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育方法，該方法選擇以性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料為輪回親本，與隱性上位互作核不育純合兩型系雜交、回交，在回交后代群體進(jìn)行連續(xù)自交、測(cè)交選育獲得新的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系，高油分隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測(cè)交，獲得不育株為100%的全不育系。本發(fā)明選育程序簡(jiǎn)單、速度快、可操作性強(qiáng)，獲得的純合兩型系遺傳穩(wěn)定、配合力高，可方便地應(yīng)用于高油分隱性上位互作核不育雜交油菜新品種的選育。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選 育方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于油菜育種技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種新的甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互 作核不育純合兩型系選育方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 油菜具有較強(qiáng)的雜種優(yōu)勢(shì)，優(yōu)良的雜交組合一般可增產(chǎn)20%~30%。自1985年第一 個(gè)雜交油菜秦油2號(hào)育成審定以來(lái)，雜交油菜生產(chǎn)在我國(guó)發(fā)展十分迅速。目前油菜雜種優(yōu)勢(shì) 利用途徑主要是油菜雄性不育，油菜雄性不育利用的關(guān)鍵是在雜交種生產(chǎn)時(shí)獲得100%的不 育群體，隱性細(xì)胞核不育兩系在雜交種生產(chǎn)時(shí)只能獲得50%的不育群體，雜交種生產(chǎn)費(fèi)時(shí)費(fèi) 工，而且種子的純度難以保證，制種產(chǎn)量也很低。質(zhì)核互作不育可望獲得100%的不育群體， 但是育性不穩(wěn)定，容易受到環(huán)境因素的影響，存在較大的制種風(fēng)險(xiǎn)。隱性核不育上位基因的 發(fā)現(xiàn)，不但使培育100%的不育群體成為可能，同時(shí)其育性穩(wěn)定、不受環(huán)境因素影響。然而，盡 管該不育系統(tǒng)具有明顯的優(yōu)點(diǎn)，但是選育高油分且配合力高的不育系難度很大，限制了其 在生產(chǎn)實(shí)踐的廣泛應(yīng)用。
[0003] 高油分常規(guī)油菜在眾多油菜育種單位均有較長(zhǎng)的研究歷史，積累了大批高含油 量、高蛋白、綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的常規(guī)材料。廣大油菜育種科技工作者以此為基礎(chǔ)材料，對(duì) 隱性核不育三系材料進(jìn)行遺傳改良，但是各油菜育種單位的選育周期長(zhǎng)，難得大，自陳鳳祥 研究員1991年發(fā)現(xiàn)隱性細(xì)胞核雄性不育材料9012AB并提出該不育系育性控制的三基因互 作模式以來(lái)，歷經(jīng)30年的育種實(shí)踐，全國(guó)審定推廣的核不育三系品種一共才十幾個(gè)，并且高 油分的品種很少。因此，深入研究該不育系統(tǒng)的遺傳規(guī)律，改進(jìn)技術(shù)手段，選育甘藍(lán)型油菜 高油分隱性上位互作核不育三系雜交新品種是我們面臨既具理論價(jià)值又具應(yīng)用前景的科 學(xué)問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明目的是提供一種甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選 育方法，降低甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育難度，加速甘藍(lán)型 油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育進(jìn)程，把該優(yōu)良的授粉控制系統(tǒng)盡快方 便地應(yīng)用于生產(chǎn)，同時(shí)，獲得的純合兩型系含油量高、配合力強(qiáng)、遺傳穩(wěn)定，選育程序簡(jiǎn)單、 可操作性強(qiáng)，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用了這樣的技術(shù)方案： 本發(fā)明的甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育方法是以性狀優(yōu) 良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株為輪回親本，在回交后代選育新的高油分隱性上 位互作核不育純合兩型系，主要包括以下步驟： (1)選擇性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株。性狀優(yōu)良且配合力高的高 油分常規(guī)材料優(yōu)良單株是指含油量高、品質(zhì)雙低、綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良且配合力高的常規(guī)油 菜優(yōu)良單株，其基因型為MsiMsiMs^AfeRf Rf; (2) 以步驟（1)中獲得的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株套袋自交，獲得雜交輪回親本，與隱 性上位互作核不育純合兩型系不育株雜交、回交，將回交后代群體進(jìn)行雜交、自交、測(cè)交選 育獲得新的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系，其基因型為mS1mS1mS2m S2RfRfX Msimsims2ms2Rf Rf ii!cmsimsims2ms2Rf Rf X msimsiMs2ms2Rf Rf ； (3) 將步驟(2)中獲得的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測(cè)交，獲得不 育株為100%的全不育系，從而用于高油分隱性核不育三系雜交油菜新品種選育。
[0006] 更進(jìn)一步的做法是，將所述待改良隱性上位互作核不育純合兩型系種植成小區(qū)， 從中優(yōu)選不育單株作母本，以性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株為父本進(jìn)行 雜交，雜交后代沒(méi)有育性分離;將雜交后代單株與所述性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī) 材料優(yōu)良單株回交獲得BQFi，其回交后代沒(méi)有育性分離，但有四種基因型；將BQFi自交獲 得B&F2，其自交后代育性分離比為1:0或15:1，如果自交后代育性分離比為15:1，則對(duì)可育 株套袋自交，經(jīng)室內(nèi)分析選擇高油分單株，在自交后代育性分離比為3:1的小區(qū)選擇優(yōu)良單 株套袋自交，其自交后代出現(xiàn)有育性分離比為3:1，連續(xù)在育性分離比為3:1的株行進(jìn)行可 育株套袋自交3代后進(jìn)行成對(duì)測(cè)交，在測(cè)交后代育性分離比為1:1的小區(qū)進(jìn)行兄妹交，兄妹 交不育單株另一分枝與臨保系測(cè)交，如果兄妹交育性分離比為1:1，與臨保系測(cè)交育性分離 比為不育株100%，該兄妹交后代即為已經(jīng)改良好的高油分隱性上位互作核不育純合兩型 系。
[0007] 與已有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)： (1)傳統(tǒng)育種以常規(guī)品種或品系為雜交父本，選育獲得的不育系后期需要大量進(jìn)行組 合測(cè)配，獲得強(qiáng)優(yōu)勢(shì)雜交組合的工作量很大，而本發(fā)明選用性狀優(yōu)良且配合高的高油分常 規(guī)品系優(yōu)良單株后代作為輪回親本，是利用已知配合力高的特點(diǎn)改良不育系，有利于不育 系與恢復(fù)系種群的劃分，從而易測(cè)配強(qiáng)優(yōu)勢(shì)雜交組合。
[0008] (2)傳統(tǒng)育種直接以套袋自交為3:1的單株后代就進(jìn)行兄妹交選育兩型系，性狀及 品質(zhì)穩(wěn)定較慢，很難選育出遺傳穩(wěn)定的隱性上位互作核不育純合兩型系，而本發(fā)明是將育 性分離為3:1的B株連續(xù)套袋自交，其有育性分離比始終為3:1，其性狀及品質(zhì)穩(wěn)定較快，容 易獲得遺傳穩(wěn)定的核不育純合兩型系。
[0009] (3)該方法可操作性強(qiáng)、選育程序簡(jiǎn)單，任何科研育種單位均可采用，提高了隱性 上位核不育純合兩型系的選育效率。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0011] 實(shí)施例1: (1)選擇綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良、配合力高、含油量高、品質(zhì)雙低常規(guī)油菜材料8296，基因型 為MS1MS1MS2MS2Rf Rf，從中選擇優(yōu)良單株10株套袋自交，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì)分析后入選最優(yōu)單株5 株。
[0012] (2)把步驟（1)中所得的5個(gè)單株種子種植成5個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植200株 左右，其中第3個(gè)小區(qū)表現(xiàn)相對(duì)優(yōu)良，從中選擇可育株10株套袋自交，并收獲其中5個(gè)自交單 株種子8296，基因型為 MsiMsiMs2Ms2Rf Rf。
[0013] ( 3 )選擇待改良的隱性上位互作核不育純合兩型系5 2 6 AB，基因型為 msimsims2ms2Rf Rf X Msimsims2ms2Rf Rf 或 msimsims2ms2Rf Rf X msimsiMs2ms2Rf Rf，選擇優(yōu)良單 株進(jìn)行3對(duì)兄妹交，將3個(gè)兄妹交后代種植成3個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，從3個(gè)小區(qū) 中選一個(gè)表現(xiàn)較好的小區(qū)，并從該小區(qū)中選擇5株優(yōu)良不育單株(msimsims2ms2RfRf )作為母 本，將步驟(2)中選擇的5個(gè)優(yōu)良單株8296(18通8通8#821?1^)作為父本進(jìn)行雜交獲得5個(gè)F1 代雜交單株，其雜交后代基因型為MsunsiMsai^RfRf。
[0014] (4)將步驟(3)中獲得的5個(gè)F1代雜交單株種子種植成5個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植200 株左右，從其中一個(gè)小區(qū)選擇5株表現(xiàn)優(yōu)良的單株，以步驟(2)中的高油分、性狀優(yōu)良且配合 力高的常規(guī)材料8296(18通8通8#821?1^)自交后代5個(gè)單株為輪回親本分別與上述入選的5 個(gè)單株回交獲得5個(gè)B&F!。
[0015] (5)將步驟(4)中的回交后代BCA種植成5個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，從其 中一個(gè)小區(qū)選擇20株表現(xiàn)優(yōu)良的單株套袋自交獲得B&F2。
[0016] (6)將步驟(5)中的B&F2種植成20個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，結(jié)果發(fā) 現(xiàn)有5個(gè)小區(qū)分離出不育株，其中第1個(gè)小區(qū)分離出7株不育株，第2個(gè)小區(qū)分離出7株不育 株，第3個(gè)小區(qū)分離出8株不育株，第4個(gè)小區(qū)分離出7株不育株，第5個(gè)小區(qū)分離出8株不育 株，從有育性分離的一個(gè)小區(qū)套袋自交50個(gè)單株，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì)分析入選高油分品質(zhì)合格單 株20個(gè)。
[0017] (7)將步驟(6)中的20個(gè)單株自交后代種植成20個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有9個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有6個(gè)小區(qū)育性分離比為15:1，有5個(gè)小區(qū)育性 分離比為3:1，在育性分離比為3:1的其中一個(gè)小區(qū)內(nèi)套袋自交20個(gè)優(yōu)良單株，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì) 分析入選合格單株10株。
[0018] (8)將步驟(7)中的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株 左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有7個(gè)小區(qū)分離比均為3:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn)優(yōu)良 的小區(qū)，套袋自交20株，結(jié)合室內(nèi)品質(zhì)分析入選合格單株10個(gè)。
[0019] (9)將步驟(8)中的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植成100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有4個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有6個(gè)小區(qū)分離比均為3:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn) 優(yōu)良小區(qū)，進(jìn)行兄妹交10株，結(jié)合室內(nèi)品質(zhì)分析入選合格成對(duì)兄妹交單株10個(gè)。
[0020] (10)將步驟(9)株的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植成100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有4個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有6小區(qū)分離比均為1:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn)優(yōu) 良小區(qū)，繼續(xù)進(jìn)行兄妹交10株，同時(shí)兄妹交不育株的另一分枝與臨保系測(cè)交。經(jīng)室內(nèi)品質(zhì)分 析入選成對(duì)兄妹交5對(duì)、與臨保系測(cè)交單株5個(gè)。
[0021] (11)將步驟(10)中的全部后代種植成不同小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，結(jié)果發(fā) 現(xiàn)5對(duì)兄妹交后代育性分離比全部接近1:1，與臨保系測(cè)交后代育性分離比為不育株100%。 [0022]表1實(shí)施例1中群體兄妹交后代育性分離情況
表2實(shí)施例1中群體兄妹交可育株另一分枝與臨保系測(cè)交育性分離情況
實(shí)施例2: (1)選擇綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良、配合力高、含油量高、品質(zhì)雙低的常規(guī)油菜材料8264,基因 型為MSlMSlMS2MS2Rf Rf，從中選擇優(yōu)良單株10株套袋自交，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì)分析后入選最優(yōu)單株 5株。
[0023] (2)把步驟（1)中所得的5個(gè)單株種子種植成5個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植200株 左右，其中第3個(gè)小區(qū)表現(xiàn)相對(duì)優(yōu)良，從中選擇可育株10株套袋自交，并收獲其中5個(gè)自交單 株種子8264,基因型為 MsiMsiMs2Ms2RfRf。
[0024] ( 3 )選擇待改良的隱性上位互作核不育純合兩型系5 2 6 A B，基因型為 msimsims2ms2Rf Rf X Msimsims2ms2Rf Rf 或 msimsims2ms2Rf Rf X msimsiMs2ms2Rf Rf，選擇優(yōu)良單 株進(jìn)行3對(duì)兄妹交，將3個(gè)兄妹交后代種植成3個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，從3個(gè)小區(qū) 中選一個(gè)表現(xiàn)較好的小區(qū)，并從該小區(qū)中選擇5株優(yōu)良不育單株(msimsims2ms2RfRf )作為母 本，將步驟(2)中選擇的5個(gè)優(yōu)良單株8296(MSlMSlMs2Ms2RfRf)作為父本進(jìn)行雜交獲得5個(gè)F1 代雜交單株，其雜交后代基因型為MsunsiMssmssRfRf。
[0025] (4)將步驟(3)中獲得的5個(gè)F1代雜交單株種子種植成5個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植200 株左右，從其中一個(gè)小區(qū)選擇5株表現(xiàn)優(yōu)良的單株，以步驟(2)中的高油分、性狀優(yōu)良且配合 力高的常規(guī)材料8264(MSlMSlMs2Ms2RfRf )自交后代5個(gè)單株為輪回親本分別與上述入選的5 個(gè)單株回交獲得5個(gè)B&Fi。
[0026] (5)將步驟(4)中的回交后代BCiFi種植成5個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，從其 中一個(gè)小區(qū)選擇20株表現(xiàn)優(yōu)良的單株套袋自交獲得B&F2。
[0027] (6)將步驟(5)中的B&F2種植成20個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，結(jié)果發(fā) 現(xiàn)有5個(gè)小區(qū)分離出不育株，其中第1個(gè)小區(qū)分離出8株不育株，第2個(gè)小區(qū)分離出8株不育 株，第3個(gè)小區(qū)分離出7株不育株，第4個(gè)小區(qū)分離出8株不育株，第5個(gè)小區(qū)分離出7株不育 株，從有育性分離的一個(gè)小區(qū)套袋自交50個(gè)單株，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì)分析入選高油分品質(zhì)合格單 株20個(gè)。
[0028] (7)將步驟(6)中的20個(gè)單株自交后代種植成20個(gè)不同的小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有9個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有7個(gè)小區(qū)育性分離比為15:1，有4個(gè)小區(qū)育性 分離比為3:1，在育性分離比為3:1的其中一個(gè)小區(qū)內(nèi)套袋自交20個(gè)優(yōu)良單株，經(jīng)室內(nèi)品質(zhì) 分析入選合格單株10株。
[0029] (8)將步驟(7)中的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株 左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有6個(gè)小區(qū)分離比均為3:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn)優(yōu)良 的小區(qū)，套袋自交20株，結(jié)合室內(nèi)品質(zhì)分析入選合格單株10個(gè)。
[0030] (9)將步驟(8)中的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植成100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有3個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有7個(gè)小區(qū)分離比均為3:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn) 優(yōu)良的小區(qū)，進(jìn)行兄妹交10株，結(jié)合室內(nèi)品質(zhì)分析入選合格成對(duì)測(cè)交單株10個(gè)。
[0031] (10)將步驟(9)株的10個(gè)單株套袋自交后代種植成10個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植成100 株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有3個(gè)小區(qū)沒(méi)有育性分離，有7小區(qū)分離比均為1:1，選擇其中一個(gè)表現(xiàn)優(yōu) 良的小區(qū)，繼續(xù)進(jìn)行兄妹交10株，同時(shí)兄妹交的不育株的另一分枝與臨保系測(cè)交。經(jīng)室內(nèi)品 質(zhì)分析入選成對(duì)兄妹交5對(duì)、與臨保系測(cè)交單株5個(gè)。
[0032] (11)將步驟(10)中的全部后代種植成不同小區(qū)，每個(gè)小區(qū)種植100株左右，結(jié)果發(fā) 現(xiàn)5對(duì)兄妹交后代育性分離比全部接近1:1，與臨保系的測(cè)交后代不育株率為100%。
[0033]表3實(shí)施例2中群體兄妹交后代育性分離情況
表4實(shí)施例2中群體兄妹交可育株另一分枝與臨保系測(cè)交育性分離情況
上面對(duì)本專(zhuān)利的較佳實(shí)施方式作了詳細(xì)說(shuō)明，但是本專(zhuān)利并不限于上述實(shí)施方式，在 本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所具備的知識(shí)范圍內(nèi)，還可以在不脫離本專(zhuān)利宗旨的前提下做出各 種變化，凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明所要求的保護(hù)范圍之 內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育方法，其特征在于以 性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料為輪回親本，在回交后代選育新的隱性上位互作核 不育純合兩型系，該方法包括以下步驟： (1) 選擇性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株;性狀優(yōu)良且配合力高的高 油分常規(guī)材料優(yōu)良單株是指含油量高、品質(zhì)雙低、綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良且配合力高的常規(guī)油 菜優(yōu)良單株，其基因型為MsiMsiMs^AfeRf Rf; (2) 以步驟（1)中獲得的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株套袋自交，獲得雜交輪回親本，與隱 性上位互作核不育純合兩型系不育株雜交、回交，將回交后代群體進(jìn)行雜交、自交、測(cè)交選 育獲得新的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系，其基因型為m S1mS1mS2mS2RfRfX Msimsims2ms2Rf Rf ii!cmsimsims2ms2Rf Rf X msimsiMs2ms2Rf Rf ； (3) 將步驟(2)中獲得的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測(cè)交，獲得不 育株為100%的全不育系，從而用于高油分隱性核不育三系雜交油菜新品種選育。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘藍(lán)型油菜高油分隱性上位互作核不育純合兩型系的選育方 法，其特征在于:將待改良隱性上位互作核不育純合兩型系種植成小區(qū)，從中優(yōu)選不育單株 作母本，以性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株為父本進(jìn)行雜交，雜交后代沒(méi) 有育性分離;將雜交后代單株與所述性狀優(yōu)良且配合力高的高油分常規(guī)材料優(yōu)良單株回交 獲得B&Fi，其回交后代沒(méi)有育性分離，但有四種基因型;將B&Fi自交獲得B&F 2，其自交后代 育性分離比為1:0或15:1，如果自交后代育性分離比為15:1，則對(duì)可育株套袋自交，經(jīng)室內(nèi) 分析選擇高油分單株，在自交后代育性分離比為3:1的小區(qū)選擇優(yōu)良單株套袋自交，其自交 后代出現(xiàn)有育性分離比為3:1，連續(xù)在育性分離比為3:1的株行進(jìn)行可育株套袋自交3代后 進(jìn)行成對(duì)兄妹交，在測(cè)交后代育性分離比為1:1的小區(qū)進(jìn)行兄妹交，兄妹交不育單株另一分 枝與臨保系測(cè)交，如果兄妹交育性分離比為1:1，與臨保系測(cè)交育性分離比為不育株100%， 該兄妹交后代即為已經(jīng)改良好的高油分隱性上位互作核不育純合兩型系。
【文檔編號(hào)】A01H1/02GK105830914SQ201610229489
【公開(kāi)日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2016年4月14日
【發(fā)明人】邵明波, 周棱波, 張國(guó)兵, 汪燦, 徐燕, 白俊霞
【申請(qǐng)人】貴州粱豐農(nóng)業(yè)科技有限公司