專利名稱：同生培養(yǎng)法生產(chǎn)蘇云金桿菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蘇云金桿菌生產(chǎn)的新技術(shù)，即用二種菌--蘇云金桿菌和氧化葡萄糖酸桿菌混合同生工藝，生產(chǎn)蘇云金桿菌。
蘇云金桿菌制劑是一類應(yīng)用廣泛的生物殺蟲劑。自1938年面世以來需求量逐年上升，現(xiàn)世界上年銷售額已達(dá)10億美元。隨著現(xiàn)代無公害農(nóng)業(yè)的發(fā)展，其需求量將會(huì)出現(xiàn)更大的增長。為促進(jìn)該生物殺蟲劑的快速發(fā)展，人們曾對制約其發(fā)展的諸多問題進(jìn)行了研究，其中一個(gè)關(guān)鍵是降低成本。多年來，通過菌種選育，培養(yǎng)方式和培養(yǎng)條件的改善，生產(chǎn)成本在逐年下降，但幅度不大。價(jià)格偏高一直是影響其快速發(fā)展的一主要障礙。
本發(fā)明的目的，即針對上述情況對蘇云金桿菌與氧化葡萄糖桿菌混合同生進(jìn)行了系統(tǒng)研究，查明它們在同生中的相互間作用及最適反應(yīng)狀態(tài)，確定生產(chǎn)工藝，在高效生產(chǎn)2-酮基-L-古龍酸的同時(shí)，生產(chǎn)出蘇云金桿菌，實(shí)現(xiàn)蘇云金桿菌生產(chǎn)的超低成本。
本發(fā)明的主要技術(shù)特征是選蘇云金桿菌并與氧化葡萄糖酸桿菌1∶20～30混合，在含1～2％山梨糖種子培養(yǎng)基中，在28～33℃條件下振蕩同生培養(yǎng)20～24小時(shí)至二菌菌數(shù)之比為1/10～20，以10～15％接種量接于含山梨糖為6～14％的發(fā)酵培養(yǎng)液中，在28～33℃的條件下好氧發(fā)酵48～60小時(shí)至山梨糖含量降至1mg/ml以下，蘇云金桿菌芽孢達(dá)109～1011個(gè)/ml，發(fā)酵清液轉(zhuǎn)入2-酮基-L-古龍酸提取工藝離出菌體，殘?jiān)稍镏辽唐贩蹌?br> 本發(fā)明通過蘇云金桿菌與氧化葡萄糖酸桿菌混合同生，完好地將生物殺蟲劑與2-酮基-L-古龍酸二類生產(chǎn)融為一體，可使萬噸維生素C二步發(fā)酵廠每年從2-酮基-L-古龍酸收率提高中，增效2000～2500萬元，從產(chǎn)出的蘇云金桿菌中獲利1000萬。經(jīng)濟(jì)效益大，社會(huì)和環(huán)境效益顯著。
實(shí)施例1.分別挑取蘇云金桿菌B.tsp.529和氧化葡萄糖酸桿菌按1∶20于3升含2％山梨糖培養(yǎng)液中，在29℃條件下振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，轉(zhuǎn)入0.5M3種子罐中(內(nèi)含300升2％山梨糖種子培養(yǎng)液)，在29℃條件下培養(yǎng)至二菌菌數(shù)比為1/10～20，接入4M3發(fā)酵罐中(內(nèi)含2800升10％山梨糖發(fā)酵培養(yǎng)液)，29℃好氧發(fā)酵52小時(shí)，山梨糖降至0.68mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉(zhuǎn)化率達(dá)88.65％，較對照組合菌系提高6.4個(gè)百分點(diǎn)，生成的蘇云金桿菌芽孢3.2×1010個(gè)/ml，達(dá)到蘇云金桿菌在通常的淀粉培養(yǎng)基中形成的孢子量。制劑殺蟲效果明顯，施用適應(yīng)性強(qiáng)。
2.選蘇云金桿菌B.tsp.203與氧化葡萄糖酸桿菌混合，按上述好氧發(fā)酵48小時(shí)，山梨糖降至0.32mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉(zhuǎn)化率達(dá)85.50％，較對照組合菌系提高3.2個(gè)百分點(diǎn)，生成的蘇云金桿菌芽孢3.9×1010個(gè)/ml。
3.選蘇云金桿菌B.tsp.553與氧化葡萄糖酸桿菌混合，按上述好氧發(fā)酵48小時(shí)，山梨糖降至0.61mg/ml。2-酮基-L-古龍酸轉(zhuǎn)化率達(dá)86.44％，較對照組合菌系提高4.2個(gè)百分點(diǎn)，生成的蘇云金桿菌芽孢3.5×1010個(gè)/ml。
權(quán)利要求
1.一種同生培養(yǎng)法生產(chǎn)蘇云金桿菌，其特征在于選蘇云金桿菌與氧化葡萄糖酸桿菌1∶20～30混合，在含1～2％山梨糖種子培養(yǎng)基中，在28～33℃條件下振蕩同生培養(yǎng)20～24小時(shí)至二菌菌數(shù)之比為1/10～20，以10～15％接種量接于含山梨糖為6～14％的發(fā)酵培養(yǎng)液中，在28～33℃的條件下好氧發(fā)酵48～60小時(shí)至山梨糖含量降至1mg/ml以下，蘇云金桿菌芽孢達(dá)109～1011個(gè)/ml，發(fā)酵清液轉(zhuǎn)入2-酮基-L-古龍酸提取工序，殘?jiān)稍镏辽唐贩蹌?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及一種蘇云金桿菌生產(chǎn)的新技術(shù),即用二種菌——蘇云金桿菌和氧化葡萄糖酸桿菌混合同生工藝,生產(chǎn)蘇云金桿菌。其主要特點(diǎn)是選蘇云金桿菌與氧化葡萄糖酸桿菌混合,在含1～2%山梨糖種子培養(yǎng)基中,培養(yǎng)種液至二菌菌數(shù)之比為1/10～20,以10～15%接種量接于含山梨糖為6～14%的發(fā)酵培養(yǎng)液中,好氧發(fā)酵至山梨糖含量降至1mg/ml以下,2－酮基－L－古龍酸發(fā)酵轉(zhuǎn)化率達(dá)85～90%,生成的蘇云金桿菌芽孢達(dá)10
文檔編號C12N1/20GK1360024SQ0013434
公開日2002年7月24日 申請日期2000年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月21日
發(fā)明者張忠澤, 張成剛, 劉陽, 陳綱 申請人:張忠澤