一種玉米豆粕日糧用復(fù)合酶及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于酶制劑領(lǐng)域，具體是酶及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 名稱為一種玉米豆柏型飼料復(fù)合酶添加劑及其應(yīng)用發(fā)明專利，【申請(qǐng)?zhí)枴?201110041719. 6發(fā)明提供了一種玉米豆柏型復(fù)合酶添加劑及其應(yīng)用，復(fù)合酶添加劑由以 下組分組成：木聚糖酶10% -15% ;纖維素酶8% -15% ; 0 -甘露聚糖酶3% -8% ; a -半 乳糖苷酶5% -15%;酸性蛋白酶5% -10%;中溫淀粉酶10% -20%;糖化酶5% -10%;載 體7% -54%。本發(fā)明所述復(fù)合酶添加劑可以分解玉米豆柏中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和畜禽難以消化 的粗纖維等大量抗?fàn)I養(yǎng)因子等，從而充分發(fā)掘玉米豆柏中的能量，幫助畜禽提高對(duì)玉米豆 柏型飼料的消化能力，降低料肉比；提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和表觀代謝能，減少回腸微生物 數(shù)量；與類似添加劑相比具有高效性、專一性和添加量少等優(yōu)點(diǎn)；使用所述復(fù)合酶添加劑 可促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化效率。
[0003] 開(kāi)發(fā)玉米豆柏類飼料用的復(fù)合酶制劑有利于提高玉米豆柏型飼料的消化吸收效 率，提尚養(yǎng)殖效益，有良好的市場(chǎng)如景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題一種玉米豆柏日糧用復(fù)合酶，由以下重量份數(shù)的原料組 成：e -葡聚糖酶5-10,木聚糖酶8-10,纖維素酶8-15,中溫a -淀粉酶3-5,半乳糖苷酶 1-2,酸性蛋白酶1-2,甘露聚糖酶0.5-1，植物乳桿菌膠囊1-2,植物制劑2-4份，生姜提取物 1-2份，甘草1-2份。
[0005] 所述木聚糖酶、e -葡聚糖酶、纖維素酶、中溫a -淀粉酶等均為食品級(jí)酶制劑；
[0006] 所述植物制劑的制備方法如下：
[0007] 稱取決明子10-18份；杜仲5-15份；茯苓10-15份；分別將上述中草藥粉碎至粒 徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，添加上述混合物組分質(zhì)量 1-2%的酸性纖維素酶，控制溫度45-55°C，pH:3. 5-4,保持1-2h，隨后添加混合物料2-3倍 重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至6(TC -78°C保持3-4h，過(guò)濾；濾液真空濃縮后冷凍干 燥獲得植物制劑。
[0008] 所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為I:1-1. 5 ;乙醇濃度為95% ;丙醇濃度為100% ;
[0009] 所述生姜提取物的制備方法如下：
[0010] 將粉碎至粒徑為2毫米以下生姜置于容器中，添加3-6倍重量的水，控制溫 度50 °C -60 °C保持2-3h，添加混合物料2-3倍重量乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至 30°C -40°C保持3-8h，過(guò)濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得生姜提取物。
[0011] 所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1 :2,乙醇濃度85-95%。甲醇濃度100%。
[0012] 所述植物乳桿菌膠囊的制備方法如下：
[0013]植物乳桿菌膠囊產(chǎn)品由壁材、植物乳桿菌、凍干保護(hù)劑、水蘇糖、羊肚菌酶解粉組 成。
[0014] 所述的壁材由酶解大豆分離蛋白、殼聚糖、黃原膠、卡拉膠、甘油和海藻糖組成；上 述各物質(zhì)配成混合溶液時(shí)的濃度分別為：酶解大豆分離蛋白7-10%、殼聚糖1-2%、黃原膠 1-3 %、卡拉膠 0. 1-0. 5 %、甘油 0. 3-1 %，海藻糖 0. 5-2 %。
[0015] 酶解大豆分離蛋白的制備方法為：配制濃度為10-13%大豆分離蛋白溶液加熱到 30-45°C，調(diào)整pH到3-5,加入大豆分離蛋白重量0. 1-1 %的酸性蛋白酶保溫酶解0. 5-1. 5 小時(shí)，酶解后溶液噴霧干燥獲得酶解大豆分離蛋白。
[0016] 羊肚菌酶解粉制備方法如下：
[0017] (1)羊肚菌子實(shí)體干燥粉碎；
[0018] (2)水溶均質(zhì)：將粉碎的羊肚菌子實(shí)體加入不銹鋼筒中，加入子實(shí)體3-6倍重量的 水，浸泡3-5小時(shí)，然后將此羊肚菌子實(shí)體液通過(guò)膠體磨，膠體磨操作條件為：調(diào)整膠體磨 定子與轉(zhuǎn)子的間隙為〇. 5-1微米，膠體磨流量為0. 4-1噸/小時(shí)；
[0019] (3)升溫酶解：將經(jīng)過(guò)膠體磨處理的羊肚菌子實(shí)體液混合液轉(zhuǎn)移到不銹鋼酶解罐 中加熱到50-60°C，調(diào)整pH到4. 5-6. 0,加入羊肚菌子實(shí)體重量0. 05-0. 1 %的纖維素酶、 0. 01-0. 1%的0-葡聚糖酶、0.01-0. 1%的蛋白酶，保溫酶解0.5-1. 5小時(shí)，酶解過(guò)程中不 斷攪拌。
[0020] (4)干燥：酶解后的醪液過(guò)濾后干燥獲得羊肚菌酶解粉。
[0021] 所述干燥可以采用常規(guī)噴霧干燥、冷凍干燥等干燥形式。
[0022] 所述凍干保護(hù)劑由脫脂奶粉、海藻糖、麥芽糊精組成。
[0023] 本發(fā)明膠囊產(chǎn)品包含的植物乳桿菌優(yōu)選CGMCC NO. 9405。
[0024] 上述植物乳桿菌膠囊產(chǎn)品制備方法如下：
[0025] 1)制備芯材：向經(jīng)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的植物乳桿菌發(fā)酵液中添加發(fā)酵液質(zhì)量3-5% 的水蘇糖和5-8%的羊肚菌酶解粉，然后與凍干保護(hù)劑溶液混合，-50°C下預(yù)凍0. 5h，然后 在真空冷凍干燥機(jī)中凍干l〇_18h，凍干后研磨粉碎制成芯材；
[0026] 所述發(fā)酵液與凍干保護(hù)劑溶液的比例為1:1.4-0.8 ;所述凍干保護(hù)劑溶液由脫 脂奶粉、海藻糖、麥芽糊精溶液組成；三種溶液的體積比為脫脂奶粉：海藻糖：麥芽糊精= 3:1:0? 5;
[0027] 所述脫脂奶粉、海藻糖、麥芽糊精溶液的濃度分別為：脫脂奶粉5%，海藻糖1%， 麥芽糊精2%。
[0028] 2)包被：將芯材懸浮在流化床中，壁材噴霧包被，從一個(gè)噴頭中噴入殼聚糖、甘油 和海藻糖的混合液，從另一個(gè)噴頭中噴入黃原膠、卡拉膠和酶解大豆分離蛋白的混合液， 噴霧速度控制相同，包被過(guò)程中流化床內(nèi)溫度在25-38 °C之間，30分鐘后即形成膠囊。此干 燥方法采用專利201120503311. 1中設(shè)備處理。
[0029] 所述中溫a _淀粉酶市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)。
[0030] 本發(fā)明復(fù)合酶的制備方法如下：
[0031] 將所述甘草、植物制劑和生姜提取物分別超微粉碎，然后與木聚糖酶，纖維素酶， 0 _葡聚糖酶，淀粉酶，半乳糖苷酶，酸性蛋白酶，甘露聚糖酶，植物乳桿菌膠囊均勻混合后 密封包裝即得成品復(fù)合酶。
[0032] 所述酶適用于飼料加工廠和養(yǎng)殖場(chǎng)自配飼料，使用時(shí)應(yīng)與飼料中的其它原料混合 均勻，可事先將本發(fā)明與少量飼料混合均勻，再混合到大批飼料中，直接飼喂。建議每噸全 價(jià)料添加量為：100-150g。
[0033] 有益效果：
[0034] 本發(fā)明產(chǎn)品中采用植物制劑、生姜提取物、甘草科學(xué)復(fù)配，有效減緩了酶制劑的回 潮；同時(shí)可增強(qiáng)復(fù)合酶的耐凍、耐熱性能，保持相同的酶活力，其耐熱溫度可提高l〇_15°C， 耐冷凍溫度可降低5-10°C，有效防止了復(fù)合酶在運(yùn)輸、保存和使用過(guò)程中酶活力的損失，延 長(zhǎng)了復(fù)合酶的保質(zhì)期，達(dá)到同樣的酶活力，同類產(chǎn)品保質(zhì)期可延長(zhǎng)3-5個(gè)月。
[0035] 本發(fā)明產(chǎn)品添加的植物制劑既可延長(zhǎng)復(fù)合酶制劑的保質(zhì)期，又可提高飼養(yǎng)畜禽的 免疫力，有效防止畜禽流行性疾病的發(fā)生。
[0036] 本發(fā)明提供的乳酸菌微膠囊，其壁材中添加了改性大豆分離蛋白，改性大豆分離 蛋白比大豆分離蛋白乳化能力提高25%、膠凝能力提高15-25%，改性大豆分離蛋白黃原 膠和卡拉膠及殼聚糖的配合使用，凝膠強(qiáng)度提高了 10%以上，增強(qiáng)了膠囊的耐胃酸性；本 發(fā)明膠囊采用改性大豆分離蛋白，具有很好的腸溶性，膠囊到達(dá)腸道后在1-1. 5小時(shí)內(nèi)即 可完全崩解釋放出植物乳桿菌，并迅速增殖成為優(yōu)勢(shì)菌群，從而達(dá)到抑制病原菌生長(zhǎng)等作 用。
[0037] 本發(fā)明產(chǎn)品中保護(hù)劑與酶制劑、植物制劑、生姜提取物與酶制劑的共同協(xié)同作用， 使得復(fù)合酶的酶活力和效力最大限度的發(fā)揮，并相應(yīng)的提高了飼料的利用率和動(dòng)物的生長(zhǎng) 率，增強(qiáng)了動(dòng)物的食欲和抗病能力，延長(zhǎng)了產(chǎn)品的保質(zhì)期和保護(hù)了環(huán)境。有效降解飼料中的 纖維素、木聚糖、0 -葡聚糖等非淀粉多糖抗?fàn)I養(yǎng)因子，降低食糜粘度，防腹瀉。促進(jìn)植物細(xì) 胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)釋放，提高飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。補(bǔ)充畜禽體內(nèi)內(nèi)源酶的分泌不足，促進(jìn)營(yíng) 養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收.提高飼料利用率。
[0038] 促進(jìn)腸道有益菌的生長(zhǎng)而抑制有害菌的繁殖，提高動(dòng)物免疫力和飼養(yǎng)成功率。平 衡原料批次差異化，穩(wěn)定飼料品質(zhì)。
【具體實(shí)施方式】
[0039] 下面通過(guò)具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說(shuō)明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段 均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說(shuō)明性的，而非限制本發(fā)明的 范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書(shū)所限定。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本 發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對(duì)這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動(dòng)也 屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0040] 實(shí)施例1
[0041] 本發(fā)明所用植物乳桿菌CGMCC No. 9405的選育過(guò)程如下：
[0042]原始出發(fā)菌種一試管活化一硫酸二乙酯（DES)誘變一亞硝基胍（NTG)誘變一等離 子體誘變一平板初篩一搖瓶復(fù)篩一傳代穩(wěn)定性試驗(yàn)。
[0043] 本發(fā)明所采用的出發(fā)菌株在MRS葡萄糖培養(yǎng)基中，其乳酸的生產(chǎn)速率為I. 5g/L/ d，當(dāng)培養(yǎng)基pH為3. 5時(shí)幾乎停止生長(zhǎng)，對(duì)亞硝酸鈉的分解速率為0. 34mg/h/kg白菜。出發(fā) 菌株由李政采集于寧夏鹽池縣育肥羊場(chǎng)的青儲(chǔ)飼料，采集時(shí)間2013年9月15日。
[0044] 為了提高其乳酸生產(chǎn)速率、耐酸能力和亞硝酸鹽的分解速率，依次采用DES和NTG 技術(shù)對(duì)該菌種進(jìn)行誘變，誘變后菌株采用MRS碳酸鈣平板進(jìn)行初篩，然后采用500mL搖瓶發(fā) 酵，生物傳感器分析儀對(duì)高產(chǎn)菌進(jìn)行復(fù)篩，選育優(yōu)良的植物乳桿菌菌株，然后做傳代實(shí)驗(yàn)， 評(píng)價(jià)其遺傳穩(wěn)定性。
[0045] 植物乳桿菌tlj-2014遺傳穩(wěn)定性結(jié)果表明：經(jīng)過(guò)連續(xù)傳代十