專利名稱：一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種花椒提取物。
背景技術(shù)：
解脲支原體及人型支原體引起的泌尿生殖道感染，在性傳播疾病中發(fā)病率最高， 不僅可以引起廣泛的非淋菌性生殖道感染，如前庭大腺炎、腔道炎、宮頸炎等下生殖道感 染，也可引起子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、卵巢炎、盆腔炎等上生殖道感染，導(dǎo)致不孕、不育及胎 兒宮內(nèi)感染、流產(chǎn)等不良后果。男性可并發(fā)前列腺炎、附睪炎、女性宮頸與輸卵管炎等。由于 支原體缺乏細(xì)胞壁，所以青霉素、β -內(nèi)酰胺類藥物等干擾細(xì)胞壁合成的抗生素治療基本無(wú) 效；支原體對(duì)影響細(xì)胞蛋白合成的抗生素敏感，如四環(huán)素、喹諾酮類以及大環(huán)內(nèi)酯類藥物， 所以臨床上一般將這3類藥物作為治療支原體感染的首選藥。而近年越來(lái)越多的報(bào)道顯示解脲支原體(UU)對(duì)此3類藥物的耐藥性有逐年增 加的趨勢(shì)，由于耐藥性的出現(xiàn)，抗生素的療效顯著下降，例如解脲支原體對(duì)四環(huán)素耐藥率 1996年僅為8. 6%，2000年則上升為46. 4%，2006年12月上升為68. 3 %。環(huán)丙沙星的耐 藥率為80%，對(duì)左氧氟沙星耐藥率在26. 8% 48. 3%之間。對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類藥物如紅霉素維 持在30% 50%的水平。同類藥物羅紅霉素和阿奇霉素的療效如今也不容樂(lè)觀。對(duì)羅紅 霉索耐藥水平最高達(dá)到77. 8%，而阿奇霉素為66. 7%。臨床上持續(xù)性、復(fù)發(fā)性泌尿生殖道 感染及耐藥問(wèn)題已經(jīng)成為日益常見(jiàn)和棘手的問(wèn)題，按目前的發(fā)展趨勢(shì)，抗生素在對(duì)耐藥解 脲支原體感染疾病的治療上，將面臨無(wú)藥可醫(yī)的局面。同樣的人型支原體也存在著對(duì)抗生 素類藥物的耐藥性逐年增加的問(wèn)題。傳統(tǒng)中醫(yī)藥在此類疾病的治療上有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和很好的療效，其特色在于強(qiáng)調(diào)整 體，辨證論治。中醫(yī)藥治療支原體感染雖有很多優(yōu)勢(shì)，但大多停留在臨床大處方用藥上，且 在治療上存在著病程長(zhǎng)、療程長(zhǎng)、服用不便之弊，因此目前尚無(wú)無(wú)此類藥物開(kāi)發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決目前解脲支原體和人型支原體對(duì)抗生素的耐藥性增加，而導(dǎo)致治 療效果差的問(wèn)題，提供一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物。本發(fā)明具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物是由以下方法提 取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為30 55°C，分離溫 度為25 45°C，萃取壓力為15 35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2流量為4 12L/h，萃 取時(shí)間為1 2小時(shí)，即得到花椒提取物。本發(fā)明的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物的優(yōu)點(diǎn)如下1、本發(fā)明的花椒提取物通過(guò)安全性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)可知該產(chǎn)品安全無(wú)毒副作用；2、使用以本發(fā)明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對(duì)感染解脲支原體 和人型支原體標(biāo)準(zhǔn)株的小鼠進(jìn)行治療，治療10天后，感染率由原來(lái)的100%降低到20%，由此可知，本發(fā)明的花椒提取物具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用；3、使用以本發(fā)明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對(duì)感染解脲支原體 耐藥株的小鼠進(jìn)行治療，治療10天后，感染率由原來(lái)的100%降低到20%，而陽(yáng)性對(duì)照組 (環(huán)丙沙星栓)的感染率僅降低到80% ；使用以本發(fā)明的花椒提取物為原料的花椒提取物 中藥制劑對(duì)感染人型支原體耐藥株的小鼠進(jìn)行治療，治療10天后，感染率由原來(lái)的100% 降低到20%，而陽(yáng)性對(duì)照組(環(huán)丙沙星栓)的感染率僅降低到90%;由此可知，本發(fā)明的花 椒提取物具有抗耐藥解脲支原體和耐藥人型支原體感染作用；4、使用以本發(fā)明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑進(jìn)行止癢和抗炎作 用研究，與空白對(duì)照相比有顯著性差異，說(shuō)明花椒提取物具有止癢和抗炎作用。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的 任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒 提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫 度為30 55°C，分離溫度為25 45°C，萃取壓力為15 !35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2 流量為4 12L/h，萃取時(shí)間為1 2小時(shí)，即得到花椒提取物。本實(shí)施方式所述的花椒提取物可以與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成口服 (丸劑、顆粒劑、口服液、片劑、膠囊或軟膠囊)、外用(灌洗劑、凝膠劑、栓劑、噴霧劑或泡騰 劑)或無(wú)菌注射液的劑型。其中可接受的載體為可可豆油、半合成甘油脂肪酸酯類、甘油、 明膠、泊洛沙姆、羊毛脂、硬脂酸聚烴氧GO)酯、蜂蠟、半合成甘油脂肪酸酯類、可可豆脂、 香果脂類、氫化油類、聚乙二醇類、泊洛沙姆、殼聚糖、吐溫、卡波姆類、微晶纖維素、糊精、淀 粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精等。本實(shí)施方式的花椒提取物通過(guò)安全性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)可知該產(chǎn)品安全無(wú)毒副作用；使 用以本實(shí)施方式的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對(duì)感染解脲支原體和人型支 原體標(biāo)準(zhǔn)株的小鼠進(jìn)行治療，治療10天后，感染率由原來(lái)的100%降低到20%，由此可知， 本實(shí)施方式的花椒提取物具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用；使用以本實(shí)施方式的 花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對(duì)感染解脲支原體耐藥株的小鼠進(jìn)行治療，治療 10天后，感染率由原來(lái)的100%降低到20%，而陽(yáng)性對(duì)照組(環(huán)丙沙星栓)的感染率僅降 低到80% ；使用以本實(shí)施方式的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對(duì)感染人型支原 體耐藥株的小鼠進(jìn)行治療，治療10天后，感染率由原來(lái)的100%降低到20%，而陽(yáng)性對(duì)照組 (環(huán)丙沙星栓)的感染率僅降低到90 % ；由此可知，本實(shí)施方式的花椒提取物具有抗耐藥解 脲支原體和耐藥人型支原體感染作用；使用以本實(shí)施方式的花椒提取物為原料的花椒提取 物中藥制劑進(jìn)行止癢和抗炎作用研究，與空白對(duì)照相比有顯著性差異，說(shuō)明花椒提取物具 有止癢和抗炎作用。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是萃取溫度為35 50°C。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是萃取溫度為40 45°C。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是萃取溫度為40°C。其 它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是分離溫度為 30°C。其它與具體實(shí)施方式
一至四之一相同。
具體實(shí)施方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是分離溫度為 35 40°C。其它與具體實(shí)施方式
一至四之一相同。
具體實(shí)施方式
七本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 20 30MPa。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 22 ^MPa。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
九本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 25MPa。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
十本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 33MPa。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
十一本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十之一不同的是分離壓力 為5MPa。其它與具體實(shí)施方式
一至十之一相同。
具體實(shí)施方式
十二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十一之一不同的是C02流量 為6 10L/h。其它與具體實(shí)施方式
一至十一之一相同。
具體實(shí)施方式
十三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十一之一不同的是C02流量 為8L/h。其它與具體實(shí)施方式
一至十一之一相同。
具體實(shí)施方式
十四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至十三之一不同的是萃取時(shí) 間為1.5小時(shí)。其它與具體實(shí)施方式
一至十三之一相同。
具體實(shí)施方式
十五本實(shí)施方式的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花 椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界(X)2萃取釜中，萃取 溫度為40V,分離溫度為30°C，萃取壓力為33MPa，分離壓力為5MPa，0)2流量為8L/h，萃取 時(shí)間為1. 5小時(shí)，即得到花椒提取物。按照重量份數(shù)比稱取20份本實(shí)施方式提取的花椒提取物與等量吐溫80混勻，得 混合物，另取80份聚氧乙烯單硬脂酸酯(S40)，置水浴上加熱使其溶化，加入到上述混合物 中，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，即得到花椒提取物中藥制劑。將制得的花椒提取物中 藥制劑用50°C水浴溶化，然后再稀釋至相應(yīng)濃度，進(jìn)行試驗(yàn)。為說(shuō)明本實(shí)施方式制備的花椒提取物的有效性和安全性，進(jìn)行以下試驗(yàn)l、Balb/c小鼠生殖道解脲支原體標(biāo)準(zhǔn)株的感染及花椒提取物中藥制劑干預(yù)試驗(yàn)， 具體試驗(yàn)方法如下a、取Balb/c小鼠的陰道分泌物進(jìn)行培養(yǎng)，選取解脲支原體陰性者，正 常喂養(yǎng)，適應(yīng)環(huán)境3天；b、小鼠頸部皮下注射苯甲酸雌二醇0. 2mg/次/只，每周一次，連續(xù) 四次；c、在第二周注射雌性激素的同時(shí)，用微量移液器吸取解脲支原體標(biāo)準(zhǔn)株20yL，置入 小鼠陰道約0. 5cm處，將解脲支原體標(biāo)準(zhǔn)株菌液注入小鼠陰道，每天接種一次，連續(xù)3天，每 次接種菌濃度為5Xl(f(XU/mL ；感染一周后，取陰道分泌物培養(yǎng)，解脲支原體陽(yáng)性者，視為 造模成功；解脲支原體陰性者，繼續(xù)接種菌株，量同前，1周后進(jìn)行UU(解脲支原體)培養(yǎng)， 所有培養(yǎng)基均變?yōu)榉奂t色，顯示造模成功；d、將造模成功小鼠隨機(jī)分為模型組、治療組、陽(yáng)性對(duì)照組，每組10只，另設(shè)10只不感染解脲支原體的正常對(duì)照組，每天給予相應(yīng)的藥物治 療，連續(xù)10天，給藥M小時(shí)后，取陰道分泌物進(jìn)行解脲支原體培養(yǎng)，觀察藥物對(duì)解脲支原體 感染的治療作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。正常對(duì)照組給予相應(yīng)的空白基質(zhì)；模型對(duì)照組給予相應(yīng)的空白基質(zhì)；陽(yáng)性對(duì)照組給予環(huán)丙沙星栓；治療組陰道給予上述花椒提取物中藥制劑40mg (其中含相當(dāng)于花椒0. 2g的花椒 提取物)。表1小鼠生殖道解脲支原體的感染及花椒提取物中藥制劑干預(yù)試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物，其特征在于具有抗解 脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉 末狀，裝入超臨界(X)2萃取釜中，萃取溫度為30 55°C，分離溫度為25 45°C，萃取壓力為 15 35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2流量為4 12L/h，萃取時(shí)間為1 2小時(shí)，即得到 花椒提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取溫度為35 50°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取溫度為40 45°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提 取物，其特征在于分離溫度為30°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提 取物，其特征在于分離溫度為35 40°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取壓力為20 30MPa。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取壓力為25MPa。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于分離壓力為5MPa。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于(X)2流量為6 10L/h。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取時(shí)間為1. 5小時(shí)。
全文摘要
一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物，涉及一種花椒提取物。本發(fā)明是要解決目前解脲支原體和人型支原體對(duì)抗生素的耐藥性增加，而導(dǎo)致治療效果差的問(wèn)題。本發(fā)明的花椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為30～55℃，分離溫度為25～45℃，萃取壓力為15～35MPa，分離壓力為4～6MPa，CO2流量為4～12L/h，萃取時(shí)間為1～2小時(shí)，即得到花椒提取物。本發(fā)明的花椒提取物無(wú)毒，具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用及抗耐藥解脲支原體和耐藥人型支原體感染作用。應(yīng)用于抗支原體感染領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61K36/758GK102058709SQ201110022658
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2011年1月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月20日
發(fā)明者潘五九, 王偉明 申請(qǐng)人:黑龍江省中醫(yī)研究院