本發(fā)明屬于天然植物有效成分提取分離制備領(lǐng)域，涉及一種羅漢果提取物的制備方法，尤其涉及一種羅漢果苷v含量大于40%的羅漢果提取物的制備方法。

背景技術(shù)：

羅漢果是羅漢果屬葫蘆科植物的果實(shí)，是一種多用途藥食同源藥材。羅漢果味極甜、性涼、無毒，入脾肺經(jīng)，具有清肺止咳、潤腸通便、清熱解毒、益肝健脾、鎮(zhèn)靜止渴、促進(jìn)胃腸道機(jī)能、抗病毒、抗腫瘤、降糖降壓等多種藥理功效。大量研究資料表明，羅漢果不僅含有多種藥理活性成分，且可以作為低糖含量的甜味劑使用，因此目前被廣泛應(yīng)用于食品、保健品、醫(yī)藥、飲料、化妝品行業(yè)。

羅漢果中含有多種皂苷類活性成分，其中羅漢果苷v是主要指標(biāo)性成分之一，羅漢果皂苷苷元具有典型的葫蘆烷型四環(huán)三萜結(jié)構(gòu)。羅漢果苷v可以作為評價(jià)羅漢果提取物質(zhì)量優(yōu)劣的指標(biāo)性成分，因?yàn)槠滠赵Y(jié)合了糖基而易溶于水、乙醇等極性溶劑，難溶于丙酮、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑，終產(chǎn)物為白色無定形粉末。

關(guān)于羅漢果提取物制備的研究主要集中在國內(nèi)，相關(guān)專利文獻(xiàn)報(bào)道較多，但真正能夠應(yīng)用于生產(chǎn)的較少，主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：（1）過程繁瑣，收率低下；（2）使用大量有機(jī)溶劑，對設(shè)備要求高，投入大；（3）工藝過程能耗大，成本高；（4）工序中引入其他物質(zhì)，影響產(chǎn)品質(zhì)量。如cn101029071b公開了從羅漢果中制備高純度羅漢果苷v的方法，該方法是將羅漢果干果進(jìn)行醇提、濃縮、經(jīng)乙酸乙酯、正丁醇萃取，然后使用硅膠柱、c18反相硅膠柱層析、干燥后得高純度甜苷v產(chǎn)品，該方法主要缺陷為工藝繁瑣、溶劑損耗大、收率低，不利于規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)；cn100572552c公開了羅漢果苷v≥40%的羅漢果提取物及其制備方法，該方法是將羅漢果鮮果水提、濃縮、酶解、大孔樹脂吸附、離子交換樹脂脫色，最后經(jīng)濃縮干燥得產(chǎn)品，該方法由于在上柱前未進(jìn)行過濾，導(dǎo)致樹脂的后續(xù)處理成本較大，不利于連續(xù)化生產(chǎn)；cn101407535b公開了一種高純度羅漢果甜甙v的制備方法，該方法是使用一定純度的羅漢果提取物為原料，經(jīng)甲醇溶解、丙酮萃取、正相硅膠吸附、分離、結(jié)晶與重結(jié)晶獲得最終產(chǎn)品，該方法工藝簡單，但過程中使用了大量的有機(jī)溶劑，對生產(chǎn)場所的要求較高，此外獲得的產(chǎn)品也有一定的有機(jī)溶劑殘留，影響品質(zhì)；cn101863946b公開了一種干羅漢果提取高含量羅漢果甜甙v的方法，該方法是將羅漢果干果破碎后，經(jīng)醇提、濃縮、離心、大孔樹脂吸附分離、離子交換樹脂脫色、最后經(jīng)濃縮、干燥，得成品，此方法由于未經(jīng)過濾處理，使得上柱液中大分子雜質(zhì)較多，影響樹脂的吸附性能，利用率低且后續(xù)處理難度相對較大，產(chǎn)品成本較高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種適用于工業(yè)化大生產(chǎn)的羅漢果提取物制備方法，該方法能夠解決上述現(xiàn)有制備技術(shù)的缺陷，能夠連續(xù)化生產(chǎn)且具有成本低、能耗低、收率高、安全高效等特點(diǎn)。

一種羅漢果提取物的制備方法，包括以下步驟：

（1）藥材前處理：將羅漢果適當(dāng)破碎，破碎后的物料以羅漢果籽不碎為度；

（2）連續(xù)逆流提?。簩⑵扑樘幚砗蟮牧_漢果輸入連續(xù)逆流管式提取機(jī)中，逆向輸入純凈水，其中水與藥材質(zhì)量比為5-8:1，并保持連續(xù)逆流提取管溫度為45-85℃，提取30-60min，得到羅漢果提取液；

（3）離心過濾：將得到的羅漢果提取液輸入液渣分離裝置，按40-100kg/h進(jìn)行壓榨分離除去大顆粒料渣，然后輸入高速離心裝置，以2000-6000r/min的速度離心20-60min，得到羅漢果提取物離心液；

（4）除色：將離心液導(dǎo)入強(qiáng)堿性陰離子大孔脫色樹脂，用純化水洗脫至流出液無甜味為止，得到羅漢果提取物脫色液，其中脫色樹脂用量為離心液體積的0.01-0.1倍，優(yōu)選地為0.05-0.8倍；

（5）聚合物樹脂分離精制：將脫色液導(dǎo)入聚合物樹脂富集精制，用20%-80%乙醇水溶液洗脫至流出液無甜味為止，得到最終羅漢果富集液，其中聚合物樹脂用量為脫色液的0.02-0.08倍，優(yōu)選地為0.04-0.06倍；

（6）濃縮噴霧干燥：將富集液真空減壓85℃以下濃縮到密度為1.12-1.25g/ml，然后再噴霧干燥得到最終成品，成品為白色無定形粉末或者類白色物質(zhì)，其中羅漢果苷v含量≥40%。本成品可以進(jìn)一步精制得到羅漢果苷v含量更高的羅漢果提取物。

進(jìn)一步地，步驟（4）中所述脫色樹脂選用d151、d303、s-8、d-309、lx-700、d290或xda-7樹脂，其中優(yōu)選d303、d290或lx-700樹脂；所述脫色樹脂柱徑高比為1:2-1:10，其中優(yōu)選為1:3-1:5。

進(jìn)一步地，步驟（5）中所述聚合物樹脂是指以苯乙烯、甲基丙烯酸酯或苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物為基質(zhì)的聚合物填料，優(yōu)選基質(zhì)為苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物，所選填料粒徑為5μm-300μm，優(yōu)選地為50μm-150μm，所選填料孔徑為100?-1000?，優(yōu)選地為300-500?。

本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)：

1.本發(fā)明將羅漢果破碎處理后直接采取連續(xù)逆流提取的方式進(jìn)行提取，大大簡省提取步驟，且可以連續(xù)生產(chǎn)，一邊進(jìn)樣一邊出渣。制備過程中全程采用低毒無害的純水或者含水乙醇作為提取精制溶劑，生產(chǎn)高效安全，對于生產(chǎn)場地、設(shè)備的要求低，適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

2.本發(fā)明采用強(qiáng)堿性陰離子大孔樹脂進(jìn)行初步的脫色和除雜處理后直接導(dǎo)入以苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物為基質(zhì)的微球型填料進(jìn)行進(jìn)一步的分離精致，最終濃縮噴霧干燥得到終產(chǎn)物，整個(gè)過程連續(xù)進(jìn)行，所用樹脂容易再生重復(fù)利用，極大的提高了制備效率，節(jié)省了時(shí)間、簡化了過程，有利于過程控制和質(zhì)量控制，非常適合工業(yè)化生產(chǎn)。

3.終產(chǎn)物有效成分含量高，雜質(zhì)含量低，所得羅漢果提取物中羅漢果苷v含量≥40%。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例旨在進(jìn)一步說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制，一切基于本發(fā)明所做出的改進(jìn)皆在本發(fā)明范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

（1）藥材前處理：將羅漢果1000kg適當(dāng)破碎，破碎后的物料以羅漢果籽不碎為度；

（2）連續(xù)逆流提?。簩⑵扑樘幚砗蟮牧_漢果輸入連續(xù)逆流管式提取機(jī)中，按溶劑藥材質(zhì)量比8:1逆向輸入8倍于藥材質(zhì)量的純凈水，并保持連續(xù)逆流提取管溫度為65℃，提取45min，得到羅漢果提取液；

（3）離心過濾：將得到的羅漢果提取液輸入液渣分離裝置，按80kg/h進(jìn)行壓榨分離除去大顆粒料渣，然后輸入高速離心裝置，以4500r/min的速度離心30min，得到羅漢果提取物離心液；

（4）除色：將離心液導(dǎo)入d303脫色樹脂，用純化水洗脫至流出液無甜味為止，得到羅漢果提取物脫色液，其中脫色樹脂用量為離心液體積的0.03倍；

（5）聚合物樹脂分離精制：將脫色液導(dǎo)入以苯乙烯為基質(zhì)的聚合物填料中富集精制，用50%的食用乙醇洗脫至流出液無甜味為止，得到最終羅漢果富集液，其中苯乙烯聚合物樹脂用量為脫色液的0.04倍；

（6）濃縮噴霧干燥：將富集液真空減壓85℃以下濃縮到密度為1.12-1.25g/ml，然后再噴霧干燥得到最終成品，成品為白色無定形粉末或者類白色物質(zhì)，其中羅漢果苷v含量為45.23%。

實(shí)施例2

（1）藥材前處理：將500kg羅漢果適當(dāng)破碎，破碎后的物料以羅漢果籽不碎為度；

（2）連續(xù)逆流提?。簩⑵扑樘幚砗蟮牧_漢果輸入連續(xù)逆流管式提取機(jī)中，以溶劑藥材質(zhì)量比6:1的比例逆向輸入6倍于藥材質(zhì)量的純凈水，并保持連續(xù)逆流提取管溫度為55℃，提取30min，得到羅漢果提取液；

（3）離心過濾：將得到的羅漢果提取液輸入液渣分離裝置，按60kg/h進(jìn)行壓榨分離除去大顆粒料渣，然后輸入高速離心裝置，以2000r/min的速度離心55min，得到羅漢果提取物離心液；

（4）除色：將離心液導(dǎo)入d290脫色樹脂，用純化水洗脫至流出液無甜味為止，得到羅漢果提取物脫色液，其中脫色樹脂用量為離心液體積的0.05倍；

（5）聚合物樹脂分離精制：將脫色液導(dǎo)入以甲基丙烯酸酯為基質(zhì)的聚合物填料中富集精制，用35%的食用乙醇洗脫至流出液無甜味為止，得到最終羅漢果富集液，其中苯乙烯聚合物樹脂用量為脫色液的0.06倍；

（6）濃縮噴霧干燥：將富集液真空減壓85℃以下濃縮到密度為1.12-1.25g/ml，然后再噴霧干燥得到最終成品，成品為白色無定形粉末或者類白色物質(zhì)，其中羅漢果苷v含量為49.56%。

實(shí)施例3

（1）藥材前處理：將羅漢果800kg適當(dāng)破碎，破碎后的物料以羅漢果籽不碎為度；

（2）連續(xù)逆流提取：將破碎處理后的羅漢果輸入連續(xù)逆流管式提取機(jī)中，以溶劑藥材質(zhì)量比6:1逆向輸入純化水，并保持連續(xù)逆流提取管溫度為45℃，提取30min，得到羅漢果提取液；

（3）離心過濾：將得到的羅漢果提取液輸入液渣分離裝置，按88kg/h進(jìn)行壓榨分離除去大顆粒料渣，然后輸入高速離心裝置，以6000r/min的速度離心30min，得到羅漢果提取物離心液；

（4）除色：將離心液導(dǎo)入lx-700脫色樹脂，用純化水洗脫至流出液無甜味為止，得到羅漢果提取物脫色液，其中脫色樹脂用量為離心液體積的0.05倍；

（5）聚合物樹脂分離精制：將脫色液導(dǎo)入以苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物為基質(zhì)的聚合物填料中富集精制，用65%的食用乙醇洗脫至流出液無甜味為止，得到最終羅漢果富集液，其中苯乙烯聚合物樹脂用量為脫色液的0.06倍；

（6）濃縮噴霧干燥：將富集液真空減壓85℃以下濃縮到密度為1.12-1.25g/ml，然后再噴霧干燥得到最終成品，成品為白色無定形粉末或者類白色物質(zhì)，其中羅漢果苷v含量為42.38%。