本發(fā)明涉及一種土壤復(fù)合物，尤其涉及一種微生態(tài)土壤復(fù)合物的制備方法。

背景技術(shù)：

該發(fā)明是基于衛(wèi)生假說理論，衛(wèi)生假說(hygienehypothesis)是一種醫(yī)學(xué)假說，指因缺少接觸傳染源、共生微生物(如胃腸道菌群，益生菌)與寄生物，從而抑制了免疫系統(tǒng)的正常發(fā)展，增加了免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病發(fā)病率。1989年，strachan發(fā)現(xiàn)兄弟姐妹較多的家庭，花粉癥較少發(fā)生，在總結(jié)前人的報(bào)導(dǎo)以及基于相關(guān)調(diào)查數(shù)據(jù)，提出‘hygienehypothesis’這個(gè)概念。研究衛(wèi)生假說發(fā)生原因，有人發(fā)現(xiàn)無菌鼠免疫系統(tǒng)發(fā)育不全，極微量的病原菌就可以導(dǎo)致無菌鼠的感染死亡。目前的衛(wèi)生假說研究進(jìn)一步證明，衛(wèi)生假說除與免疫系統(tǒng)疾病相關(guān)外，還與孤獨(dú)癥、癌癥、糖尿病的發(fā)生相關(guān)。孤獨(dú)癥是近年來發(fā)生率逐年增加的一種大腦廣泛發(fā)育障礙，患者多數(shù)生活不能自理，對(duì)家庭對(duì)社會(huì)帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。美國發(fā)生率1975年為5000分之一，而2014年已增長為1/68。究其原因，初步研究表明，其發(fā)生機(jī)理為：過于清潔導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂，免疫因子分泌失調(diào)，而免疫因子是神經(jīng)發(fā)育的重要調(diào)控因子，如長期使用干擾素可引起抑郁癥。還有多項(xiàng)報(bào)導(dǎo)，過于清潔還可以導(dǎo)致白血病與皮膚病癌的發(fā)生。

由于人體中的微生物，腸道微生物最為豐富多樣，而胃腸道具有人體最大的免疫組織，包括派伊爾淋巴集結(jié)(peyer’spatch)和腸系膜淋巴結(jié)(mesentericlymphnod(mln))，腸道微生物通過對(duì)該免疫組織的影響在影響著全身免疫系統(tǒng)的發(fā)育。近些年來，支持衛(wèi)生假說理論的研究不斷得以報(bào)導(dǎo)。最新的研究表明，腸道微生物與免疫系統(tǒng)疾病、多種腸道疾病和孤獨(dú)癥關(guān)系密切，而土壤與土壤微生物是影響腸道微生物群落結(jié)構(gòu)的重要因素。過于清潔易患免疫系統(tǒng)疾病，不清潔又容易引起各種感染，本發(fā)明通過提供制備微生態(tài)土壤復(fù)合物的方法，可以彌補(bǔ)現(xiàn)代人生活環(huán)境過于清潔而造成的微生物和土壤的缺失，又阻止病原微生物和人體接觸的機(jī)會(huì)，從而通過微生態(tài)土壤復(fù)合物達(dá)到治療與預(yù)防疾病發(fā)生的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的在于提供了一種能夠通過人體自帶的微生態(tài)和土壤相結(jié)合形成的微生態(tài)土壤復(fù)合物的制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種微生態(tài)土壤復(fù)合物的制備方法，包括以下步驟：

s1、選擇至少一個(gè)健康指標(biāo)均正常的成年人，采集糞便并進(jìn)行病原微生物與寄生蟲檢測和篩選，低溫冷藏備用；

s2、糞便微生物群落培養(yǎng)基配制：選取含有豐富的可食用纖維素、糖、蛋白、脂肪和各種維生素的食物，按照纖維素：淀粉：蛋白質(zhì)：脂肪的干重比為10～15：40～45：30～40：5～15配制，粉碎后高壓滅菌，制成培養(yǎng)基，冷卻后備用；

s3、將步驟s1中篩選得到的糞便樣品在厭氧條件下接種到步驟s2制備得到的糞便微生物群落培養(yǎng)基中，在37～40℃溫度的厭氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得到糞便微生物群落；

s4、將采集得到的沒有受到人類與牲畜污染的一種或者一種以上的土壤微生物群落，按一定比例接種于類似土質(zhì)并進(jìn)行高壓滅菌后的土壤培養(yǎng)基中，在無菌環(huán)境下擴(kuò)大培養(yǎng)；

s5、分別將步驟s3中得到的糞便微生物群落和步驟s4中擴(kuò)大培養(yǎng)得到的至少一種土壤微生物群落分離出來，并制備成凍干粉；

s6、采集沒有受到污染的無菌土壤，無菌土壤中重金屬和有毒物污染物含量達(dá)到食品級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行高壓滅菌，冷卻后備用；

s7、將步驟s5制備得到的凍干粉、步驟s6制備得到的無菌土壤以及輔料按一定比例混合均勻，得到微生態(tài)土壤復(fù)合物。

進(jìn)一步的，所述糞便微生物群落包括細(xì)菌、真菌、古細(xì)菌、病毒和寄生蟲中的一種或者多種。

進(jìn)一步的，糞便樣品為病原微生物和致病性寄生蟲陰性糞便樣品。

進(jìn)一步的，所述無菌土壤為紅土、黃土、黑土和褐土中的一種或者多種。

進(jìn)一步的，所述輔料為天然無毒的有機(jī)材料和無機(jī)材料中的一種或者多種。

更進(jìn)一步的，所述有機(jī)材料為蛋白、脂肪、糖、淀粉和纖維素中的一種或者多種。

更進(jìn)一步的，所述無機(jī)材料為草木灰和滑石粉中的一種或者多種。

本發(fā)明提供的微生態(tài)土壤復(fù)合物的制備方法能夠制備一種具有調(diào)節(jié)人體皮膚粘膜或腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)與組成作用的微生態(tài)土壤復(fù)合物，用于制作成膠囊、散劑、玩具或游樂與治療的場所，本發(fā)明還通過采集經(jīng)檢測健康指標(biāo)均合格的人體糞便，利用糞便中腸道微生物分泌的大量多種神經(jīng)遞質(zhì)與神經(jīng)遞質(zhì)前體物，補(bǔ)充人體所需的多種微生物，增加人體微生態(tài)的穩(wěn)定性，從而起到疾病的治療與預(yù)防作用。

上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，并可依照說明書的內(nèi)容予以實(shí)施，以下以本發(fā)明的較佳實(shí)施例詳細(xì)說明如后。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例一微生態(tài)土壤復(fù)合物玩具

s1、選擇目前可以檢測的健康指標(biāo)均正常的20～30歲成年人一人，采集糞便100克，并進(jìn)行病原微生物和致病性寄生蟲陰性樣本檢測和篩選，低溫冷藏備用；

s2、選取含有豐富的可食用纖維素、糖、蛋白、脂肪和各種維生素的食物，按照纖維素：淀粉：蛋白質(zhì)：脂肪的干重比為10～15：40～45：30～40：5～15配制，進(jìn)行粉碎后，混合，再加入0.5～1倍混合物重量的超純水，攪拌均勻，高壓滅菌，制成培養(yǎng)基，冷卻后備用；

s3、將50克糞便厭氧條件下接種到5千克培養(yǎng)基中，厭氧條件下37℃條件下培養(yǎng)30天；

s4、經(jīng)高通量測序檢測，采集不含大腸桿菌、多種腸道細(xì)菌、病原微生物種類，也沒有人類與牲畜污染的無污染土壤微生物群落，按1：10000比例接種于相類似土質(zhì)高壓滅菌后的土壤培養(yǎng)基中，在無菌環(huán)境下擴(kuò)大培養(yǎng)12個(gè)月；

s5、分別將步驟s3中得到的糞便微生物群落和步驟s4中擴(kuò)大培養(yǎng)得到的土壤微生物群落分離出來，并制備成凍干粉；

s6、采集無污染的無菌土壤，無菌土壤中重金屬和有毒物污染物含量達(dá)到食品級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，高壓滅菌，冷卻后備用；

s7、微生物群落凍干粉：淀粉：無菌土壤按照重量比為1：100：10000進(jìn)行混合均勻；

s8、將混合物摻水制備成油泥，供幼兒使用。

實(shí)施例二微生態(tài)土壤復(fù)合物游樂場

s1、選擇健康20～50歲健康成年人10人，健康指標(biāo)均正常，每人采集糞便60克，并進(jìn)行病原微生物和致病性寄生蟲陰性樣本檢測和篩選，低溫冷藏備用；

s2、選取含有豐富的可食用纖維素、糖、蛋白、脂肪和各種維生素的食物，按照纖維素：淀粉：蛋白質(zhì)：脂肪的干重比為10～15：40～45：30～40：5～15的范圍內(nèi)制備不同培養(yǎng)基，進(jìn)行粉碎后，混合，再加入0.5～1倍混合物重量的超純水，攪拌均勻，高壓滅菌，制成不同的培養(yǎng)基，冷卻后備用；

s3、將每份50克糞便在厭氧條件下分別接種到5千克不同培養(yǎng)基中，這樣，每一種培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的菌群種類不同，厭氧條件下37℃條件下培養(yǎng)30天；

s4、從全國不同區(qū)域、不同土質(zhì)和氣候10個(gè)地方采集沒有人類與牲畜污染的土壤10份，每份按1：10000比例接種于對(duì)應(yīng)的類似土質(zhì)高壓滅菌后的土壤培養(yǎng)基中，在無菌環(huán)境下擴(kuò)大培養(yǎng)6～12個(gè)月；

s5、分別將步驟s3中得到的糞便微生物群落和步驟s4中擴(kuò)大培養(yǎng)得到的土壤微生物群落分離出來，并制備成凍干粉；

s6、采集無污染的無菌土壤，無菌土壤中重金屬和有毒物污染物含量達(dá)到食品級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，高壓滅菌，冷卻后備用；

s7、微生物群落凍干粉：草木灰：無菌土壤按照1：50：1000比例混合均勻；

s8、將混合物制備成沙坑，供嬰幼兒娛樂使用。

為了證明本發(fā)明實(shí)施例二中供體的健康情況，提供供體身體健康指標(biāo)表，見下表：

通過本發(fā)明提供的微生態(tài)土壤復(fù)合物的制備方法制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物中具有增加人體微生物群落多樣性和調(diào)節(jié)微生物群落結(jié)構(gòu)組成作用的微生物，由于現(xiàn)代生活方式過于清潔，人體所接觸的微生物數(shù)量與種類較少，導(dǎo)致人體微生態(tài)多樣性降低，微生態(tài)環(huán)境易于被抗生素等破壞，進(jìn)而導(dǎo)致微生態(tài)紊亂和多種疾病的發(fā)生。

本發(fā)明制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物與普通的土壤相較，優(yōu)勢(shì)在于：

1)本發(fā)明制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物具有調(diào)節(jié)人體皮膚粘膜或腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)與組成作用：研究發(fā)現(xiàn)，土壤對(duì)人體皮膚粘膜與腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)與類型具有重要影響，且對(duì)人體微生物的影響無可替代。傳統(tǒng)的放牧與農(nóng)耕時(shí)代，人們?cè)谏a(chǎn)過程中可接觸足夠量的土壤與灰塵來維持人體健康，但隨著人類生活方式的改變，生活中已完全摒棄土壤與灰塵，因此導(dǎo)致人體微生態(tài)的失調(diào)，進(jìn)一步引起各種疾病的發(fā)生；本發(fā)明將制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物制作成膠囊、散劑、玩具或游樂與治療的場所，通過食用、皮膚表面涂抹和兒童玩耍等方式與土壤接觸，用于調(diào)節(jié)人體微生態(tài)的結(jié)構(gòu)與組成，從面達(dá)到預(yù)防與治療疾病的作用。

2)本發(fā)明制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物含有腸道微生物群落和土壤微生物群落，這些微生物具有增加人體微生物群落多樣性和調(diào)節(jié)微生物群落結(jié)構(gòu)組成的作用：多項(xiàng)研究表明，人類生活環(huán)境中的微生物是人體微生物群落的重要來源。由于現(xiàn)代生活方式過于清潔，所接觸的微生物數(shù)量與種類較少，導(dǎo)致人體微生態(tài)多樣性降低，微生態(tài)環(huán)境易于被抗生素等破壞，進(jìn)而導(dǎo)致微生態(tài)紊亂和多種疾病的發(fā)生；該項(xiàng)發(fā)明可以及時(shí)補(bǔ)充人體所需的多種微生物，增加人體微生態(tài)的穩(wěn)定性，從而起到疾病的治療與預(yù)防作用。

3)本發(fā)明制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物通過調(diào)節(jié)人體微生態(tài)，有進(jìn)一步刺激免疫系統(tǒng)發(fā)育的功能：近年來多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，人體免疫系統(tǒng)的健康發(fā)育與維持，需要多種人體體表與粘膜表面的微生物不斷刺激，人體微生物種類降低，免疫系統(tǒng)將得不到充分的刺激，易于引起免疫失衡，進(jìn)而引起相關(guān)疾病的發(fā)生。

4)本發(fā)明通過調(diào)節(jié)人體微生態(tài)和刺激免疫系統(tǒng)發(fā)育，進(jìn)一步影響兒童大腦發(fā)育的功能：人體免疫因子參與神經(jīng)發(fā)育，因此免疫系統(tǒng)參與神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)控。本發(fā)明通過采集經(jīng)檢測健康指標(biāo)均合格的人體糞便，利用糞便中腸道微生物分泌的大量多種神經(jīng)遞質(zhì)與神經(jīng)遞質(zhì)前體物，補(bǔ)充人體所需的多種微生物，增加人體微生態(tài)的穩(wěn)定性；另外，由于微生態(tài)土壤復(fù)合物可以調(diào)節(jié)人體免疫系統(tǒng)的發(fā)育，因此間接調(diào)控了人體神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，因此，本發(fā)明制備的微生態(tài)土壤復(fù)合物通過調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)也起著直接的調(diào)節(jié)作用從而起到疾病的治療與預(yù)防作用。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，并不用于限制本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變型，這些改進(jìn)和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。