本發(fā)明涉及中醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種鮮地黃飲片及其制備方法和質(zhì)量控制方法。

背景技術(shù)：

1、鮮地黃來源于玄參科植物地黃(rehmannia?glutinosa?libosch.)的新鮮塊根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。鮮品藥材質(zhì)地新鮮，保持天然狀態(tài)和成分結(jié)構(gòu)，具有有效成分含量高、療效優(yōu)的優(yōu)勢。鮮地黃在傳統(tǒng)中醫(yī)臨床應(yīng)用歷史悠久，如張仲景《金匱要略》百合地黃湯和防己地黃湯、吳鞠通《溫病條辨》清營湯、孫思邈《千金要方》犀角地黃湯、陳自明《婦人大全良方》四生丸等均以鮮地黃入藥。中醫(yī)臨床認(rèn)為，鮮地黃甘苦大寒，具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津功效，清熱生津涼血功效優(yōu)于生地黃，善治血熱邪盛高熱煩渴及吐血、衄血、咳血等多種血熱出血證。現(xiàn)代研究表明，鮮地黃中梓醇、還原糖、寡糖和多糖的含量高于生地黃；鮮地黃汁、鮮地黃煎液對誘導(dǎo)小鼠凝血時間的作用明顯強(qiáng)于生地黃。鮮地黃多糖可以通過升高多巴胺(dopamine，da)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric?acid，gaba)的含量，抑制甲狀腺軸和腎上腺軸功能亢進(jìn)從而起到抗焦慮作用；同時能夠通過降低血漿黏度，減輕血熱出血的熱癥，改善異常的血液流變學(xué)，起到?jīng)鲅寡墓π?。梓醇不僅具有抗氧化、抗炎、抗細(xì)胞凋亡的作用，且可通過多種信號通路保護(hù)心腦血管系統(tǒng)，還對高血糖引起的腎損傷具有顯著的保護(hù)作用。

2、然而，鮮地黃因儲存不易，現(xiàn)中醫(yī)臨床日漸少用?！吨袊幍洹?020年版中“鮮地黃”和“生地黃”合并收載于地黃項下；但地黃標(biāo)準(zhǔn)中，鮮地黃僅有性狀規(guī)定，薄層鑒別項未明確前處理方法，檢查項中總灰分、酸不溶性灰分和浸出物項未明確鮮地黃的限度，含量測定項僅有生地黃含量測定方法和標(biāo)準(zhǔn)，而鮮地黃缺少相應(yīng)的質(zhì)量控制方法和標(biāo)準(zhǔn)。這一切都是源于鮮地黃難以保存，理論上可用于臨床，但是事實上沒有可保存的實物供研究和應(yīng)用。雖然有文獻(xiàn)報道了鮮地黃片的制備方法，但目前報道方法均為冷凍干燥法，冷凍干燥成本高，工業(yè)化制備費用難以承受，為此該方法也僅僅停留于實驗研究。因此，急需開發(fā)一種簡便價廉而又能保持鮮地黃品質(zhì)的鮮地黃飲片制備方法并制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以為臨床提供質(zhì)量可控穩(wěn)定的鮮地黃使用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種鮮地黃飲片及其制備方法和質(zhì)量控制方法，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下方案：

3、本發(fā)明提供了一種鮮地黃飲片的制備方法，包括對鮮地黃片依次進(jìn)行煮制和干燥，得到所述鮮地黃飲片的步驟；

4、所述煮制的時間為1-10min。

5、優(yōu)選的，所述干燥的溫度為45℃-80℃，時間為24h。

6、優(yōu)選的，所述干燥的方式為鼓風(fēng)干燥。

7、優(yōu)選的，所述鮮地黃片的厚度為2-4mm。

8、本發(fā)明提供了一種利用上述方法制備得到的鮮地黃飲片。

9、本發(fā)明提供了一種上述的鮮地黃飲片的質(zhì)量控制方法，包括：

10、(1)對所述鮮地黃飲片進(jìn)行形狀觀察；

11、(2)對所述鮮地黃飲片進(jìn)行粉末顯微鑒別；

12、(3)對所述鮮地黃飲片的水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物進(jìn)行檢測；所述鮮地黃飲片的水分不超過10.0％，總灰分不超過4.0％，酸不溶性灰分不超過0.30％，浸出物不得少于65.0％；

13、(4)對所述鮮地黃飲片進(jìn)行薄層色譜鑒別；

14、(5)對所述鮮地黃飲片中梓醇、地黃苷d和水蘇糖的含量進(jìn)行高效液相色譜檢測；所述鮮地黃飲片中梓醇的含量不得少于2.6％，地黃苷d的含量不少于0.20％，水蘇糖的含量不得少于50.0％。

15、優(yōu)選的，所述薄層色譜鑒別包括方法1、方法2和方法3；

16、所述方法1包括取供試品溶液和梓醇對照品溶液點于硅膠g薄層板上，以三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液為展開劑，展開，噴茴香醛試液，加熱，并于日光下觀察的步驟；所述供試品溶液的制備方法包括將待測樣品粉末和乙醇溶液混合，依次進(jìn)行加熱回流、過濾和濃縮，得到所述供試品溶液的步驟；所述梓醇對照品溶液的制備方法包括將梓醇對照品與甲醇混合，得到所述梓醇對照品溶液的步驟；所述梓醇對照品溶液中梓醇的濃度為0.5mg/ml；

17、所述方法2包括取供試品溶液和毛蕊花糖苷對照品溶液點于硅膠g薄層板上，以乙酸乙酯、甲醇和甲酸的混合溶液為展開劑，展開，采用0.1％的2,2-二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾干，并于日光下觀察的步驟；所述供試品溶液的制備方法包括將待測樣品粉末和乙醇溶液混合，依次進(jìn)行超聲處理和正丁醇提取，得到所述供試品溶液的步驟；所述毛蕊花糖苷對照品溶液的制備方法包括將毛蕊花糖苷對照品與甲醇混合，得到所述毛蕊花糖苷對照品溶液的步驟；所述毛蕊花糖苷對照品溶液中毛蕊花糖苷的濃度為1mg/ml；

18、所述方法3包括取供試品溶液和含水蘇糖、棉子糖和蔗糖的對照品溶液點于硅膠g薄層板上，以冰乙酸、無水甲酸、水和乙酸乙酯的混合溶液為展開劑，展開，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱，并于365nm紫外光燈下觀察的步驟；所述供試品溶液的制備方法包括將待測樣品粉末和乙醇溶液混合，依次進(jìn)行超聲處理和過濾，得到所述供試品溶液的步驟；所述含水蘇糖、棉子糖和蔗糖的對照品溶液的制備方法包括將水蘇糖對照品、棉子糖對照品和蔗糖對照品與甲醇混合，得到所述含水蘇糖、棉子糖和蔗糖的對照品溶液的步驟；所述含水蘇糖、棉子糖和蔗糖的對照品溶液中水蘇糖的濃度為1mg/ml，棉子糖的濃度為1mg/ml，蔗糖的濃度為1mg/ml。

19、優(yōu)選的，在所述方法1中，所述展開劑中三氯甲烷、甲醇和水的體積比為14:6:1；所述加熱的溫度為105℃；所述茴香醛試液中茴香醛的濃度為10.7mg/ml；所述待測樣品粉末和乙醇溶液的質(zhì)量體積比為1g:20ml；

20、在所述方法2中，所述展開劑中乙酸乙酯、甲醇和甲酸的體積比為16:0.5:2；所述2,2-二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液中2,2-二苯基-1-苦肼基的濃度為0.1％；所述待測樣品粉末和乙醇溶液的質(zhì)量體積比為1g:50ml；

21、在所述方法3中，所述展開劑中冰乙酸、無水甲酸、水和乙酸乙酯的體積比為4:5:6:12；所述硫酸乙醇溶液中硫酸的濃度為10％；所述待測樣品粉末和乙醇溶液的質(zhì)量體積比為1g:25ml。

22、優(yōu)選的，所述薄層色譜鑒別包括方法a、方法b和方法c；

23、所述方法a包括吸取梓醇對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)行色譜檢測的步驟；所述梓醇對照品溶液的制備方法包括將所述梓醇對照品和甲醇混合，得到所述梓醇對照品溶液的步驟；所述梓醇對照品溶液中梓醇的濃度為50μg/ml；所述供試品溶液的制備方法包括將所述待測樣本粉末和甲醇混合，依次進(jìn)行加熱回流提取、過濾、濃縮、溶解和過濾，得到所述供試品溶液的步驟；

24、所述方法b包括吸取地黃苷d對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)行色譜檢測的步驟；所述地黃苷d對照品溶液的制備方法包括將所述梓醇對照品和甲醇混合，得到所述地黃苷d對照品溶液的步驟；所述地黃苷d對照品溶液中地黃苷d的濃度為70μg/ml；所述供試品溶液的制備方法包括將所述待測樣本粉末和甲醇混合，依次進(jìn)行超聲處理、離心和過濾，得到所述供試品溶液的步驟；

25、所述方法c包括吸取水蘇糖對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)行色譜檢測的步驟；所述水蘇糖對照品溶液的制備方法包括將所述水蘇糖對照品和甲醇混合，得到所述水蘇糖對照品溶液的步驟；所述水蘇糖對照品溶液中梓醇的濃度為1mg/ml；所述供試品溶液的制備方法包括將所述待測樣本粉末和甲醇混合，依次進(jìn)行超聲處理和過濾，得到所述供試品溶液的步驟。

26、優(yōu)選的，在所述方法a中，所述色譜檢測的條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；色譜柱為xb-c18；柱溫為30℃；流速為1ml/min；進(jìn)樣量為10μl；以甲醇-0.1％(v/v)磷酸溶液為流動相進(jìn)行洗脫；檢測波長為210nm；

27、在所述方法b中，所述色譜檢測的條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；色譜柱為xb-c18；柱溫為30℃；流速為1ml/min；進(jìn)樣量為10μl；以甲醇-0.1％磷酸溶液為流動相進(jìn)行洗脫；檢測波長為203nm；

28、在所述方法c中，所述色譜檢測的條件為：以叔胺烷基鍵合硅膠為填充劑；色譜柱為cosmosil?sugar-d色譜柱；柱溫為30℃；流速為1ml/min；進(jìn)樣量為10μl；以乙腈-水為流動相進(jìn)行洗脫。

29、本發(fā)明公開了以下技術(shù)效果：

30、本發(fā)明在鮮地黃傳統(tǒng)飲片的基礎(chǔ)上，以外觀性狀、梓醇含量、地黃苷d含量和水蘇糖含量為評價指標(biāo)，優(yōu)化了鮮地黃飲片的炮制方法，該炮制方法為：將鮮地黃藥材除去雜質(zhì)，洗凈泥沙，切片(2-4mm)，在沸水中煮1-10min后撈出，45℃-80℃干燥24h，即得鮮地黃飲片。本發(fā)明的提出為鮮地黃飲片的生產(chǎn)加工及市場開發(fā)提供依據(jù)。

31、利用本發(fā)明提供的制備方法制備得到的鮮地黃飲片外觀為焦黃色類圓形薄片。外表皮棕黃色，稍皺縮；切面棕黃色，皮部淺黃紅色，偶見橘紅色油點，木部黃白色；氣微，味微苦；鮮地黃飲片粉末淡黃色；木栓細(xì)胞淡黃色；薄壁細(xì)胞類圓形，內(nèi)含類圓形核狀物，分泌細(xì)胞性狀與一般薄壁細(xì)胞相似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物；具緣紋孔導(dǎo)管和網(wǎng)紋導(dǎo)管直徑約至92μm。利用本發(fā)明提供的制備方法制備得到的鮮地黃飲片不僅符合2020年版《中國藥典》地黃項下的各項標(biāo)準(zhǔn)，梓醇含量不得低于2.6％，薄層色譜圖上在與對照品水蘇糖、棉子糖和蔗糖相同位置處出現(xiàn)相應(yīng)顏色的斑點，且水蘇糖的含量不低于50.0％。鮮地黃飲片的制備和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定可為臨床提供質(zhì)量穩(wěn)定可控的鮮地黃，一改因為難以保存而臨床鮮地黃逐漸絕跡的窘?jīng)r。同時，本發(fā)明還建立了鮮地黃飲片的新質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。