含兒茶素的藥物在制備抑菌藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別地，涉及包括兒茶素在內(nèi)的藥物，在制備抑菌藥物中的 用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 女性生殖器官天然溫濕潤(rùn)，易滋生微生物。正常情況下，通過(guò)人體的自熱構(gòu)造和化 學(xué)環(huán)境可以起到防護(hù)作用，從而免于病變。一方面，外陰部?jī)蓚?cè)大陰唇自然合攏遮掩陰道 口，使外源微生物難以進(jìn)入；在陰道內(nèi)，由于骨盆底肌肉的作用，使陰道前后壁緊貼，陰道口 閉合，可在一定程度上防止外界的污染。另一方面，在雌激素的影響下，陰道上皮細(xì)胞不斷 新陳代謝、增生變厚，增加了對(duì)病原體的抵御力；同時(shí)，在陰道桿菌的作用下，陰道上皮細(xì)胞 中富含的糖原可分解為乳酸，以維持陰道正常的酸性環(huán)境，使適應(yīng)于弱堿環(huán)境中繁殖的病 原體受到抑制。因此，健康婦女的陰道內(nèi)雖有一些細(xì)菌存在，但通常不引起炎癥。
[0003] 正常情況下，陰道內(nèi)以陰道桿菌占優(yōu)勢(shì)，還有少量厭氧菌、支原體及念珠菌，上述 菌群形成一定的生態(tài)平衡。但是，當(dāng)人體免疫力低下、內(nèi)分泌激素發(fā)生變化，或外來(lái)因素如 組織損傷、性交，破壞了陰道的生態(tài)平衡時(shí)，這些常住的菌群可能引起陰道感染，而且來(lái)自 于外界的病原微生物也可能趁虛而入。此外，伴隨年齡增長(zhǎng)、分娩等因素，女性陰道會(huì)逐漸 松弛，也會(huì)增加外源微生物侵入的風(fēng)險(xiǎn)。
[0004] 當(dāng)發(fā)生此類婦科疾病時(shí)，除了依靠自身免疫系統(tǒng)之外，通常應(yīng)當(dāng)配合藥物治療，例 如可以內(nèi)服抗生素，外用抑菌藥物等。由于此類感染不同于體內(nèi)器官感染，其發(fā)病位置處于 體表，因此外用藥物療效更加直接。現(xiàn)有技術(shù)的陰道抑菌藥物，可以分為兩大類別，其中一 類是以抗生素為有效成分的抑菌藥物，此類藥物起效較快，但易發(fā)生耐受性，且對(duì)微生物的 抑制不具有選擇性，因此在停藥后需要較長(zhǎng)時(shí)間重新構(gòu)建陰道菌群，在此過(guò)程中易發(fā)生再 次感染；另一類抑菌藥物以中藥組合物為有效成分，其優(yōu)勢(shì)在于對(duì)皮膚刺激較小、不存在微 生物耐受現(xiàn)象，但缺陷在于部分藥物療效不確切且起效較慢。
[0005] 兒茶素又稱兒茶精，茶單寧。為黃烷醇的衍生物，分子式C15H1406,呈無(wú)色結(jié)晶形 固體，能溶于水；其水溶液受熱或在無(wú)機(jī)酸存在下，容易聚合成無(wú)定形鞣質(zhì)?，F(xiàn)有技術(shù)中，有 研究表明兒茶素具有抗氧化、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等作用，因此已被用于作為減肥藥物和抗衰老 藥物，此外還有報(bào)道稱兒茶素具有降血壓、降血糖等功效?，F(xiàn)有技術(shù)中并未有見(jiàn)有兒茶素單 體化合物具有抑菌作用的報(bào)道，更未見(jiàn)將其制備成陰道抑菌藥物的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明旨在針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中，抗菌藥物選擇性較差、治療范圍較窄、治療藥物存在 副作用等的技術(shù)缺陷，提供有效的、無(wú)明顯不良反應(yīng)抗菌藥物的技術(shù)方案，具體為：
[0007] 本發(fā)明提供了一種抑菌的藥物，包括兒茶素，如式（I)所示：
[0008]
[0009] 進(jìn)一步的，所述抑菌藥物為抑制體內(nèi)病原菌的藥物；
[0010] 進(jìn)一步的，所述抑菌藥物為抑制陰道內(nèi)病原菌的藥物；
[0011] 進(jìn)一步的，所述抑菌藥物為降低陰道內(nèi)病原菌數(shù)量的藥物；
[0012] 進(jìn)一步的，本發(fā)明所述的抗菌作用包括對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠 菌、綠膿桿菌、溶血性鏈球菌等在內(nèi)的多種病原微生物的作用。
[0013] 另一方面，針對(duì)兒茶素結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易發(fā)生性質(zhì)改變、影響藥效的技術(shù)缺陷，本發(fā) 明還提供了一種兒茶素微晶體，能夠提供穩(wěn)定的抑菌的藥物。該微晶體兒茶素使用Cu-Ka 輻射，以2 Θ角度表示的X射線粉末衍射光譜特征如表1所示：
[0014] 表1兒茶素 X射線粉末衍射光譜特征
[0016] -方面，兒茶素在其藥物組合物中的含量為0. 1-95重量％ ;更優(yōu)選的，兒茶素在 其藥物組合物中含量為〇. 1-75重量％ ;更優(yōu)選的，兒茶素在其藥物組合物中含量為0. 1-50 重量％ ;更優(yōu)選的，兒茶素在其藥物組合物中含量為〇. 1-25重量％ ;更優(yōu)選的，兒茶素在其 藥物組合物中含量為0. 1-15重量％ ;更優(yōu)選的，兒茶素在其藥物組合物中含量為0. 1-10重 量％。
[0017] 本發(fā)明通過(guò)將兒茶素與一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或載體結(jié)合，制成 適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。兒茶素或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給 藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射等。給藥劑型可以是液 體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑（包括真溶液和膠體溶液）、乳劑 (包括0/V型、w/ο型和復(fù)乳）、混懸劑、注射劑（包括水針劑、粉針劑和輸液）等；固體劑型 可以是片劑（包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片）、膠囊劑（包 括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊）、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、氣（粉）霧劑、噴霧劑等。
[0018] 兒茶素可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給 藥系統(tǒng)。
[0019] 優(yōu)選的，在以上技術(shù)方案中，所述的藥物是外用藥；所述藥物包括但不限于粘膜給 藥劑型；進(jìn)一步優(yōu)選的，所述劑型為陰道粘膜給藥劑型，陰道粘膜給藥在全身治療方面具有 很多優(yōu)勢(shì)，比如可以避免首過(guò)效應(yīng)，降低蛋白酶對(duì)藥物的水解，促滲劑選自非離子型表 面活性劑，包括膽酸鹽，甘油酯、有機(jī)酸、聚多卡醇、卵磷脂、氯化棕櫚酰肉毒堿等；更優(yōu)選 的，所述劑型包括散劑、霜?jiǎng)④浉鄤?、凝膠劑、乳劑、洗劑、栓劑、泡騰片或搽劑等。根據(jù)其劑 型，本發(fā)明的藥物組合物可應(yīng)用各種藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)輔料，包括賦形劑、透皮劑和止癢劑中的 一種或多種。所述的賦形劑為本領(lǐng)域常規(guī)輔料，較佳的為液狀石蠟、單硬脂酸甘油醋、硬脂 酸、聚乙烯醇、卡波姆和羧甲基纖維素中的一種或多種。所述的透皮劑為本領(lǐng)域常規(guī)輔料， 用以促進(jìn)皮膚吸收，較佳的為十二烷基硫酸鈉和/或氮酮。所述的止癢劑為本領(lǐng)域常規(guī)輔 料，較佳的為薄荷油和/或冰片。除上述輔料外，本發(fā)明的藥物組合物還可含有抗菌作用的 藥物活性成分，作為復(fù)方制劑使用。
[0020] 具體藥理實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果如下：
[0021] (一）兒茶素的抑菌作用
[0022] 1)兒茶素對(duì)白色念珠菌的體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)：采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，體 外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，兒茶素對(duì)白色念珠菌具有顯著地抑制作用，兒茶素水溶液 作用5min，對(duì)白色念珠菌的平均抑菌率為91. 24%，20min以后對(duì)白色念珠菌的抑制率高達(dá) 99%以上，受試樣品對(duì)白色念珠菌有較強(qiáng)抑菌作用。
[0023] 2)兒茶素對(duì)大腸桿菌的體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)：采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，體外 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，兒茶素對(duì)大腸桿菌具有顯著地抑制作用，兒茶素水溶液作用 lOmin，對(duì)大腸桿菌的平均抑菌率為91. 24%，受試樣品對(duì)大腸桿菌有較強(qiáng)抑菌作用。
[0024] 3)兒茶素對(duì)金黃色葡萄球菌的體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)：采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí) 驗(yàn)，體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，兒茶素對(duì)金黃色葡萄球菌具有顯著地抑制作用，兒 茶素水溶液作用2min，對(duì)金黃色葡萄球菌的平均抑菌率即達(dá)到98%以上，受試樣品對(duì)金黃 色葡萄球菌有較強(qiáng)抑菌作用。
[0025] 4)兒茶素對(duì)綠膿桿菌的體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)：采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，體外 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，兒茶素對(duì)綠膿桿菌具有顯著地抑制作用，兒茶素水溶液作用 lOmin，對(duì)綠膿桿菌的平均抑菌率即達(dá)到90%以上，受試樣品對(duì)綠膿桿菌有較強(qiáng)抑菌作用。
[0026] 5)兒茶素對(duì)溶血性鏈球菌的體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)：采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)， 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，兒茶素對(duì)溶血性鏈球菌具有顯著地抑制作用，兒茶素水 溶液作用5min，對(duì)溶血性鏈球菌的平均抑菌率即達(dá)到90%以上，受試樣品對(duì)溶血性鏈球菌 有較強(qiáng)抑菌作用。
[0027](二）兒茶素對(duì)于體內(nèi)正常菌群的影響
[0028] 采用瓊脂培養(yǎng)法進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著時(shí)間推移，發(fā)現(xiàn)兒茶素水 溶液作用20min以上，對(duì)乳酸桿菌的平均抑菌率僅為3. 27%，受試樣品對(duì)乳酸桿菌不具有 的抑菌作用。
[0029](三）兒茶素的抗性實(shí)驗(yàn)
[0030] 采用細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測(cè)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兒茶素 水溶液的細(xì)菌菌落總數(shù)、大腸菌群、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、溶血性鏈球菌、真菌菌落總 數(shù)符合規(guī)定。
[0031] (四）兒茶素對(duì)于陰道粘膜的作用實(shí)驗(yàn)
[0032] 采用陰道黏膜刺激試驗(yàn)，對(duì)受試動(dòng)物進(jìn)行粘膜刺激實(shí)驗(yàn)，與空白組對(duì)照表明，染毒 組各小組均未見(jiàn)充血、水腫，結(jié)果顯示兒茶素對(duì)陰道粘膜無(wú)刺激性作用。
[0033] 綜上所述，本發(fā)明具有以下有益效果：兒茶素具有較廣泛的抗菌譜，能夠?qū)Πń?黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌、綠膿桿菌、溶血性鏈球菌等在內(nèi)的多種致病微生物 起到確切的抑制效果；且兒茶素對(duì)微生物的抑制作用體現(xiàn)出了一定的選擇性，不破壞人體 內(nèi)正常菌群，降低重復(fù)感染的概率；另一方面，本發(fā)明還驗(yàn)證了兒茶素對(duì)陰道粘膜無(wú)刺激作 用，進(jìn)一步證明了兒茶素尤其適于作用陰道的抑菌藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明了，下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本 發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)該理解，這些描述只是示例性的，而并非要限制本發(fā)明的范圍。此 外，在以下說(shuō)明中，省略了對(duì)公知結(jié)構(gòu)和技術(shù)的描述，以避免不必要地混淆本發(fā)明的概念。 [0035] 除有定義外，以下實(shí)施例中所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人 員普遍理解的相同含義。
[0036] 實(shí)施例1 :兒茶素對(duì)白色念珠菌抑菌效果實(shí)驗(yàn)
[0037] -、器材
[0038] 試驗(yàn)菌株：對(duì)白色念珠菌（ATCC 10231)，中國(guó)普通微生物菌種保藏中心提供，第4 代。
[0039] 試驗(yàn)樣品：兒茶素水溶液（濃度5g/L)
[0040] 磷酸鹽緩沖液（PBS 0· 03moL/L，ρΗ7· 2)
[0041] 培養(yǎng)基：沙氏瓊脂培養(yǎng)基。
[0042] 二、方法
[0043] 檢驗(yàn)依據(jù)：GB15979-2002。
[0044] 檢測(cè)條件：試驗(yàn)環(huán)境溫度20°C，重復(fù)次數(shù)3次。
[0045] 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0046] 抑菌效果如下表所示：
[0047] 表1兒茶素對(duì)白色念珠菌抑菌效果實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0049] 注：陽(yáng)性對(duì)照組菌數(shù)為 5. 35X 104cfu/mL(4. 8X 104 ~5. 8X 104cfu/mL)。
[0050] 四、結(jié)論
[0051] 依據(jù)GB15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》，兒茶素水溶液作用5min，對(duì) 白色念珠菌的平均抑菌率為91. 24%，受試樣品對(duì)白色念珠菌有較強(qiáng)抑菌作用。
[0052] 實(shí)施例2 :兒茶素對(duì)大腸桿菌抑菌效果實(shí)驗(yàn)
[0053] (一）器材
[0054] 試驗(yàn)菌株：大腸桿菌（8099)，預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院消毒檢測(cè)中心提供，第4代
[0055] 試驗(yàn)樣品：兒茶素水溶液（濃度3g/L)
[0056] 磷酸鹽緩沖液（PBS 0· 03moL/L，ρΗ7· 2)
[0057] 培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
[0058] (二）方法
[0059] 檢驗(yàn)依據(jù)：GBl5979_2〇〇2
[0060] 檢測(cè)條件：試