AXL/c-Met抑制劑在制備逆轉腎癌舒尼替尼耐藥的藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種AXL/c-Met抑制劑在制備逆轉腎癌舒尼替尼耐藥的藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]腎癌(renal cell carcinoma，RCC)是中國發(fā)病率第二的泌尿系統(tǒng)腫瘤。約20-30%的腎癌患者在診斷時已經(jīng)處于晚期，而約30%的原位腎癌患者在術后會出現(xiàn)復發(fā)、轉移。目前，以舒尼替尼為代表的受體型酪氨酸激酶(RTK)抑制劑是晚期腎癌的主要治療手段。舒尼替尼是一種口服、多靶點的酪氨酸激酶抑制劑，其主要靶點包括血管內皮生長因子受體(VEGFR)、血小板源性生長因子受體(TOGFR)、干細胞生長因子受體(KIT)、FMS樣酪氨酸激酶3 (FLT3)，具有抑制血管生成和抑制腫瘤細胞生長的雙重作用。盡管舒尼替尼能顯著縮減腫瘤體積，但大部分患者在治療6-15月后會出現(xiàn)耐藥，導致腫瘤進展復發(fā)，使舒尼替尼不能有效延長晚期腎癌患者的生存期。因此闡明腎癌舒尼替尼耐藥的分子機制將有助于逆轉腫瘤耐藥，改善患者預后。
[0003]大量研究表明，酪氨酸激酶代償性擴增、活化是耐藥產(chǎn)生的常見機制之一。AXL (GENBANK 號 NM_001699.5)和 c_Met (GENBANK 號 NM_001127500.1)均屬于受體型酪氨酸激酶，兩者具有相似的激酶結構域，能夠活化相似的信號通路。據(jù)報道，代償性擴增的AXL、c-Met參與了非小細胞肺癌、乳腺癌等腫瘤對表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑產(chǎn)生的耐藥(參見文獻 Zhang Z, , et al.Activat1n of the AXL kinase causes resistanceto EGFR-targeted therapy in lung cancer[J].Nature Genetics，2012，44(8)，852-860 ;Meyer A S，et al.The receptor AXL diversifies EGFR signaling and limits theresponse to EGFR-targeted inhibitors in triple-negative breast cancer cells[J].Science signaling，2013，6 (287): 1-14.)。BMS777607，AXL 和 c_Met 的雙重抑制劑，目前已處于多項臨床試驗中，用于實體腫瘤的單藥治療(參見文獻Schroeder G M, etal.Discovery of N_(4_(2-amino-3-chloropyridin-4-yloxy)-3-fluorophenyl)-4-ethoxy-1- (4-fluorophe nyl)-2-oxo-l，2-dihydropyridine-3-carboxamide(BMS-777607)，aselective and orally efficac1us inhibitor of the Met kinase superfamily[J].Journal of medicinal chemistry, 2009, 52(5):1251-1254.)
[0004]目前AXL和c-Met在腎癌耐藥中的研究較少，AXL/c-Met抑制劑用于逆轉腎癌舒尼替尼耐藥也尚未見文獻報道。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明的一個目的是提供AXL/c-Met抑制劑新的醫(yī)藥用途。
[0006]本發(fā)明的另一個目的是提供AXL/c-Met抑制劑在制備逆轉腎癌舒尼替尼耐藥的藥物中的應用。
[0007]本發(fā)明提供了一種預防腎癌舒尼替尼耐藥的方法。
[0008]本發(fā)明前期建立了舒尼替尼耐藥的腎癌細胞株7SuR、ACSuR并保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(典藏號:CCTCC C2014217，CCTCC C2014238)。通過檢測多個受體型酪氨酸激酶的表達情況，我們發(fā)現(xiàn)耐藥細胞7SuR、ACSuR中AXL和c_Met顯著活化，并且干擾AXL和c-Met表達或使用AXL/c-Met抑制劑BMS777607能夠使耐藥細胞恢復對舒尼替尼的反應性，但干擾AXL或c-Met中的某一個并不能逆轉耐藥，提示AXL和c_Met共同參與了腎癌細胞對舒尼替尼的耐藥。
[0009]此外，我們還發(fā)現(xiàn)，用舒尼替尼聯(lián)合AXL/c-Met抑制劑處理荷有普通腎癌細胞的裸鼠，其移植瘤生長被持續(xù)抑制，未對舒尼替尼產(chǎn)生耐藥性。
[0010]以上結果提示，AXL/c-Met抑制劑可用于逆轉腎癌舒尼替尼耐藥，以及其與舒尼替尼聯(lián)用可防止舒尼替尼耐藥的產(chǎn)生。
[0011]本發(fā)明的第一方面，提供了 AXL/c-Met抑制劑在制備腫瘤聯(lián)合治療藥物中的應用。
[0012]所述的AXL/c-Met 抑制劑為 BMS777607 或 NPS-1034 ；
[0013]或根據(jù)AXL (GENBANK 號 ΝΜ_001699.5)和 c_Met (GENBANK 號 NM_001127500.1)的序列，通過本領域常規(guī)技術，設計相關的siRNA或shRNA。
[0014]所述的聯(lián)合治療藥物為舒尼替尼。
[0015]所述的腫瘤優(yōu)選為腎癌，特別是舒尼替尼耐藥的腎癌。
[0016]本發(fā)明的第二方面，提供了 AXL/c-Met抑制劑在制備逆轉腎癌舒尼替尼耐藥的藥物中的應用。
[0017]所述的藥物為AXL/c-Met抑制劑與舒尼替尼聯(lián)用藥物。
[0018]所述的AXL/c-Met抑制劑是抑制或降低AXL/c_Met基因轉錄(翻譯)的物質，或能抑制AXL/c-Met正常生物學功能的物質。例如通過siRNA或shRNA等方法降低AXL/c-Met表達；使用AXL/c-Met雙重抑制劑BMS777607抑制AXL/c-Met正常生物學功能等。
[0019]本發(fā)明的第三方面，提供了 AXL/c-Met抑制劑在制備預防腎癌舒尼替尼耐藥發(fā)生的藥物中的應用。
[0020]所述的AXL/c-Met 抑制劑為 BMS777607 或 NPS-1034。
[0021]所述的預防藥物為AXL/c-Met抑制劑與舒尼替尼聯(lián)用藥物。
[0022]本發(fā)明的第四方面，提供了一種聯(lián)合用藥物，具體的是一種治療腎癌的聯(lián)合用藥物，所述的聯(lián)合用藥物其活性成分為AXL/c-Met抑制劑和舒尼替尼。
[0023]所述的聯(lián)合用藥物，還可以包含一種或多種藥用載體。
[0024]所述的AXL/c-Met抑制齊I」，是能同時抑制AXL和c_Met的物質，包括但不限于:BMS777607、其他針對AXL和c_Met的干擾序列；
[0025]本發(fā)明所述的聯(lián)用、聯(lián)合用藥物，包括同時或順序的施用有效量的AXL/c-Met抑制劑和有效量的舒尼替尼。所述的順序可以是先用AXL/c-Met抑制劑，再用舒尼替尼；也可以是先用舒尼替尼，再用AXL/c-Met抑制劑。
[0026]本發(fā)明所述的藥用載體，即藥學上可接受的載體，是指藥學領域中常用的除活性成分以外添加物，例如稀釋劑(淀粉類、糖類、纖維素類和無機鹽類)、賦形劑等，填充劑如淀粉蔗糖、粘合劑如水、乙醇、纖維素衍生物、明膠和聚乙烯吡咯烷酮，崩解劑如干淀粉、羧甲基淀粉鈉，增溶劑如聚山梨酯類和聚氧乙烯脂肪酸酯類等，吸收促進劑、表面活性劑如吐溫、司盤，吸附載體、潤滑劑如硬脂酸鎂、微粉硅膠等。另外，還可以在組合物中加入其它輔料如香味劑、甜味劑等。
[0027]本發(fā)明所述的聯(lián)合用藥物，可以藥物組合物的形式通過口服、鼻吸入、直腸、腸胃外或經(jīng)皮給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、緩釋微丸、固體分散體、包合物等，制成的液體制劑如混懸劑、乳劑、熔膠劑、糖漿劑、合劑、溶液劑等，用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油性混懸劑、乳劑、脂質體、微囊、微球、毫微粒等，也可將其制成各種緩釋、控釋制劑。優(yōu)先的形式是片劑、包衣片劑、膠囊、微丸、栓劑和注射劑，特別優(yōu)先特定部位靶向釋放的制劑。
[0028]本發(fā)明的主要技術方案為:將AXL/c-Met抑制劑與舒尼替尼同時對患者進行給藥。
[0029]在本發(fā)明的優(yōu)選實施例，所述的AXL/c-Met抑制劑為口服制劑、針劑或者緩釋制劑等。
[0030]在本發(fā)明的優(yōu)選實施例，以AXL/c-Met抑制劑與舒尼替尼作為活性成份的藥物的給藥方式包括口服、靜脈注射和局部給藥等。
[0031]在本發(fā)明的優(yōu)選實施例，AXL/c-Met抑制劑與舒尼替尼可以聯(lián)合給藥，或分開給藥。
[0032]有益效果
[0033]本發(fā)明有助于開發(fā)針對AXL/c-Met的抑制劑或藥物，以用于腫瘤聯(lián)合治療，特別是逆轉耐藥腎癌病人對舒尼替尼治療的反應性，增加治愈率，具有良好的轉化醫(yī)學前景。
【附圖說明】
[0034]圖1為舒尼替尼耐藥細胞與親本細胞中AXL、c-Met的蛋白表達水平；
[0035]圖2為舒尼替尼耐藥細胞7SuR(A)和ACSuR(B)在BMS777607作用下的藥物濃度-抑制率曲線；
[0036]圖3為舒尼替尼耐藥細胞在BMS777607、舒尼替尼及兩者聯(lián)合作用下的克隆形成數(shù)目；
[0037]圖4為舒尼替尼耐藥細胞在BMS777607、舒尼替尼及兩者聯(lián)合作用下的體內生長曲線；
[00