用于增強(qiáng)透皮遞送的肽的制作方法
【專利說明】用于增強(qiáng)透皮遞送的化
[0001 ] 本申請(qǐng)已與其序列表(文件名為Sequence_Listing_74320US002.TXT，2014年8月 11日創(chuàng)建)相關(guān)聯(lián)。此序列表文件包含4,556字節(jié)并且其全文W引用方式并入本文。
【背景技術(shù)】
[0002] 皮膚提供了許多藥物(包括全身藥物)理想的遞送部位。經(jīng)皮膚的藥物遞送可能是 無痛的且提供持續(xù)的釋放，從而提高了患者的順從性。經(jīng)皮膚遞送的全身藥物不經(jīng)歷首過 代謝，并且皮膚遞送可允許藥物(諸如類似抗體和疫苗的蛋白質(zhì)基藥物）的全身治療，運(yùn)些 藥物可另外易于在胃腸道中降解或吸收。
[0003] 此外，改善皮膚健康或增強(qiáng)皮膚外觀的美容成分也必須橫穿皮膚的最外層（角質(zhì) 層)遞送。然而，皮膚的有效環(huán)境屏障作用使藥物和美容成分兩者橫穿角質(zhì)層的遞送變得復(fù) 雜。角質(zhì)層阻止許多分子(諸如大分子、蛋白質(zhì)藥物和帶電小分子)穿過其屏障。
[0004] 已經(jīng)探究了輸送藥物和美容物質(zhì)穿過角質(zhì)層的多種方法，包括物理和化學(xué)破壞角 質(zhì)層。盡管使用化學(xué)滲透增強(qiáng)劑已取得改觀的成效，但它們通常不能輸送大的親水性化合 物、蛋白質(zhì)藥物或帶電小分子橫穿角質(zhì)層進(jìn)入到全身循環(huán)。反而，大的親水性化合物、蛋白 質(zhì)藥物和帶電小分子必須經(jīng)常經(jīng)由具有較低患者順從性的途徑(諸如注射)來遞送。此外， 對(duì)于可使用化學(xué)滲透增強(qiáng)劑輸送的分子而言，化學(xué)滲透增強(qiáng)劑可能會(huì)造成刺激。仍需要新 型滲透增強(qiáng)組合物，其可輸送多種化合物橫穿角質(zhì)層到達(dá)皮膚的更深層或進(jìn)入到全身循 環(huán)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[000引本公開整體設(shè)及包含膚的皮膚滲透增強(qiáng)劑，所述膚用于增強(qiáng)活性劑(諸如，藥物活 性劑、疫苗、美容劑、營養(yǎng)補(bǔ)充劑等）的透皮遞送。本文所述的皮膚滲透增強(qiáng)劑可用于改善多 種化合物(包括小的帶電荷藥物和大的蛋白質(zhì)藥物)穿過皮膚的滲透。
[0006] 本公開的一個(gè)方面提供了包含膚的皮膚滲透增強(qiáng)劑。所述膚可包含的氨基酸序列 包含:如SEQ ID NO: 1、2、3或6中所示的十個(gè)連續(xù)氨基酸殘基；如SEQ ID N0:7或8中所示的 十一個(gè)連續(xù)氨基酸殘基;如SEQ ID N0:4或5中所示的十二個(gè)連續(xù)氨基酸殘基;或它們的類 似物。所述膚可包含30個(gè)或更少的總氨基酸殘基或氨基酸類似物。所述膚可具有如SEQ ID ^:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17中所示的氨基酸序列。
[0007] 本公開的另一個(gè)方面提供了包含如本文所公開的皮膚滲透增強(qiáng)劑和活性劑的組 合物。所述活性劑可選自藥物活性劑、疫苗、美容劑和營養(yǎng)補(bǔ)充劑;例如，抗體、降脂化合物、 治療性蛋白質(zhì)、毛發(fā)生長化合物、毛發(fā)去除化合物或維生素。
[0008] 本公開的另一個(gè)方面提供了透皮遞送藥物活性劑、疫苗、美容劑或營養(yǎng)補(bǔ)充劑的 方法，所述方法包括向?qū)ζ溆行枰氖茉囌叩钠つw施用組合物，所述組合物包含:載體，其 選自藥學(xué)上可接受的載體、美容上可接受的載體或營養(yǎng)上可接受的載體;活性劑，其選自藥 物活性劑、疫苗、美容劑或營養(yǎng)補(bǔ)充劑;和如本文所公開的皮膚滲透增強(qiáng)劑。
[0009] 結(jié)合【具體實(shí)施方式】，本公開的其他特征和方面將變得顯而易見。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 本公開整體設(shè)及包含膚的滲透增強(qiáng)劑和滲透增強(qiáng)組合物。本文所提供的膚、滲透 增強(qiáng)劑和組合物增強(qiáng)分子(諸如大分子、蛋白質(zhì)藥物和帶電小分子)橫穿角質(zhì)層屏障的能 力，從而避免了不合意的遞送途徑(諸如注射)并提高了患者的順從性。
[0011] 本公開的皮膚滲透增強(qiáng)劑可逆地降低角質(zhì)層的屏障抵抗并允許分子(諸如藥物、 疫苗、營養(yǎng)補(bǔ)充劑或美容物質(zhì))更容易地滲透到活體組織，并且在一些情況下，全身循環(huán)。在 一些情況下，該皮膚滲透增強(qiáng)劑允許分子(諸如藥物、疫苗、美容物質(zhì)和營養(yǎng)補(bǔ)充劑)進(jìn)入較 低的皮膚層次(諸如基底層和epinosa層）。在一些情況下，該皮膚滲透增強(qiáng)劑允許分子進(jìn)入 循環(huán)系統(tǒng)或其他內(nèi)部組織。術(shù)語"皮膚滲透增強(qiáng)劑"、"滲透增強(qiáng)劑"和"透過增強(qiáng)劑"可在本 文互換使用。
[0012] 本文所述的皮膚滲透增強(qiáng)劑允許分子(諸如藥物、疫苗、美容物質(zhì)和營養(yǎng)補(bǔ)充劑， 包括小的帶電分子W及大分子諸如蛋白質(zhì)）透皮遞送。術(shù)語"透皮"或"透皮遞送"通常用于 指橫穿皮膚任何部分的活性成分的任何類型的遞送。也就是說，透皮通?？砂ㄈ磉f送 (即，活性成分橫穿或基本穿過真皮輸送，使得活性成分遞送到血流中且全身地遞送的情 況）W及皮內(nèi)遞送（即，活性成分部分地穿過真皮(例如，穿過皮膚的外層（角質(zhì)層））輸送的 情況，該處活性成分被遞送到皮膚中，例如，用于治療牛皮癖或用于局部麻醉藥遞送）。也就 是說，如本文所用，透皮遞送包括橫穿皮膚的至少一部分(并不一定是皮膚的所有層)而不 僅僅是局部施用到皮膚的外層來輸送的活性劑的遞送。
[0013] 不受理論的束縛，據(jù)信本文所述的滲透增強(qiáng)劑通過選擇性地和可逆地調(diào)節(jié)皮膚對(duì) 多數(shù)分子保持封閉屏障的生物過程和信號(hào)通路來協(xié)助分子穿過角質(zhì)層，從而允許所需分子 透皮遞送。
[0014] 在術(shù)語"包含"出現(xiàn)在【具體實(shí)施方式】和權(quán)利要求書中時(shí)，該術(shù)語不具有限制意義。
[0015] 如本文所用，"一個(gè)/一種"、"該"、"所述"、"至少一個(gè)/至少一種"和"一個(gè)或多個(gè)/ 一種或多種"可互換使用。
[0016] 另外，在本文中，由端點(diǎn)表述的數(shù)值范圍包括該范圍內(nèi)涵蓋的所有數(shù)值(例如，5或 更小包括 0.5、1、1.25、2、2.8、3、4、5等）。
[0017] 如本文所用，"類似物"是指包含連續(xù)氨基酸序列的膚，該膚與其親本膚(例如，SEQ ID NO: 1-17)有1-3個(gè)氨基酸殘基不同，但具有與其親本膚相同或相似的增強(qiáng)皮膚滲透的功 能。在一些情況下，差別在于保守氨基酸取代，在保守氨基酸取代中，一個(gè)氨基酸被另一個(gè) 具有相似側(cè)鏈的氨基酸或一個(gè)具有相似特性的氨基酸類似物替換。例如，具有相似側(cè)鏈的 氨基酸家族包括具有酸性或酷胺側(cè)鏈的氨基酸，諸如天冬氨酸、谷氨酸、天冬酷胺或谷氨酷 胺;具有堿性側(cè)鏈的氨基酸，諸如賴氨酸、精氨酸和組氨酸;具有不帶電極性側(cè)鏈的氨基酸， 諸如甘氨酸、天冬酷胺、谷氨酷胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和半脫氨酸;具有非極性側(cè)鏈的 氨基酸，諸如丙氨酸、鄉(xiāng)氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸和色氨酸;具 有e-支化側(cè)鏈的氨基酸，諸如蘇氨酸、鄉(xiāng)氨酸和異亮氨酸；W及具有芳族側(cè)鏈的氨基酸，諸 如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和組氨酸。因此，示例性保守氨基酸取代包括:賴氨酸被組氨酸 或精氨酸取代;組氨酸被賴氨酸或精氨酸取代;精氨酸被賴氨酸或組氨酸取代;苯丙氨酸被 酪氨酸或色氨酸取代;酪氨酸被苯丙氨酸或色氨酸取代;色氨酸被苯丙氨酸或酪氨酸取代； 絲氨酸被蘇氨酸取代;蘇氨酸被絲氨酸取代;天冬氨酸被谷氨酸取代;天冬酷胺被谷氨酷胺 取代;谷氨酷胺被天冬酷胺取代;甘氨酸被丙氨酸、鄉(xiāng)氨酸、亮氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸取 代;丙氨酸被甘氨酸、鄉(xiāng)氨酸、亮氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸取代;鄉(xiāng)氨酸被甘氨酸、丙氨酸、 亮氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸取代;亮氨酸被甘氨酸、丙氨酸、鄉(xiāng)氨酸、異亮氨酸或甲硫氨酸 取代;異亮氨酸被甘氨酸、丙氨酸、鄉(xiāng)氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸取代;天冬氨酸被天冬酷胺或 谷氨酷胺取代;天冬酷胺被天冬氨酸或谷氨酸取代；W及谷氨酷胺被天冬氨酸或谷氨酸取 代。
[0018] "類似物"也指與親本氨基酸殘基相比表現(xiàn)出很小差別的氨基酸殘基結(jié)構(gòu)衍生物。 "類似物"還指與其親本膚或本領(lǐng)域已知的氨基酸殘基相比具有很小修飾(包括但不限于改 變一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的側(cè)鏈或用任何非氨基酸替換一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基）的膚或氨 基酸殘基。
[0019] 如本文所用，術(shù)語"皮膚'是指覆蓋脊椎動(dòng)物的外皮W及內(nèi)部粘膜組織饋如口腔 粘膜、鼻粘膜、食管粘膜等)兩者。
[0020] 本公開提供了包含膚的皮膚滲透增強(qiáng)劑。在一個(gè)實(shí)施例中，該膚所包含的氨基酸 序列包含十個(gè)連續(xù)氨基酸殘基，包括ACLPGVLGSC(SEQ ID N0:1)，AC化PWDASC(沈Q ID NO: 2)，4〔01?化1'肥(569 10^:3)，4化0饑^1?4(：(沈9 10^:6)或它們的類似物。在一個(gè)實(shí)施例 中，該膚所包含的氨基酸序列包含^^一個(gè)連續(xù)氨基酸殘基，包括ASSTTLNTLAQ(SEQ ID NO: 7)，ASSDIPLFTRY(SEQ ID N0:8)或它們的類似物。在一個(gè)實(shí)施例中，該膚所包含的氨基酸序 列包含十二個(gè)連續(xù)氨基酸殘基，包括TWTQAWPWGWTW(SEQ ID N0:4)，AKSSWWGRAYWY(SEQ ID NO :5)或它們的類似物。
[0021 ]在一些實(shí)施例中，該膚序列通常包含7-40個(gè)氨基酸殘基。在一些實(shí)施例中，該膚序 列通常包含10-30個(gè)氨基酸殘基。在一些實(shí)施例中，該膚序列通常包含10-20個(gè)氨基酸殘基。 在一些實(shí)施例中，該膚包含30個(gè)或更少的總氨基酸殘基或氨基酸類似物。在一些實(shí)施例中， 該膚包含20個(gè)或更少的總氨基酸殘基或氨基酸類似物。在一些實(shí)施例中，該膚包含19個(gè)或 更少的總氨基酸殘基或氨基酸類似物。在一些實(shí)施例中，該膚包含至少7個(gè)總氨基酸殘基或 氨基酸類似物。在一些實(shí)施例中，該膚包含至少10個(gè)總氨基酸殘基或氨基酸類似物。在一些 實(shí)施例中，該膚的氨基酸序列的至少50%包含選自SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7或8或它們的 類似物的連續(xù)氨基酸序列。
[0022] 在一些實(shí)施例中，該皮膚滲透增強(qiáng)劑所包含的膚具有如SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、 7、8或它們的類似物中所示的氨基酸序列。在一些實(shí)施例中，該皮膚滲透增強(qiáng)劑所包含的膚 具有SHSACLPGVLGSCGGGS(SEQ ID N0:9)，SHSACSLPWDASCGGGS(SEQ ID N0:10)， SHSACDTPRLTHCGGGS(SEQ ID NO : 11),SHSTWTQAWPWGWTWGGGS(SEQ ID NO:12), SHSAKSSWWGRAYWYGGGS(SEQ ID N0:13)，SHSACLDNTFRACGGGS(SEQ ID N0:14)， SHSASSTTLNTLAQWPA(SEQ ID NO :15),SHSASSDIPLFTRYGGGS(SEQ ID NO:16), 甜SA化DNTFRACG(SEQ ID NO: 17)或它們的類似物的氨基酸序列。在一些實(shí)施例中，該膚的 N-末端包含甜S的連續(xù)氨基酸序列。在一些實(shí)施例中，該膚的C-末端包含選自GGGS、G和WPA 的連續(xù)氨基酸序列。本公開也提供了分離的膚，其具有如SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17或它們的類似物中所示的氨基酸序列。
[0023] 本公