專利名稱：一種利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法，尤其是涉及一種 利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法。
背景技術(shù)：
國內(nèi)外抗生素藥渣加工利用始于50年代后期。1957年，我國上海第 三制藥廠將四環(huán)素藥渣曬干后用作詞料添加劑，在上海郊區(qū)養(yǎng)豬、雞業(yè)中 推廣應(yīng)用。直至80年代末期，凡有抗生素生產(chǎn)的地方，均將藥渣簡單曬 晾后，用作蛋白飼料或添加劑。但由于受氣候、場地等限制，晾曬法預(yù)處 理藥渣受到一定的限制。因為工廠不可能有那么多空閑地來晾曬。晾曬期 間，藥渣散發(fā)出一種特殊異味，而且，藥渣有機(jī)物含量高，易引起二次發(fā) 酵，顏色變黑，產(chǎn)生惡臭味，引來大量蒼蠅，環(huán)境十分惡劣。隨著人們環(huán) 保意識的提高和國家環(huán)保整治力度的加大，近十年來，人們將抗生素藥渣 的處理工藝主要集中在干燥技術(shù)的攻關(guān)上。1991年，山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)公 司抗生素藥渣干燥工藝獲得成功。1996年，山東魯抗飼料廠又研究出離心 機(jī)結(jié)合流化床干燥青霉素濕渣，使干燥成本降低30%。
隨著各種藥渣干燥設(shè)備的研制成功，國內(nèi)有數(shù)家單位開展了抗生素藥 渣用作高蛋白飼料原料及藥物性添加劑的研究。1998年 1999年，李月海 等利用魯抗泰樂菌絲蛋白和頭孢菌絲蛋白分別以1.5%、 3%的添加量代替 等量的豆粕用于產(chǎn)蛋雞飼養(yǎng)，獲得較好的飼喂效果；用泰樂菌素蛋白詞料 飼養(yǎng)肉仔雞，肉雞成活率、增重速度、料肉比均顯著高于未添加組。
然而，上述藥渣的開發(fā)使用，均沒有消除藥渣中殘留的抗生素。因為 動物長期食入高殘留抗生素的藥渣后，會產(chǎn)生耐藥菌、畜產(chǎn)品藥物殘留等 種種不良后果。這就意味著藥渣作為再生伺料資源，用前必須降低其內(nèi)所 殘留的抗生素。
近年來，國內(nèi)外有關(guān)藥渣中殘留抗生素降解技術(shù)的研究報道甚少，但 在城市生活廢水和工業(yè)廢水中殘留抗生素的治理方面研究報道較多。湯少 紅等將藥渣直接以肥料的形式用于花丼施用，也取得了較滿意的施肥效
果，但藥渣中殘有抗生素，長期使用可能會對土壤微生態(tài)平衡產(chǎn)生負(fù)面影
響。Kummerer等、Ingerslev等、Drillia等采用生物法，對生活廢水中殘 留環(huán)丙沙星、氧氟沙星、甲硝噠唑、復(fù)方新諾明和獸用土霉素等的降解技 術(shù)進(jìn)行了研究，但所得到的結(jié)果是不一致的。主要原因是①不同抗生素， 其分子結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性是不一樣的；②降解用菌株還有待進(jìn)一步篩選與優(yōu) 化；③污水中無機(jī)、有機(jī)質(zhì)對不同菌株降解不同抗生素的影響可能有別； 溫度、pH值、溶解氧等對不同降解過程的影響。Lange等、Andreozzi 等用臭氧對污水中殘留的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素諸如紅霉素、克拉霉素、羅紅 霉素、林可霉素進(jìn)行無害化處理，取得了較為滿意的治理效果，但這種方
法是否適合藥渣治理，尚需研究。也有人采用電化氧化法處理廢水中抗生 素殘留，發(fā)現(xiàn)用此方法能有效降低廢水中氧氟沙星含量，但對殘留林可霉 素?zé)o顯著降解作用，但這種方法不適合于工廠規(guī)模化處理，因能耗太大。 Otker等、Polubesova等用蒙脫石、沸石等多孔型硅酸鹽礦物質(zhì)吸附污水 中殘留四環(huán)素、恩諾沙星等藥物，進(jìn)而使污水得以凈化，但這種方法沒有 從根本上消除殘留抗生素，只是抗生素的存在位點發(fā)生了改變，不適合于 藥渣中殘留抗生素的治理。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種簡單、獨特、易于推 廣使用的利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法。
本發(fā)明通過如下方式實現(xiàn)
一種利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素含量的方法，其特征在 于該方法包括如下步驟
a. 藥渣培養(yǎng)基配制將下述重量的原料混合而成即可得藥渣培養(yǎng)基 藥渣600g 800g,麩皮400g 200g， MgS04.7H20 0.1g 0.2g， K2HP04 0.1g 0.2g， FeSO4.7H2O0.1g~0.3g，水800mL 1000mL;
b. 細(xì)菌懸液制備取熱帶假絲酵母和Em原露菌株，分別接種于YPD 液體培養(yǎng)基中，30。C搖床中培養(yǎng)20 30h， 4000r/min離心15min后，懸浮 于新的YPD液體培養(yǎng)基中，30°C搖床中繼續(xù)培養(yǎng)8~10h后即可得到熱帶 假絲酵母和Em原露懸液；
c. 取步驟a制備的藥渣培養(yǎng)基，加入步驟b制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液，每200g的藥渣培養(yǎng)基中加入的熱帶假絲酵母和Em原露懸 液各4 10mL，攪拌均勻，25 30。C下，孵育24~36h,然后在60~100°C 下烘干，粉碎后即可；'
所述YPD液體培養(yǎng)基是由5g的酵母浸出粉、10g的蛋白胨、20g的 葡萄糖和lOOOmL的水混合而成。
本發(fā)明有如下效果
1) 大幅度降低了藥渣中殘留的泰樂菌素的含量本發(fā)明采用微生物
法對泰樂菌素藥渣進(jìn)行處理，使藥渣中殘留泰樂菌素含量由原來的
40mg/kg 60mg/kg降低至4.5mg/kg以下。
2) 本發(fā)明使泰樂菌素藥渣再利用成為可能由于藥渣中泰樂菌素的 殘留量較高，使泰樂菌素藥渣直接作為動物飼料或肥料使用，己受到人們 的廣泛置疑。美國食品和藥物管理局(FDA)規(guī)定，泰樂菌素在可食組織和 蛋中的殘留允許濃度為0.2mg/kg。若用上述處理后的藥渣為原料，生產(chǎn)單 細(xì)胞蛋白飼料或飼料酶制劑，單細(xì)胞蛋白按1%的比例，詞料酶制劑按0.3% 的比例添加到豬、雞全價配合詞料中。以肉雞為例，飼養(yǎng)2kg的肉雞，大 約需要4kg左右的全價配合飼料，則消耗藥渣0.052kg，肉雞則食入不高 于0.234mg的泰樂菌素。假如動物食入的藥渣中的泰樂菌素全部蓄積在動 物機(jī)體中，則肉雞機(jī)體中泰樂菌素含量為0.117mg/kg，低于FDA規(guī)定的 0.2mg/kg限量。實際上，動物食入含有泰樂菌素的藥渣， 一則藥渣中的泰 樂菌素不可能全部被動物腸道吸收；二則經(jīng)腸道吸收的泰樂菌素，大部分 要經(jīng)過組織分解代謝而排除體外，只有少量蓄積在動物組織中。
3) 本發(fā)明通過熱帶假絲酵母和Em原露復(fù)合菌株處理藥渣，提高了 藥渣中殘留泰樂菌素的降解效果。因為，單獨熱帶假絲酵母或Em原露對 藥渣中殘留泰樂菌素的降解效果要極顯著低于二者復(fù)合降解的效果。
具體實施例方式
實施例l:
1) 藥渣培養(yǎng)基配制
藥渣600g，麩皮400g， MgS04'7H20 O.lg， K2HP04 O.lg， FeS04.7H20 O.lg，水1000mL。
2) 細(xì)菌懸液制備取熱帶假絲酵母和Em原露菌株，分別接種于YPD液體培養(yǎng)基中，30°C搖床中培養(yǎng)20h， 4000r/min離心15min后，懸浮于 新的YPD液體培養(yǎng)基中，30。C搖床中繼續(xù)培養(yǎng)8h。
3)取步驟2)制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液各4mL,接種于 200g藥渣培養(yǎng)基中，攪拌均勻。25。C下，孵育36h。然后在60。C下烘干 后粉碎。
經(jīng)測定，處理后藥渣中泰樂菌素含量為3.2mg/kg。 :藥渣培養(yǎng)基配制
藥渣700瑪，麩皮300g，MgS04.7H20， 0.2g，K2HP04， 0.15g， FeS04.7H20 0.2g，水900mL。
2) 細(xì)菌懸液制備取熱帶假絲酵母和Em原露菌株，分別接種于YPD 液體培養(yǎng)基中，30°C搖床中培養(yǎng)25h， 4000r/min離心15min后，懸浮于 新的YPD液體培養(yǎng)基中，30。C搖床中繼續(xù)培養(yǎng)9h。
3) 取步驟2)制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液各7mL，接種于 200g藥渣培養(yǎng)基中，攪拌均勻。28。C下，孵育30h。然后在80。C下烘干 后粉碎。
經(jīng)測定，處理后藥渣中泰樂菌素含量為4.0mg/kg。
實施例3:
1) 藥渣培養(yǎng)基配制
藥渣800g，麩皮200g，MgS04'7H20 0.15g, K2HPO40.2g， FeS04.7H20 0.3g，水800mL。
2) 細(xì)菌懸液制備取熱帶假絲酵母和Em原露菌株，分別接種于YPD 液體培養(yǎng)基中，30。C搖床中培養(yǎng)30h， 4000r/min離心15min后，懸浮于 新的YPD液體培養(yǎng)基中，30°C搖床中繼續(xù)培養(yǎng)10h。
3) 取步驟2)制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液各10mL，接種于 200g藥渣培養(yǎng)基中，攪拌均勻。30。C下，孵育24h。然后在100。C下烘 干后粉碎。
經(jīng)測定，處理后藥渣中泰樂菌素含量為4.5mg/kg。 上述YPD是酵母浸出粉胨葡萄糖液體簡稱，其是由5g的酵母浸出粉、 10g的蛋白胨和20g的葡萄糖和1000mL的水混合而成。
權(quán)利要求
1.一種利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素含量的方法，其特征在于該方法包括如下步驟a.藥渣培養(yǎng)基配制將下述重量的原料混合而成即可得藥渣培養(yǎng)基藥渣600g～800g，麩皮400g～200g，MgSO4·7H2O 0.1g～0.2g，K2HPO40.1g～0.2g，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.1g～0.3g，水800mL～1000mL；b.細(xì)菌懸液制備取熱帶假絲酵母和Em原露菌株，分別接種于YPD液體培養(yǎng)基中，30℃搖床中培養(yǎng)20～30h，4000r/min離心15min后，懸浮于新的YPD液體培養(yǎng)基中，30℃搖床中繼續(xù)培養(yǎng)8～10h后即可得到熱帶假絲酵母和Em原露懸液；c.取步驟a制備的藥渣培養(yǎng)基，加入步驟b制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液，每200g的藥渣培養(yǎng)基中加入的熱帶假絲酵母和Em原露懸液各4～10mL，攪拌均勻，25～30℃下，孵育24～36h，然后在60～100℃下烘干，粉碎后即可。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌 素含量的方法，其特征在于所述YPD液體培養(yǎng)基是由5g的酵母浸出粉、 10g的蛋白胨、20g的葡萄糖和lOOOmL的水混合而成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法，尤其是涉及一種利用微生物法降低藥渣中殘留的泰樂菌素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟a.藥渣培養(yǎng)基配制、b.細(xì)菌懸液制備、c.取步驟a制備的藥渣培養(yǎng)基，加入步驟b制備的熱帶假絲酵母和Em原露懸液，每200g的藥渣培養(yǎng)基中加入的熱帶假絲酵母和Em原露懸液各4～10mL，攪拌均勻，25～30℃下，孵育24～36h，然后在60～100℃下烘干，粉碎后即可；采用本發(fā)明提供的方法處理后藥渣中泰樂菌素含量由原來的40mg/kg～60mg/kg降低至4.5mg/kg以下，使藥渣資源化利用成為可能。
文檔編號A62D3/02GK101204613SQ20071019719
公開日2008年6月25日 申請日期2007年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月6日
發(fā)明者李衛(wèi)芬, 邱智杰, 馬玉龍 申請人:寧夏大學(xué)