1.梅毒螺旋體感染依賴性抗原，其特征在于，其為Tp0971、Tp0768和Tp0462，其氨基酸序列分別為：Tp0971：SEQ ID NO.3、Tp0768：SEQ ID NO.2和Tp0462：SEQ ID NO.1。
2.權(quán)利要求1所述的梅毒螺旋體感染依賴性抗原，其特征在于，其制備方法包括如下步驟：
步驟一、軟件分析TpNichils標(biāo)準(zhǔn)株全基因組所有ORFs，建立Tp疫苗候選抗原體系；
(1)采用BLAST軟件，對TpNichils標(biāo)準(zhǔn)株全基因組ORFs的編碼蛋白與人的全部蛋白質(zhì)序列進(jìn)行同源性分析，去掉有高度同源性的抗原；
以人的全部蛋白質(zhì)序列為數(shù)據(jù)庫，使用BLASTP程序，用Tp全基因組ORFs的編碼蛋白與人的全部蛋白質(zhì)序列進(jìn)行比對，去掉有高度同源性的抗原；
(2)對以上初篩出的候選抗原采用細(xì)菌亞細(xì)胞定位及結(jié)構(gòu)預(yù)測軟件進(jìn)行預(yù)測，去掉不適合作為疫苗抗原的蛋白，包括細(xì)菌胞質(zhì)蛋白、跨膜結(jié)構(gòu)超過4個(gè)的膜蛋白；
步驟二、Tp“高通量融合蛋白微陣列”制備技術(shù)的建立
(1)大規(guī)模抽提pGEX-6p-1和pGEX-6p-2融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒，分別采用不同組合的限制性內(nèi)切酶，進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物切膠回收，純化后分裝保存；
(2)以TpNichils標(biāo)準(zhǔn)株基因組DNA為模板，對篩選出的有價(jià)值ORFs進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將每個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物構(gòu)建ORF/pGEX重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化大腸桿菌；采用pGEX載體通用引物及每個(gè)ORF的特異性引物對轉(zhuǎn)化生長的細(xì)菌克隆進(jìn)行篩查和鑒定；
(3)將鑒定陽性的單克隆菌落擴(kuò)大培養(yǎng)，離心收集菌體，超聲裂解細(xì)胞收集含有大量可溶性的GST-融合蛋白的上清液，分裝、-80℃保存?zhèn)溆?；?ml上述上清液預(yù)處理后，SDS-PAGE膠電泳，考馬斯亮藍(lán)染色，鑒定融合蛋白的表達(dá)情況；
(4)將上述可溶性GST-融合蛋白和采用相同方法制備的GST對照蛋白，依次點(diǎn)樣固相化于預(yù)先包被有谷胱甘肽的微量反應(yīng)板中，20μL/well，制備高通量的Tp“融合蛋白微陣列”；
步驟三、新西蘭兔TpNichils標(biāo)準(zhǔn)株活Tp感染和滅活Tp免疫血清的制備
(1)常規(guī)方法進(jìn)行Tp的培養(yǎng)與純化；
(2)紫外線滅活Tp的制備；
將純化的Tp菌懸液轉(zhuǎn)入無菌細(xì)胞培養(yǎng)皿，置G36T5L/C型紫外燈下5cm2處照射45min，每15min晃動(dòng)平皿一次，NS定容至原體積，分裝、-80℃保存?zhèn)溆茫?/p>
(3)新西蘭兔Tp感染和免疫血清的制備
選用2.5-3kg成年新西蘭兔40只，隨機(jī)分為兩組：其中一組在背部剃毛處理后皮下接種8個(gè)皮丘，每個(gè)位點(diǎn)接種量為Tp Nichols株菌數(shù)105個(gè)，感染期間喂飼無抗生素的飼料和飲水；另一組用佐劑聯(lián)合高劑量的滅活Tp，106IFU/每個(gè)位點(diǎn)，同法接種免疫新西蘭兔，共接種3次，0d,14d,28d，第三次免疫后2周，兩組兔均抽血分離血清-20℃保存?zhèn)溆茫?/p>
步驟四、Tp感染依賴性免疫優(yōu)勢抗原篩選和鑒定：
Tp Nichols株感染組和滅活Tp免疫組的所有兔血清各20份為一抗，分別與Tp“高通量融合蛋白微陣列”中的每一種GST-融合蛋白和采用相同方法制備的GST對照蛋白反應(yīng)，以HRP標(biāo)記的抗兔抗體為二抗，酶標(biāo)儀讀取405nm波長OD值。GST-融合蛋白孔OD值大于或等于GST對照孔2倍以上判斷為陽性。比較分析活Tp感染組和滅活Tp免疫組血清與Tp抗原反應(yīng)譜差異，篩選僅被Tp感染組血清抗體特異性識別的Tp抗原，即感染依賴性抗原。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的梅毒螺旋體感染依賴性抗原，其特征在于，其制備方法的步驟一(1)中，確定兩個(gè)蛋白高度同源性的標(biāo)準(zhǔn)為：E-value’值低于1e-10，以及同源序列高于蛋白序列總長的30％。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的梅毒螺旋體感染依賴性抗原，其特征在于，其制備方法的步驟一(2)中Tp胞質(zhì)蛋白選擇標(biāo)準(zhǔn)如下：SignalP3.0軟件預(yù)測無信號肽；TMHMM3.0軟件預(yù)測無跨膜結(jié)構(gòu)；5種細(xì)菌亞細(xì)胞定位軟件至少有3種預(yù)測該蛋白為胞質(zhì)蛋白；Tp跨膜結(jié)構(gòu)超過4個(gè)的膜蛋白標(biāo)準(zhǔn)如下：被TMHMM3.0軟件預(yù)測出至少有4個(gè)或4個(gè)以上的跨膜結(jié)構(gòu)；5種細(xì)菌亞細(xì)胞定位軟件至少有3種預(yù)測該蛋白為膜蛋白。
5.基于梅毒螺旋體感染依賴性抗原Tp0971、Tp0768和Tp0462的梅毒診斷用試劑盒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于梅毒螺旋體感染依賴性抗原Tp0971、Tp0768和Tp0462的梅毒診斷用試劑盒，其特征在于，所述試劑盒為酶標(biāo)法試劑盒、膠體金試劑盒、免疫熒光標(biāo)記試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒或PCR試劑盒，WB試劑盒等。
7.所述梅毒螺旋體感染依賴性抗原在梅毒感染檢測及判愈方面的應(yīng)用。
8.所述梅毒螺旋體感染依賴性抗原制備的試劑盒在梅毒感染檢測及判愈方面的應(yīng)用。