本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)領(lǐng)域,更具體的說是涉及一種培養(yǎng)用于對秸稈進行預(yù)處理的復(fù)合菌劑,本發(fā)明還涉及一種秸稈預(yù)處理工藝,更具體的說是涉及一種采用木質(zhì)素降解復(fù)合菌劑并配合預(yù)處理激活劑,有效解決對秸稈木質(zhì)纖維素的聯(lián)合降解作用的預(yù)處理工藝。
背景技術(shù):
:我國農(nóng)作物秸稈產(chǎn)量巨大,分布廣泛,是一種富含有機質(zhì)的生物質(zhì)資源。報告顯示,每年約有2億噸秸稈和谷殼直接被露天焚燒,造成嚴重空氣污染和資源浪費。厭氧沼氣發(fā)酵技術(shù)作為秸稈資源化利用的最重要途徑之一,可在較低單位投入下實現(xiàn)作物秸稈等有機質(zhì)廢棄物高品質(zhì)利用,產(chǎn)生清潔能源,改善生態(tài)環(huán)境。一般而言,秸稈中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素含量(統(tǒng)稱木質(zhì)纖維素)分別為10%~15%,38%~44%和32%~36%,三類成分占原料總質(zhì)量的80%~95%。目前秸稈沼氣厭氧發(fā)酵實際過程中,容易出現(xiàn)漂浮和結(jié)殼情況,其主要原因是由于秸稈中含有大量木質(zhì)纖維素,尤其木質(zhì)素成分是由不易水解的非重復(fù)單元結(jié)構(gòu)組成,可抵抗一般酶類的水解作用,幾乎不能在厭氧狀態(tài)下進行降解,是目前公認的微生物難降解芳香族化合物之一,因而運行過程中出現(xiàn)進出料困難,固態(tài)發(fā)酵傳質(zhì)效果差,攪拌阻力大,易酸化,氣體釋放困難等一系列難題。為提高秸稈厭氧沼氣發(fā)酵效率,必須加強預(yù)處理破壞木質(zhì)素的纏繞作用和纖維素的復(fù)雜結(jié)晶結(jié)構(gòu)。公開號為CN102399825A的專利,提供了一種小麥秸稈混合尿素溶液進行預(yù)處理的方法,小麥秸稈質(zhì)量與尿素質(zhì)量比為1:0.12~0.2,尿素用量巨大,運營經(jīng)濟性較低。公開號為CN104826855A的專利,秸稈需要通過80℃高溫進行預(yù)處理,處理過程需增設(shè)加熱保溫裝置。公開號為CN104073445A的專利,分離獲得灰綠青霉、米根霉、黃孢原毛平革菌、黃曲霉和螺孢菌,組成復(fù)合干粉狀菌劑用于秸稈預(yù)處理。公開號為CN102453676A的專利,報道了一種包含糞鬼傘、青霉、木霉和墨汁鬼傘以及其他輔助激活劑的秸稈發(fā)酵劑。但是在現(xiàn)有技術(shù)中,并沒有公開一種采用定向選取并培養(yǎng)利于破壞秸稈結(jié)構(gòu)的秸稈預(yù)處理用菌劑,該菌劑能夠?qū)斩捴械哪举|(zhì)纖維素進行破壞,且沒有公開一種工藝能夠?qū)⒕鷦┑氖褂煤皖A(yù)處理發(fā)酵相結(jié)合共同有效提高秸稈在進行沼氣發(fā)酵處理過程中的沼氣產(chǎn)量。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的之一是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足之處,提供一種復(fù)合菌劑的培養(yǎng)方法,通過該培養(yǎng)方法可以獲得一種復(fù)合菌劑,該復(fù)合菌劑能夠?qū)斩掃M行預(yù)處理。一種菌劑的培養(yǎng)方法,包括如下步驟,步驟一、從當?shù)匦嗄?、腐爛秸稈及腐熟堆肥中篩選得到具有木質(zhì)素降解能力的單個或多個木質(zhì)素降解菌種;步驟二、篩選菌種,將步驟一獲得的多個木質(zhì)素降解菌種進行篩選:通過菌種兼容性試驗篩選出單個或多個木質(zhì)素降解菌種,該降解菌種與黃孢原毛平革菌、糙皮側(cè)耳組合之間無拮抗作用;步驟三:將經(jīng)過篩選后的干粉狀木質(zhì)素降解菌種、干粉狀的黃孢原毛平革菌和干粉狀的糙皮側(cè)耳按照質(zhì)量比為1:1:1進行混合成復(fù)合菌劑,且各干粉狀菌種保證在2×108cfu/g以上。作為優(yōu)選,所述復(fù)合菌劑進行聯(lián)合培養(yǎng)產(chǎn)生分解木質(zhì)素的酶類為木質(zhì)素過氧化氫酶LiP、漆酶Lac或錳過氧化物酶MnP。本發(fā)明的另一目的之一是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足之處,提供一種利用復(fù)合菌劑對秸稈預(yù)處理的工藝,通過設(shè)置秸稈堆垛場地,采用木質(zhì)素降解復(fù)合菌劑并配合預(yù)處理激活劑,有效解決對秸稈木質(zhì)纖維素的聯(lián)合降解作用,提高原料厭氧生物發(fā)酵效率,具有能耗小,專一性強,處理成本低,無二次污染等優(yōu)點,緩解秸稈露天直焚環(huán)境污染,實現(xiàn)資源再利用。本發(fā)明的技術(shù)解決措施如下:一種秸稈沼氣發(fā)酵預(yù)處理的工藝,其特征在于:包括如下步驟,步驟一、堆垛步驟:將秸稈進行堆垛處理;步驟二、破碎步驟:秸稈曬干后進行破碎;步驟三、將經(jīng)步驟二破碎后的秸稈碎料送入步驟一中進行堆垛;步驟四、在堆垛過程中對秸稈進行分次累積堆層,且堆積過程中按層投加權(quán)利要求1或2所述的復(fù)合菌劑;步驟五、堆漚處理:秸稈經(jīng)步驟四后進行堆漚處理并得到堆漚產(chǎn)物。其中,堆漚的時間一般為10~15天。作為優(yōu)選,還包括預(yù)處理激活劑,所述預(yù)處理激活劑與復(fù)合菌劑聯(lián)合加入至所述步驟四中的秸稈堆層中。作為優(yōu)選,所述預(yù)處理激活劑包括尿素或磷酸氫二銨和礦物質(zhì)微量元素;所述尿素或磷酸氫二銨的添加量為:0.25%-1%的尿素或0.5%~2%的磷酸氫二銨;所述礦物質(zhì)微量元素包括Fe2+或Fe3+,Co2+,Ni+,F(xiàn)e2+或Fe3+的添加量為秸稈總含水量的0.5~2mg/L,Co2+的添加量為秸稈總含水量的0.005~0.02mg/L,Ni+的添加量為秸稈總含水量的0.005~0.02mg/L。作為優(yōu)選,所述復(fù)合菌劑投加前需要用活化溶液進行活化處理,且活化后的菌液添加量為秸稈總質(zhì)量的1~2%,預(yù)處理激活劑添加量為秸稈總質(zhì)量的3~5%。作為進一步地優(yōu)選,所述活化溶液為溶液濃度為2g/L的蔗糖溶液,固態(tài)粉狀菌與活化溶液按照質(zhì)量比:粉狀菌劑:蔗糖溶液=1:10~20的比例進行混合,充分攪拌、稀釋后均勻投加。作為更進一步地優(yōu)選,還包括步驟六:將所述步驟五堆漚處理后獲得的堆漚產(chǎn)物進行厭氧發(fā)酵處理。作為更進一步地優(yōu)選,所述堆垛步驟包括:(a)設(shè)置堆垛場地;(b)堆垛中央設(shè)置有通氣塑料管道通過風機進行鼓氣或抽氣,通風管道進行卡扣固定;通風管道埋入堆垛另一端,超出堆垛處的通風管道連接風機;(c)堆垛長度方向的地勢較低一端設(shè)置集水溝用于收集堆垛滲濾水,收集后通入沼氣發(fā)酵池。作為更進一步地優(yōu)選,所述風機的通風量為0.4~1m3/(kg-秸稈·d),多個堆垛可共用一個風機,多個堆垛之間通過通風管道連接支管道實現(xiàn)共用風機,且支管道處設(shè)置閥門控制風量,且風機額定風量為并聯(lián)垛堆所需總風量的1.2倍;所述堆垛開始前在通風管道上部區(qū)域覆蓋一層填充劑,填充劑為木屑或生物質(zhì)堆肥成品。本發(fā)明的有益效果在于:(1)、本發(fā)明利用好氧微生物復(fù)合菌劑對秸稈木質(zhì)纖維素的聯(lián)合降解作用,具有能耗小,專一性強,處理成本低,無二次污染等優(yōu)點,緩解秸稈露天直焚環(huán)境污染,實現(xiàn)資源再利用。(2)、本發(fā)明從環(huán)境中篩選的木質(zhì)纖維素降解菌也可以達到與工業(yè)菌株相同的木質(zhì)纖維素降解率,木質(zhì)素強降解真菌種一般同時具備較高的纖維素、半纖維素降解能力,因此從周圍環(huán)境中篩選木質(zhì)素降解活性菌具有重要意義。本發(fā)明中預(yù)處理過程目的;①通過改良堆垛預(yù)處理環(huán)境,實現(xiàn)木質(zhì)纖維素降解最優(yōu)環(huán)境,為秸稈發(fā)酵預(yù)處理過程中人工或機械操作提供良好的作業(yè)環(huán)境;②選用已知木質(zhì)纖維素強降解能力菌種,篩選本地木質(zhì)素強降解活性菌種進行混合復(fù)篩,制備高效復(fù)合菌劑應(yīng)用于秸稈發(fā)酵預(yù)處理中。該方法培養(yǎng)獲得的復(fù)合菌劑在改良的環(huán)境中木質(zhì)纖維素降解能力更強,菌種間無拮抗作用,又有較強的環(huán)境適應(yīng)能力,同時保證此過程中應(yīng)適度的微生物降解過程,防止有機質(zhì)在預(yù)處理過程中被過度降解,從而避免直接造成甲烷發(fā)酵產(chǎn)氣量降低。③選用適當?shù)募せ顒?,包括尿素或磷酸氫二銨和微量金屬元素,確保微生物良好的降解微環(huán)境,添加氮源可保證預(yù)處理過程中滿足木質(zhì)纖維素降解微生物對氮源的需求;添加尿素或磷酸氫二銨可同時保證N源和P源的供應(yīng);Fe2+或Fe3+,Co2+,Ni+是微生物生長必須的微量元素,微量金屬離子作為不可替代組成分解木質(zhì)纖維素胞外酶,堆漚過程中這些隨滲濾液流失的微量礦物質(zhì),通過堆漚場地集水溝重新收集,并在厭氧池重新被厭氧微生物利用。(3)、本發(fā)明秸稈堆垛前破碎至3~5公分,簡單物理破碎保證菌劑和激活劑投加均勻,增加比表面積,加快木質(zhì)纖維素分解;堆垛中央設(shè)置強制通風管,定期向垛內(nèi)鼓氣或從垛內(nèi)抽氣,保證木質(zhì)素降解好氧條件;堆垛中央間隔設(shè)置通風管固定卡扣,固定通風管;通風管道超出條垛邊緣1.5~3米,為了防止空氣短路;垛堆間設(shè)置擋墻,用于垛與垛之間的分隔,最大限度利用空間,同時作為擋水墻進行滲濾液導(dǎo)流;垛堆中心隆起,保證垛堆的滲濾液向擋墻流動,并匯集入集水溝;集水溝收集堆垛滲濾液,保證含有NH4+、Fe2+、Fe3+、Co2+、Ni+等離子的滲濾液流入?yún)捬醢l(fā)酵室,作為N源和微量元素被下一步的甲烷發(fā)酵菌群利用。附圖說明:下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進一步的說明:圖1為木質(zhì)纖維素降解率;圖2為30天沼氣發(fā)酵日產(chǎn)氣量;圖3為沼氣發(fā)酵總產(chǎn)氣量;圖4為本發(fā)明的堆垛的結(jié)構(gòu)示意圖;圖5為圖4中的A-A剖視圖;圖6為圖4中的B-B剖視圖。具體實施方式實施例一一種菌劑的培養(yǎng)方法,包括如下步驟,步驟一、從當?shù)匦嗄?、腐爛秸稈及腐熟堆肥中篩選得到具有木質(zhì)素降解能力的單個或多個木質(zhì)素降解菌種;步驟二、篩選菌種,將步驟一獲得的多個木質(zhì)素降解菌種進行篩選:通過菌種兼容性試驗篩選出單個或多個木質(zhì)素降解菌種,該降解菌種與黃孢原毛平革菌、糙皮側(cè)耳組合之間無拮抗作用;步驟三:將經(jīng)過篩選后的干粉狀木質(zhì)素降解菌種、干粉狀的黃孢原毛平革菌和干粉狀的糙皮側(cè)耳按照質(zhì)量比為1:1:1進行混合成復(fù)合菌劑,且各干粉狀菌種保證在2×108cfu/g以上。所述復(fù)合菌劑進行聯(lián)合培養(yǎng)產(chǎn)生分解木質(zhì)素的酶類為木質(zhì)素過氧化氫酶LiP、漆酶Lac或錳過氧化物酶MnP。實施例二如附圖4至6所示,一種秸稈沼氣發(fā)酵預(yù)處理工藝,在某村莊建立人工堆垛場地。具體實施方式如下所示。一:(a)人工堆垛場地:人工磚砌擋墻高0.3米,人工磚砌擋墻寬0.2m,人工磚砌擋墻長20m;相鄰擋墻之間堆垛,堆垛中央隆起:中心線至邊寬距離=3%~8%;堆垛長度方向坡度為0.5%~2%;(b)堆垛1中央設(shè)置有通氣塑料管道2進行鼓氣或抽氣,塑料管道為PVC管,通風管道間隔3米進行卡扣固定;通風管道埋入堆垛一端的堆垛邊距與堆垛半寬相同,通風管道埋入堆垛另一端超出堆垛邊緣4米,超出堆垛處的通風管道連接風機3,風機抽出的臭氣進入臭氣過濾堆4;(c)堆垛長度方向的地勢較低一端設(shè)置集水溝用于收集堆垛滲濾水,收集后通入沼氣發(fā)酵池。所述風機的通風量為0.4~1m3/(kg-秸稈·d),多個堆垛可共用一個風機,多個堆垛之間通過通風管道連接支管道實現(xiàn)共用風機,且支管道處設(shè)置閥門控制風量,且風機額定風量為并聯(lián)垛堆所需總風量的1.2倍。二:秸稈曬干后機械破碎,破碎后秸稈長度為3~5cm,將破碎后的稻草秸稈進行加自來水水濕潤,保證稻草秸稈濕度為60%~70%以備用。三:堆垛開始前在通風管道上部區(qū)域覆蓋一層填充劑,填充劑可用木屑、生物質(zhì)堆肥成品等材料;人工堆垛總高1.5m,人工堆垛高出擋墻部分H=1.2m,人工垛寬為2H,為2.4m。四:用2g/L蔗糖溶液將固態(tài)粉狀復(fù)合菌劑進行活化處理,按質(zhì)量比:粉狀復(fù)合菌劑:蔗糖溶液=1:15的比例進行混合,經(jīng)充分攪拌、稀釋后備用;在此需要說明的是,該粉狀復(fù)合菌劑和蔗糖溶液的比例關(guān)系可根據(jù)實際的使用情況進行調(diào)整,不一定局限在本實施例中的數(shù)值范圍。所述復(fù)合菌劑是由白腐真菌屬黃孢原毛平革菌、糙皮側(cè)耳兩類基礎(chǔ)工程菌種和從當?shù)匦嗄?、腐爛秸稈及腐熟堆肥中篩選得到的木質(zhì)素降解菌種組成,將兩類基礎(chǔ)工程菌種和木質(zhì)素降解菌種聯(lián)合培養(yǎng),產(chǎn)生分解木質(zhì)素的多種酶類,通過菌種間的共代謝作用降解秸稈的木質(zhì)纖維素;在本實施例中,所述預(yù)處理激活劑包括氮源、尿素或磷酸氫二銨和礦物質(zhì)微量元素。所述氮源、尿素或磷酸氫二銨的添加量為;0.25%~1%的尿素或0.5%~2%的磷酸氫二銨;所述礦物質(zhì)微量元素包括Fe2+或Fe3+,Co2+,Ni+,F(xiàn)e2+或Fe3+的添加量為秸稈總含水量的1.5mg/L,Co2+的添加量為秸稈總含水量的0.15mg/L,Ni+的添加量為秸稈總含水量的0.3mg/L。五:將濕潤后的破碎秸稈在擋墻間進行鋪層堆垛,每鋪設(shè)30cm厚的秸稈需均勻投加一次復(fù)合菌劑和一次預(yù)處理激活劑,活化后的菌液添加量為秸稈總質(zhì)量的1~2%,預(yù)處理激活劑添加量為秸稈總質(zhì)量的3~5%。六:堆漚過程中設(shè)置三個部分:實驗組1,投加復(fù)合菌劑和預(yù)處理激活劑;實驗組2,僅投加復(fù)合菌劑,不投加預(yù)處理激活劑;空白組,相同條件下自然堆垛無投加。三組秸稈條垛堆構(gòu)建完成后,每組上鋪設(shè)生物質(zhì)堆肥成品防止產(chǎn)生腐臭氣體,露天情況下覆蓋塑料布進行遮擋。所述從當?shù)匦嗄?、腐爛秸稈及腐熟堆肥中篩選得到的是具有木質(zhì)素降解能力的單個或多個木質(zhì)素降解菌種,通過菌種兼容性試驗表明篩選的單個或多個木質(zhì)素降解菌種與黃孢原毛平革菌、糙皮側(cè)耳組合之間均無拮抗作用,將干粉狀的木質(zhì)素降解菌種、干粉狀的黃孢原毛平革菌和干粉狀的糙皮側(cè)耳按照質(zhì)量比為1:1:1進行混合成復(fù)合菌劑,且各干粉狀菌種保證在2×108cfu/g以上,復(fù)合菌劑進行聯(lián)合培養(yǎng)產(chǎn)生分解木質(zhì)素的酶類為木質(zhì)素過氧化氫酶LiP、漆酶Lac或錳過氧化物酶MnP。本實施例中,采集當?shù)匦嗄尽⒏癄€秸稈稻草、腐熟堆肥,利用平板稀釋法,通過對木質(zhì)素類典型化合物愈創(chuàng)酚為碳源的固體選擇性培養(yǎng)基進行不斷分離純化初篩獲得木質(zhì)素降解菌,為得到真菌并減少篩選工作量,在選擇性培養(yǎng)基中加入青霉素鈉,獲得木質(zhì)素降解菌株9株,其中愈創(chuàng)酚選擇鑒定培養(yǎng)基上脫色反應(yīng)快、脫色圈較大的菌種有6株,分別為F1,F(xiàn)2,F(xiàn)3,F(xiàn)4,F(xiàn)5,F(xiàn)6。真菌降解木質(zhì)素主要是依賴一系列酶的共同作用,這些酶主要包括木質(zhì)素過氧化物酶LiP、錳過氧化物酶MnP與漆酶Lac。利用苯胺藍鑒定篩選平板培養(yǎng)基篩選出具有LiP和MnP兩類酶活性較強的菌株;采用α-萘酚鑒定篩選平板培養(yǎng)基篩選出具有Lac酶活性的菌株。方法:將初步篩選后已分離純化的木質(zhì)素降解菌株點接至苯胺蘭平板,28℃培養(yǎng)10天,每天檢查菌落外脫色圈的形成情況,選擇脫色快、脫色圈大的菌種點接于α-萘酚篩選平板,觀察菌落外圍紫色圈的產(chǎn)生,結(jié)果如表1所示。菌株F1和菌株F3在苯胺藍平板鑒定試驗中,平板顏色全部退去,同時在α-萘酚平板鑒定試驗中,產(chǎn)生較明顯的紫色變色圈,說明這兩類菌株均可能產(chǎn)生多種木質(zhì)素降解酶類。表1菌種初篩選實驗結(jié)果上表中說明:max表示整個苯胺藍平板顏色全部褪去;+表示鑒定平板有顏色變化,后面的數(shù)字表示顏色變化圈的大??;-表示未見顏色變化。利用木質(zhì)素磺酸鈣Kirk定量篩選培養(yǎng)基檢測菌種對木質(zhì)素降解效率。方法:將PDA平板上培養(yǎng)5天的菌餅(直徑7mm)3片,接種于100mL定量篩選液體培養(yǎng)基中,28℃下?lián)u床恒溫培養(yǎng)。分別在第2、4、6、8、10天后用無菌吸管吸取2mL培養(yǎng)液,用粗濾紙過濾后,在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心,取上清液經(jīng)適當稀釋后,于下比色,測定木質(zhì)素磺酸鈣含量。另配置系列木質(zhì)素磺酸鈣標準溶液,測定不同濃度下的吸光度,繪制標準曲線。木質(zhì)素磺酸鈣降解率(%)=(初始OD值-發(fā)酵后OD值)/初始OD值×100%。如表1所示,10天后F1和F3對木質(zhì)素磺酸鈣降解率分別為31.2%和35.7%,且降解速率較快。此結(jié)果進一步說明,菌株F1和菌株F3木質(zhì)素降解能力優(yōu)于其他菌種,作為初篩篩選菌種進一步復(fù)篩實驗。復(fù)篩實驗中,將之前試驗中篩選得到的F1和F3菌種與已知木質(zhì)素降解菌種黃孢原毛平革菌E1、糙皮側(cè)耳E2共4種菌株進行排列組合,得到11種菌株組合方式。采用木質(zhì)素磺酸鈣Kirk定量培養(yǎng)基對11種復(fù)合菌株進行復(fù)篩,每次復(fù)篩實驗保證菌種接種總量一定,接種比例為每類菌株接種量相同,得到實驗結(jié)果如表2所示。方法:從斜面上移取經(jīng)活化的菌種于液體培養(yǎng)基中,28℃恒溫振蕩培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為150r/min,培養(yǎng)6d獲得成熟抱子,無菌條件下過濾除去菌絲,采用血球計數(shù)板計數(shù),孢子濃度控制在1×108個/mL。經(jīng)培養(yǎng)獲得的孢子懸液在前期優(yōu)化培養(yǎng)條件下,將11類混合菌株接種于秸稈固體發(fā)酵培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基含有25%的玉米秸稈粉末,接種5天后,每隔2天測定發(fā)酵基質(zhì)中木質(zhì)纖維素含量,計算木質(zhì)素降解率。表2各菌種組合木質(zhì)素降解率(%)序號組合方式第二天第四天第六天第八天第十天1E1+E25.911.326.438.241.92E1+F14.98.716.926.638.23E1+F38.315.427.138.243.54E2+F14.712.216.327.534.35E2+F37.918.121.430.138.66F1+F36.315.122.734.540.17E1+E2+F18.419.330.639.745.58E1+E2+F39.417.535.346.251.79E1+F1+F311.225.537.842.144.110E2+F1+F39.712.133.540.247.311E1+E2+F1+F310.423.539.145.849.3由表2所示,序號8和序號11的菌種組合方式對木質(zhì)素降解率最高,10天后降解率分別達到51.7%和49.3%,復(fù)合菌種由于選擇木質(zhì)素磺酸鈣降解率較高的兩種菌株組合方式,即E1+E2+F3和E1+E2+F1+F3兩種。將兩類復(fù)合菌株進行進一步秸稈木質(zhì)纖維素降解試驗。方法:實驗室條件下將混合菌接種于秸稈固體發(fā)酵培養(yǎng)基,兩種組合方式菌株接種總量相同,各菌株所占比例相同。從第5天開始,每隔2天將不同預(yù)處理時間的秸稈用于干發(fā)酵生產(chǎn)(沼氣周期為30天),同時測定預(yù)處理后的木質(zhì)素、纖維素、半纖維素含量。兩組發(fā)酵累積產(chǎn)氣量、啟動時間及木質(zhì)纖維素含量結(jié)果如表3所示。玉米秸稈木質(zhì)素、纖維素、半纖維素降解率如俯圖1所示。表3混合菌株預(yù)處理玉米秸稈前后數(shù)據(jù)表實驗結(jié)果表明,15天發(fā)酵試驗過程中,與菌種組合方式Ⅰ相比,組合方式Ⅱ?qū)δ举|(zhì)素、纖維素和半纖維素的總降解率高,累計沼氣產(chǎn)氣量較高,發(fā)酵啟動時間較快,因此本實施例中,選用組合方式Ⅱ,即E1、E2、F1、F3四種菌株同比例混合的方式,進行固體粉狀菌種培養(yǎng)與復(fù)合菌劑制備。將獲得的菌種各自批量發(fā)酵,制成固態(tài)粉狀菌劑該復(fù)合菌劑由黃孢原毛平革菌、糙皮側(cè)耳、擔子菌F1、擔子菌F3按質(zhì)量比1:1:1:1比例混合組成,各固體粉狀菌劑微生物濃度>2×108cfu/g。。對本實施例中的堆漚過程中設(shè)置得三個部分:實驗組1、實驗組2和空白組,分別建立1L小型發(fā)酵反應(yīng)器用于三類不同堆漚產(chǎn)物產(chǎn)氣效率測定。發(fā)酵反應(yīng)器內(nèi)厭氧接種物(干物質(zhì)含量(TS)為13.8%)為取自某村莊近郊某戶用沼氣池,經(jīng)中溫馴化培養(yǎng)后使用,接種物投加量20%;添加秸稈使發(fā)酵基質(zhì)總干物質(zhì)含量(TS)達到18~20%,水浴加熱保證發(fā)酵溫度在35℃。對實驗組1投加復(fù)合菌劑和預(yù)處理激活劑;實驗組2僅投加復(fù)合菌劑,不投加預(yù)處理激活劑;空白組在相同條件下自然堆垛無投加復(fù)合菌劑和預(yù)處理激活劑。連續(xù)發(fā)酵30天得到結(jié)果如圖2和圖3所示,圖2為30天沼氣發(fā)酵日產(chǎn)氣量;圖3為沼氣發(fā)酵總產(chǎn)氣量。由測定結(jié)果可知,同時實驗組1稻草秸稈經(jīng)過投加菌劑和激活劑預(yù)處理后,產(chǎn)期穩(wěn)定性較高,總產(chǎn)氣量最大,總體發(fā)酵產(chǎn)氣效果最優(yōu)。上述實施例是對本發(fā)明進行的具體描述,只是對本發(fā)明進行進一步說明,不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限定,本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述發(fā)明的內(nèi)容:通過定向培養(yǎng)菌劑并對秸稈進入預(yù)處理,經(jīng)預(yù)處理后的秸稈再進行沼氣處理,作出一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整均落入本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3