本發(fā)明涉及真核起始因子2B抑制劑多肽及其應用，具體涉及具有抑制真核起始因子2B活性狀態(tài)轉化，治療惡性腫瘤的多肽。
背景技術：
eIF2B(eukaryotic initiation factor 2B，真核起始因子2B)是一種參與真核翻譯起始的重要的蛋白質，也是一種鳥苷酸交換因子。其作用是在翻譯起始過程中，將eIF2上結合的GDP(eIF2·GDP，eIF2的非活性狀態(tài))轉換為GTP(eIF2·GTP，eIF2的活性狀態(tài))，使得eIF2可以重新參與翻譯起始。因此，在細胞中，eIF2B的作用是使足量的eIF2·GTP存在以參與翻譯起始過程。
人體正常細胞在受到外界刺激(如病原體刺激、缺氧、紫外線照射等)的應急作用下，EIF2a的表達會出現一過性的上調，當刺激因素去除后即回復正常。EIF2a對腫瘤發(fā)生有著重要的影響。EIF2a在人類許多惡性腫瘤中廣泛存在過度表達，常見的有胃癌、結直腸癌、甲狀腺癌、非小細胞型肺癌、惡性黑色素瘤、非何杰金淋巴瘤等。一項甲狀腺乳頭狀癌和侵襲性甲狀腺癌組織中EIF2a表達的免疫組化研究發(fā)現，侵襲性甲狀腺癌EIF2a表達顯著高于甲狀腺乳頭狀癌。另一項研究用免疫組化技術分別檢測了胃癌、結腸癌、直腸癌和癌旁組織中的EIF2a表達情況，結果顯示每一組癌組織中EIF2a也明顯高于癌旁組織。這提示EIF2a在胃腸道癌的發(fā)生、發(fā)展和進展中扮演了重要作用。目前，沒有成熟開發(fā)的真核起始因子2B抑制劑多肽問世，用于治療惡性腫瘤。
本專利中的eIF2B抑制劑多肽已證明在黑色素腫瘤和肺癌中有效，具有在其他惡性腫瘤模型中開發(fā)的前景。
技術實現要素：
發(fā)明目的
本發(fā)明提供全新的序列，該序列為真核起始因子2B抑制劑，對惡性腫瘤具有很好的療效。
技術方案
真核起始因子2B抑制劑多肽，其特征在于其序列為SEQ ID NO：1。
真核起始因子2B抑制劑多肽在治療惡性腫瘤，如黑色素瘤和肺癌藥物中的應用。
有益效果
利用固相合成法化學合成真核起始因子2B抑制劑多肽，該多肽具有全新的序列，該多肽可抑制真核起始因子2B活性狀態(tài)轉化，治療惡性腫瘤，如黑色素瘤和肺癌。我們發(fā)現的真核起始因子2B抑制劑多肽可以抑制黑色素瘤細胞和肺癌細胞增殖，并在體內試驗中提高荷瘤小鼠生存率，具有潛在的新藥開發(fā)價值。
具體實施方式
實施例1
真核起始因子2B抑制劑多肽對體外培養(yǎng)人黑色素瘤細胞的生長和存活IC50。
采用MTT比色法。將對數生長的人黑色素瘤細胞，以1.0×105加入96孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物真核起始因子2B抑制劑多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑。每孔設五個復孔，培養(yǎng)48h后，每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶標儀620nm處測定吸光度A值，按公式人黑色素瘤細胞生長抑制率＝(1-實驗組吸光值/對照組吸光值)×100％。計算出實驗藥物的IC50為0.24μM。
實施例2
真核起始因子2B抑制劑多肽對體外培養(yǎng)人肺癌細胞的生長和存活IC50。
采用MTT比色法。將對數生長的人肺癌細胞，以1.0×105加入96孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物真核起始因子2B抑制劑多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑。每孔設五個復孔，培養(yǎng)48h后，每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶標儀620nm處測定吸光度A值，按公式人肺癌細胞生長抑制率＝(1-實驗組吸光值/對照組吸光值)×100％。計算出實驗藥物的IC50為12.48μM。
實施例3
用黑色素瘤腫瘤模型檢測真核起始因子2B抑制劑多肽的體內活力。
建立黑色素瘤腫瘤模型，陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑，實驗組多肽(上海生工合成)設3個劑量：5、10、20mg/Kg。21天后，觀察小鼠存活數量，計算存活率。結果顯示，真核起始因子2B抑制劑多肽可有效地保護荷瘤小鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率達到72.17％。
實施例4
用肺癌腫瘤模型檢測真核起始因子2B抑制劑多肽的體內活力。
建立肺癌腫瘤模型，陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑，實驗組多肽(上海生工合成)設3個劑量：5、10、20mg/Kg。21天后，觀察小鼠存活數量，計算存活率。結果顯示，真核起始因子2B抑制劑多肽可有效地保護荷瘤小鼠，提高小鼠的生存率，生存率達到80.52％。
SEQUENCE LISTING
<110> 蘇州普羅達生物科技有限公司
<120> 一種真核起始因子2B抑制劑多肽及其應用
<130>
<160> 1
<170> Patent In version 3.3
<210> 1
<211> 37
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Leu His Pro Pro Asp Ala Glu Glu Asp Glu Asp Asp Gly Glu Phe Ser
1 5 10 15
Asp Asp Ser Gly Ala Asp Gln Glu Lys Asp Lys Val Lys Met Lys Gly
20 25 30
Tyr Asn Pro Ala Glu
35