本發(fā)明涉及花青素提取，具體是一種紫玉米花青素提取方法。
背景技術(shù)：
1、紫玉米第一大價(jià)值為花青素，花青素是一種水溶性天然色素，屬于多酚類化合物中的類黃酮類，是當(dāng)今人類發(fā)現(xiàn)最有效的抗氧化劑、最強(qiáng)效的自由基清除劑，有極高的營養(yǎng)價(jià)值、保健價(jià)值和藥理功效，可起到清除自由基、抗氧化抗衰老、抗突變抗腫瘤、改善視力、防治心腦血管疾病等功效，在食品化妝品、醫(yī)藥保健等領(lǐng)域有著巨大的市場(chǎng)需求。
2、傳統(tǒng)的花青素提取方法如溶劑浸提法，雖然操作相對(duì)簡單，但提取過程耗時(shí)較長，往往需要數(shù)小時(shí)甚至更長時(shí)間的浸泡和攪拌，導(dǎo)致生產(chǎn)效率低下，而且溶劑使用量大，后續(xù)溶劑回收成本高，還可能帶來環(huán)境污染問題；同時(shí)，常規(guī)方法提取的花青素純度通常不高，含有較多雜質(zhì)，限制了其在高端食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用，鑒于此，我們提出一種紫玉米花青素提取方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種紫玉米花青素提取方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種紫玉米花青素提取方法，包括以下步驟：
3、s1.1、將紫玉米須、穗軸、秸稈、苞葉作為原料，用研磨機(jī)以1000-2000rpm的速度研磨10-15min，得到混合研磨物；將混合研磨物與酶溶液進(jìn)行酶解反應(yīng)，反應(yīng)后用去離子水沖洗并過濾，得到酶解后的混合研磨物；
4、紫玉米須、穗軸、秸稈、苞葉的細(xì)胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠等成分構(gòu)成，這些成分會(huì)阻礙花青素的溶出，酶解反應(yīng)可以破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使花青素更容易從細(xì)胞內(nèi)釋放出來，可以更快地進(jìn)入提取溶劑，從而縮短了整個(gè)提取過程所需的時(shí)間；酶可以分解多糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，這些雜質(zhì)在未處理時(shí)可能會(huì)與花青素一起被提取出來，影響花青素的純度，通過酶解去除這些雜質(zhì)后，得到的花青素純度更高，更有利于后續(xù)的應(yīng)用；此外，通過破壞細(xì)胞壁，酶解還可以減少花青素在儲(chǔ)存過程中受到細(xì)胞內(nèi)其他成分的影響，從而延長花青素的保存期限，保持其生物活性和顏色穩(wěn)定性。
5、s1.2、將酶解后的混合研磨物與乙醇溶液混合，用攪拌器以200-300rpm的速度攪拌15-30min，再加入濃度為3-5mm的n-?；被?，放入微波反應(yīng)器中進(jìn)行萃?。惠腿⊥瓿珊螅M(jìn)行過濾，得到含有花青素的萃取液；
6、在微波萃取過程中，微波產(chǎn)生的熱量和電磁場(chǎng)可能會(huì)引發(fā)花青素分子內(nèi)的化學(xué)鍵振動(dòng)、斷裂等變化，而n-?；被峥梢酝ㄟ^與花青素分子的氫鍵或其他弱相互作用，穩(wěn)定花青素的分子結(jié)構(gòu)，減少因微波輻射導(dǎo)致的降解，從而提高萃取后花青素的完整性和質(zhì)量；在微波作用下，n-酰基氨基酸能與原料細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)成分相互作用，增加細(xì)胞膜的通透性，使得花青素更容易從細(xì)胞內(nèi)部釋放到萃取溶劑中，進(jìn)而提高萃取效率；微波萃取過程可能會(huì)產(chǎn)生一些自由基，這些自由基會(huì)對(duì)花青素的品質(zhì)產(chǎn)生負(fù)面影響，花青素與n-酰基氨基酸共同作用來清除這些自由基，從而減少自由基對(duì)花青素的氧化損傷。
7、微波萃取是一種高效的提取技術(shù)，與傳統(tǒng)的溶劑提取法相比，微波萃取能夠顯著縮短提取時(shí)間，在微波場(chǎng)的作用下，植物細(xì)胞內(nèi)的極性分子(如水分)會(huì)迅速吸收微波能，產(chǎn)生大量的熱量，使細(xì)胞內(nèi)部的溫度急劇升高，壓力增大，從而導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂；花青素分子結(jié)構(gòu)中含有極性基團(tuán)，能夠較好地吸收微波能，而植物原料中的其他成分可能對(duì)微波能的吸收較弱，這使得在微波萃取過程中，花青素可以優(yōu)先從原料中被提取出來，相對(duì)減少了其他雜質(zhì)成分的溶出，有利于提高花青素的純度。
8、s1.3、將含有花青素的萃取液緩慢通過活化的大孔樹脂，使花青素能夠充分接觸并被樹脂吸附；用去離子水對(duì)樹脂進(jìn)行沖洗，直至流出液無色；再將濃度為70-95％的乙醇溶液以1-2ml/min流速通過大孔樹脂，得到花青素洗脫液；
9、花青素分子可以進(jìn)入樹脂的孔隙被吸附，而一些雜質(zhì)分子由于大小、極性等不符合樹脂的吸附條件而不被吸附或僅少量吸附，從而通過后續(xù)的洗脫步驟與花青素分離；與一些傳統(tǒng)的純化方法(如化學(xué)沉淀法可能會(huì)引入新的化學(xué)物質(zhì)，或者高溫蒸餾法可能會(huì)破壞花青素的活性)相比，大孔樹脂純化過程相對(duì)溫和，在合適的操作條件下，大孔樹脂對(duì)花青素的吸附和洗脫過程不會(huì)對(duì)花青素的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性造成嚴(yán)重破壞。
10、s1.4、將花青素洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，真空度為20-50mmhg，旋轉(zhuǎn)速度為80-150rpm，溫度為30-40℃，濃縮時(shí)間為4-6h，得到花青素濃縮液；再將花青素濃縮液進(jìn)行冷凍干燥，得到花青素。
11、作為優(yōu)選，所述s1.1中，酶溶液是將水解酶溶解在ph值為4-6的檸檬酸-磷酸鹽緩沖液中，酶溶液的濃度為50-100u/ml。
12、作為優(yōu)選，所述水解酶為半纖維素酶或β-葡萄糖苷酶中的任一種。
13、作為優(yōu)選，所述s1.1中，酶解反應(yīng)是將混合研磨物與酶溶液在37-50℃下反應(yīng)2-4h，反應(yīng)完成后加入濃度為1-10μg/ml的亮抑酶肽終止酶反應(yīng)。
14、作為優(yōu)選，所述s1.2中，乙醇溶液的濃度為50-70％。
15、作為優(yōu)選，所述s1.2中，混合研磨物與乙醇溶液的料液比1:25-45g/ml。
16、作為優(yōu)選，所述s1.2中，微波反應(yīng)器的功率為400-600w，溫度保持在40-50℃，萃取時(shí)間為10-20min。
17、作為優(yōu)選，所述s1.3中，含有花青素的萃取液緩慢通過大孔樹脂的速度為1-2ml/min。
18、作為優(yōu)選，所述s1.3中，大孔樹脂為ab-8大孔樹脂或d101大孔樹脂中的任一種。
19、作為優(yōu)選，所述s1.4中，冷凍干燥的溫度為-40～-50℃，干燥時(shí)間為8-10h。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
20、1、該一種紫玉米花青素提取方法中，添加水解酶，由于其可以破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使花青素更容易從細(xì)胞內(nèi)釋放出來，可以更快地進(jìn)入提取溶劑，從而縮短了整個(gè)提取過程所需的時(shí)間；此外，水解酶還可以去除一些雜質(zhì)，使得到的花青素純度更高。
21、2、該一種紫玉米花青素提取方法中，添加n-酰基氨基酸，由于其可以通過與花青素分子的氫鍵或其他弱相互作用，穩(wěn)定花青素的分子結(jié)構(gòu)，減少因微波輻射導(dǎo)致的降解，從而提高萃取后花青素的完整性和質(zhì)量；微波萃取過程中產(chǎn)生的自由基會(huì)對(duì)花青素的品質(zhì)產(chǎn)生影響，n-酰基氨基酸能夠清除這些自由基，從而減少自由基對(duì)花青素的氧化損傷。
1.一種紫玉米花青素提取方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.1中，酶溶液是將水解酶溶解在ph值為4-6的檸檬酸-磷酸鹽緩沖液中，酶溶液的濃度為50-100u/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述水解酶為半纖維素酶或β-葡萄糖苷酶中的任一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.1中，酶解反應(yīng)是將混合研磨物與酶溶液在37-50℃下反應(yīng)2-4h，反應(yīng)完成后加入濃度為1-10μg/ml的亮抑酶肽終止酶反應(yīng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.2中，乙醇溶液的濃度為50-70％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.2中，混合研磨物與乙醇溶液的料液比1:25-45g/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.2中，微波反應(yīng)器的功率為400-600w，溫度保持在40-50℃，萃取時(shí)間為10-20min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.3中，含有花青素的萃取液緩慢通過大孔樹脂的速度為1-2ml/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.3中，大孔樹脂為ab-8大孔樹脂或d101大孔樹脂中的任一種。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫玉米花青素提取方法，其特征在于，所述s1.4中，冷凍干燥的溫度為-40～-50℃，干燥時(shí)間為8-10h。