本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一株植物乳植桿菌yw99及其細(xì)胞裂解物的制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、致病菌是引起人類(lèi)疾病的細(xì)菌，形體微小，可通過(guò)多種途徑進(jìn)入人體，在人體內(nèi)寄生、增殖并引起疾病。常見(jiàn)的食源性致病菌主要有大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌，以食品為傳播媒介，直接或間接污染食品及水源，經(jīng)口感染引起食物中毒或傳染病，也是導(dǎo)致食品安全問(wèn)題的重要原因。

2、現(xiàn)有的預(yù)防、消滅食源性致病菌的天然抑菌劑較為局限。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，抗生素作為農(nóng)用飼料添加劑被廣泛用于預(yù)防動(dòng)物疾病、促進(jìn)生長(zhǎng)，然而，過(guò)度使用會(huì)引起細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)等嚴(yán)重問(wèn)題，對(duì)人類(lèi)健康與生態(tài)環(huán)境構(gòu)成潛在威脅，目前抗生素的使用已被明令禁止。在食品領(lǐng)域中，隨著全球?qū)κ称钒踩珮?biāo)準(zhǔn)的日益嚴(yán)苛，傳統(tǒng)化學(xué)合成抑菌劑的應(yīng)用受到諸多限制，以面包、面條等日常主食為例，過(guò)去常用的脫氧乙酸鈉抑菌劑，因其潛在的健康風(fēng)險(xiǎn)，已被強(qiáng)制要求替換。

3、天然抑菌劑主要是來(lái)源于動(dòng)物、植物、微生物提取物等，對(duì)人體安全性更高、且符合綠色環(huán)保要求。但目前市場(chǎng)上可供選擇的針對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的天然抗菌抑菌物質(zhì)仍十分有限，如乳酸鏈球菌素（nisin）雖有一定抑菌功效，但其抗菌譜相對(duì)較窄，主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，但不能對(duì)革蘭氏陰性菌以及酵母產(chǎn)生抑制作用。這不僅制約了各行業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展，也無(wú)法滿足日益多樣化的市場(chǎng)需求。因此，在飼料、食品等領(lǐng)域急需一種新的天然、安全、具備廣譜抗菌能力、高效的替代物質(zhì)，推動(dòng)產(chǎn)業(yè)的升級(jí)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘恢曛参锶橹矖U菌yw99及植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物。

2、本發(fā)明的第一目的在于提供一株植物乳植桿菌，植物乳植桿菌為植物乳植桿菌yw99，分類(lèi)命名為 lactiplantibacillus?plantarum，于2024年12月23日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為cgmcc?no.33160。

3、本發(fā)明的第二目的在于提供一種植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物，植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物由保藏編號(hào)為cgmcc?no.33160的植物乳植桿菌yw99制備得到，植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物至少滿足以下一項(xiàng)：（1）至少包括1010cfu/ml的滅活植物乳植桿菌yw99菌體；（2）包括植物乳植桿菌yw99的代謝產(chǎn)物乳酸和乙酸，乳酸含量≥22mg/100g、乙酸含量≥5mg/100g；（3）包括植物乳植桿菌yw99的代謝產(chǎn)物類(lèi)黃酮，類(lèi)黃酮含量≥52mg/g；（4）包括植物乳植桿菌yw99的代謝產(chǎn)物氨基酸，氨基酸含量≥70μmol/ml；（5）包括植物乳植桿菌yw99的代謝產(chǎn)物多糖，多糖含量≥700mg/l。

4、本發(fā)明的第三目的在于提供一種植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物的制備方法，包括：將植物乳植桿菌yw99接種于固體mrs培養(yǎng)基中，在20℃-40℃、好氧條件下培養(yǎng)24h-48h，得到y(tǒng)w99活化菌株；將yw99活化菌株按1%-10%的接種量接種于液體mrs培養(yǎng)基中，在20℃-40℃、好氧條件下培養(yǎng)12h-48h，得到y(tǒng)w99發(fā)酵液；將yw99發(fā)酵液置于80℃-121℃溫度下滅活，離心取上清液，后處理上清液，得到植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物。

5、進(jìn)一步的，植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物為固態(tài)物時(shí)，后處理至少采用以下一種操作：（1）冷凍干燥：預(yù)凍溫度為-80℃，預(yù)凍時(shí)間為2h，物料厚度為1.0cm-1.5cm，凍干時(shí)間為20h-30h，所得固體粉末為yw99細(xì)胞裂解物；（2）噴霧干燥：在固形物含量低于30%條件下，進(jìn)氣量為40m3/h、進(jìn)口溫度為75℃、出口溫度為40℃，所得固體粉末為yw99細(xì)胞裂解物。

6、本發(fā)明的第四目的在于提供一種植物乳植桿菌yw99和/或植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物在制備具有提高機(jī)體免疫功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

7、本發(fā)明的第五目的在于提供一種植物乳植桿菌yw99和/或植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物在制備具有抑菌功能和/或具有防腐保鮮功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8、進(jìn)一步的，上述的抑菌功能至少包括以下一項(xiàng)：（1）抑制大腸埃希菌的生長(zhǎng)；（2）抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)；（3）抑制綠膿桿菌的生長(zhǎng)。

9、進(jìn)一步的，上述的產(chǎn)品為食品，食品包括預(yù)制菜、預(yù)制面食、烘焙制品、乳制品中的一種及以上。

10、進(jìn)一步的，上述的具有提高機(jī)體免疫功能的產(chǎn)品、以及具有抑菌功能和/或具有防腐保鮮功能的產(chǎn)品為農(nóng)業(yè)產(chǎn)品，農(nóng)業(yè)產(chǎn)品為寵物零食、動(dòng)物飼料。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

12、（1）本申請(qǐng)?zhí)峁┮恢曛参锶橹矖U菌yw99，該菌株從西藏開(kāi)菲爾粒中分離篩選得到，是一種益生菌，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有一定提高機(jī)體免疫力的作用，還具有較強(qiáng)的針對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的抑菌功能，在食品、農(nóng)業(yè)產(chǎn)品中具有一定應(yīng)用價(jià)值。

13、（2）本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物，該植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物通過(guò)熱滅活方式制成，制備方法簡(jiǎn)單、高效，制得的植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等致病菌的生長(zhǎng)均有良好抑制作用，且該制備方法能提高植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物中有效物質(zhì)的濃度，增強(qiáng)植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物的針對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的抑菌效果。

14、（3）本申請(qǐng)基于植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物的功能，將植物乳植桿菌yw99或植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物應(yīng)用于農(nóng)業(yè)領(lǐng)域、食品領(lǐng)域，為市場(chǎng)提供了一種源于自然、對(duì)人體安全性高的選擇。與化學(xué)類(lèi)抗菌抑菌藥物和抗生素類(lèi)藥劑相比，具有天然、安全無(wú)毒、生物相容性好等特性，符合綠色環(huán)保要求因此適用范圍更廣；與傳統(tǒng)益生菌類(lèi)制劑相比，植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物無(wú)致病性、代謝產(chǎn)物釋放更加完全。

技術(shù)特征：

1.一株植物乳植桿菌，其特征在于，所述植物乳植桿菌為植物乳植桿菌yw99，分類(lèi)命名為lactiplantibacillus?plantarum，于2024年12月23日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為cgmcc?no.33160。

2.一種植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物，其特征在于，所述植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物由所述保藏編號(hào)為cgmcc?no.33160的植物乳植桿菌yw99制備得到，所述植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物至少滿足以下一項(xiàng)：

3.一種植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物的制備方法，其特征在于，包括：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物為固態(tài)物時(shí)，后處理至少采用以下一種操作：

5.權(quán)利要求1所述植物乳植桿菌yw99和/或權(quán)利要求2所述植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物在制備具有提高機(jī)體免疫功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求1所述植物乳植桿菌yw99和/或權(quán)利要求2所述植物乳植桿菌yw99細(xì)胞裂解物在制備具有抑菌功能和/或具有防腐保鮮功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑菌功能至少包括以下一項(xiàng)：

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述產(chǎn)品為食品，所述食品包括預(yù)制菜、預(yù)制面食、烘焙制品、乳制品中的一種及以上。

9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述產(chǎn)品為農(nóng)業(yè)產(chǎn)品，所述農(nóng)業(yè)產(chǎn)品為寵物零食、動(dòng)物飼料。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一株植物乳植桿菌YW99及其細(xì)胞裂解物的制備方法和應(yīng)用。植物乳植桿菌為植物乳植桿菌YW99，分類(lèi)命名為植物乳植桿菌Lactiplantibacillus?plantarum，已于2024年12月23日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC?No.33160。植物乳植桿菌YW99細(xì)胞裂解物為植物乳植桿菌YW99加熱滅活后經(jīng)一系列操作制備而得，具有良好的安全性，不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用，具有一定提高機(jī)體免疫力的功能，且能對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌表現(xiàn)出不同程度的抑菌能力，其在食品、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域具有很好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：王艷萍,于明輝
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津科技大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/10