本發(fā)明涉及飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種飼用添加劑的替抗性能評(píng)估方法。
背景技術(shù)：
：仔豬腹瀉(下痢)是制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的一個(gè)瓶頸，給養(yǎng)豬行業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。仔豬腹瀉主要是由大腸桿菌、沙門氏菌和魏氏梭菌引起的細(xì)菌性腹瀉，最為普遍的是大腸桿菌和沙門氏菌引起的黃痢和白痢。目前治療仔豬腹瀉通常使用抗生素，然而抗生素的耐藥性和藥物殘留為抗生素類藥物的使用敲響了警鐘，治療過程中又存在副作用，易造成食品安全癮患，農(nóng)業(yè)部將全面禁止在動(dòng)物飼料中添加抗生素，因此開發(fā)新型抗生素替代品迫在眉睫。目前，市面上宣稱可替代抗生素的添加劑產(chǎn)品層出不窮，包括植物提取物、溶菌酶、酸化劑等多個(gè)種類，不僅種類繁多，性能方面也是魚龍混雜，因此必須對(duì)其性能進(jìn)行有效評(píng)估才能確認(rèn)其是否可達(dá)到抗生素替代作用。傳統(tǒng)的替抗性能評(píng)估方法是在飼料中添加待評(píng)估的添加劑，飼喂后考察動(dòng)物生長(zhǎng)性能，這種評(píng)估方法周期長(zhǎng)，需要大規(guī)模試驗(yàn)場(chǎng)地，評(píng)估成本高，為此，開發(fā)一種低成本、快速、準(zhǔn)確評(píng)估飼用添加劑的抗生素替代性是飼料研究領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為克服現(xiàn)有的飼用添加劑在評(píng)估抗生素替代效果方面存在的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種飼用添加劑的替抗性能評(píng)估方法。本發(fā)明的飼用添加劑替抗性能評(píng)估方法為：將待評(píng)估的飼用添加劑灌服腹瀉動(dòng)物，通過評(píng)估動(dòng)物康復(fù)率以評(píng)估所述飼用添加劑的替抗性能?？傮w來說，本發(fā)明的評(píng)估方法將傳統(tǒng)的飼喂動(dòng)物模式改變?yōu)楦鼮楹?jiǎn)便的直接灌服腹瀉動(dòng)物的模式，將生長(zhǎng)性能的考察改變?yōu)榭祻?fù)狀況的考察，從根本上改變了傳統(tǒng)的添加劑替抗性能評(píng)估思路。在此基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員還可結(jié)合具體養(yǎng)殖情況，如溫濕度影響、動(dòng)物本身差異(品種、體重等)、欄舍環(huán)境影響等等作出適當(dāng)調(diào)整，排除不利影響因素。本發(fā)明的評(píng)估方法需排除灌服動(dòng)物存在的其他疫情，尤其是病毒性疫情，以使替抗性能評(píng)估結(jié)果更加準(zhǔn)確和可靠。在根據(jù)本發(fā)明的評(píng)估方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述評(píng)估方法包括以下過程：將待評(píng)估的飼用添加劑灌服腹瀉動(dòng)物，評(píng)估動(dòng)物康復(fù)率，達(dá)到50％以上表示所述待評(píng)估的飼用添加劑具備替抗性能。在根據(jù)本發(fā)明的評(píng)估方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述評(píng)估方法包括以下過程：將待評(píng)估的飼用添加劑灌服腹瀉動(dòng)物，采用抗生素灌服腹瀉動(dòng)物作為對(duì)照組，評(píng)估動(dòng)物康復(fù)率，達(dá)到所述對(duì)照組灌服動(dòng)物康復(fù)率的70％以上表示所述待評(píng)估的飼用添加劑具備替抗性能?？股亍⑻婵巩a(chǎn)品對(duì)于治療腹瀉動(dòng)物的康復(fù)情況并不相同，甚至存在巨大差異，在此情形下，可采用現(xiàn)有的抗生素產(chǎn)品作為對(duì)照組，通過對(duì)比考察腹瀉動(dòng)物的康復(fù)狀況來評(píng)估替抗性能，彌補(bǔ)不足。在根據(jù)本發(fā)明的評(píng)估方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，還可將待評(píng)估飼用添加劑的動(dòng)物康復(fù)率同時(shí)結(jié)合對(duì)照組相對(duì)康復(fù)率來考察灌服動(dòng)物的整體康復(fù)狀況。上述評(píng)估方法的實(shí)施方案中，抗生素對(duì)照組可選用現(xiàn)有的飼料抗生素種類，或可根據(jù)所需治療效果選擇合適的抗生素種類作為對(duì)照組，包括但不限于硫酸粘桿菌素、喹乙醇、吉他霉素等。本發(fā)明的評(píng)估方法中，灌服治療腹瀉動(dòng)物的灌服時(shí)間可以為2～4天，優(yōu)選為3天，腹瀉動(dòng)物如無明顯改善則立刻停止灌服。本發(fā)明的評(píng)估方法中，腹瀉動(dòng)物為中度或重度的細(xì)菌性腹瀉。選擇中度或重度腹瀉動(dòng)物可更好地排除動(dòng)物自愈情形的影響，中度或重度的程度可根據(jù)本領(lǐng)域常見的動(dòng)物腹瀉評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)來確定。例如，仔豬的腹瀉評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)可參見：司馬博鋒等，“不同料型教槽料對(duì)乳仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉、皮毛狀況的影響”，2011。細(xì)菌性腹瀉是指由大腸桿菌、沙門氏菌、魏氏梭菌等細(xì)菌引起的腹瀉。本發(fā)明的評(píng)估方法中，腹瀉動(dòng)物的數(shù)量一般可以為20只以上，通常數(shù)量越多所得評(píng)估結(jié)果越可靠，但過多的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)帶來成本上的劣勢(shì)，因此優(yōu)選數(shù)量為20～30只。本發(fā)明的評(píng)估方法中，在評(píng)估腹瀉動(dòng)物康復(fù)率的基礎(chǔ)上還可以包括繼續(xù)灌服鞏固治療2天，通過評(píng)估動(dòng)物的腹瀉反復(fù)率以評(píng)估所述飼用添加劑的替抗性能。腹瀉反復(fù)率可反映出添加劑替抗性能的穩(wěn)定性，也能從另一方面反映出添加劑的替抗性能。本發(fā)明的評(píng)估方法可適用于家畜、家禽飼料等領(lǐng)域，優(yōu)選可以為保育豬飼料添加劑的評(píng)估。本發(fā)明還提供了一種飼用添加劑的替抗性能組合式評(píng)估方法，包括初篩和再次評(píng)估兩步驟，其中，所述初篩步驟采用以上技術(shù)方案任一項(xiàng)所述的評(píng)估方法。再次評(píng)估步驟可選用傳統(tǒng)的飼喂動(dòng)物的評(píng)估模式，通過兩種評(píng)估模式的組合，可進(jìn)一步提高替抗性評(píng)估的高效性和準(zhǔn)確性，尤其是當(dāng)待評(píng)估的添加劑種類繁多且替抗性能不明確時(shí)。本發(fā)明提供的飼用添加劑的替抗性能評(píng)估方法改變了傳統(tǒng)的評(píng)估模式，通過灌服腹瀉動(dòng)物并考察動(dòng)物的康復(fù)狀況來評(píng)估添加劑的抗生素替代效果，可顯著縮短評(píng)估時(shí)間，無需大范圍的養(yǎng)殖場(chǎng)地，極大降低了評(píng)估的成本，提高了效率，而且評(píng)估結(jié)果與傳統(tǒng)評(píng)估方法相近，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。本發(fā)明的評(píng)估方法可單獨(dú)使用，亦可作為初篩步驟與傳統(tǒng)評(píng)估方法組合使用，面對(duì)市場(chǎng)上日漸眾多的飼用添加劑產(chǎn)品，將是一種新型的、高效的飼用添加劑替抗性能評(píng)估方法。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將進(jìn)一步描述本發(fā)明的示例性實(shí)施例的技術(shù)方案。實(shí)施例1福樂寶(植物提取物)與超級(jí)抗敵素(硫酸粘桿菌素)灌服對(duì)比試驗(yàn)福樂寶為市售飼料添加劑(無錫正大生物股份有限公司)，其主要成分為：淫羊藿、馬齒莧、地錦草、金櫻子、女貞子等(淫羊藿苷0.08％-0.12％，槲皮素>0.01％，齊墩果酸>0.008％)。目前，福樂寶作為飼料添加劑的主要作用在于抑菌、消炎、保護(hù)胃腸道粘膜和調(diào)節(jié)胃腸道功能，尚沒有明確的替抗性能報(bào)道。本實(shí)施例考察灌服治療仔豬腹瀉的效果，并與現(xiàn)有的飼用抗生素進(jìn)行對(duì)照，從而評(píng)估作為豬飼料中替代或補(bǔ)充傳統(tǒng)飼用抗生素的可行性。1、試驗(yàn)對(duì)象：腹瀉仔豬：在豬場(chǎng)無明顯疫情的情況下，以超級(jí)抗敵素為對(duì)照組，福樂寶為試驗(yàn)組，對(duì)保育舍腹瀉仔豬進(jìn)行灌服治療。如灌服3天無效則說明不對(duì)癥，及時(shí)停止。(1)福樂寶使用方案將1.5g福樂寶產(chǎn)品與15ml溫水沖溶放涼5-10分鐘，去掉殘?jiān)?，溶解后體積增長(zhǎng)至17ml，要求現(xiàn)配現(xiàn)用。使用灌服工具如一次性注射器，根據(jù)灌服劑量與豬只大小選擇合適容積的灌服工具。對(duì)于腹瀉仔豬，每頭腹瀉豬每天灌服兩次，每次8.5ml，每次灌服前務(wù)必?fù)u蕩、混勻，福樂寶灌服總頭數(shù)達(dá)到20頭即可。(2)超級(jí)抗敵素使用方案將1g超級(jí)抗敵素與40ml生理鹽水混合。使用灌服工具如一次性注射器，根據(jù)灌服劑量與豬只大小選擇合適容積的灌服工具。對(duì)于腹瀉仔豬，每頭腹瀉豬每天灌服兩次，每次10ml，每次灌服前務(wù)必?fù)u蕩、混勻，并立即進(jìn)行灌服，超級(jí)抗敵素灌服總頭數(shù)達(dá)到20頭即可。2、效果觀察與記錄每天早上灌服前觀察一次腹瀉仔豬恢復(fù)情況，記錄康復(fù)豬頭數(shù)以及康復(fù)后的反復(fù)頭數(shù)，并計(jì)算康復(fù)率。3、試驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)(治療+鞏固)每頭腹瀉仔豬治療灌服3天，灌服見效后繼續(xù)灌服2天鞏固，全程觀察試驗(yàn)對(duì)象恢復(fù)后是否有反復(fù)情況；如灌服3天仍無效則馬上停止，淘汰，并用藥物治療。4、試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果分別如表1、表2所示：福樂寶組仔豬在灌服治療第3天仍有8頭仔豬腹瀉(淘汰出試驗(yàn))，針對(duì)康復(fù)的12頭仔豬繼續(xù)進(jìn)行2天的鞏固治療后無反復(fù)情況，康復(fù)率為60％；而超級(jí)抗敵素組仔豬在灌服治療后的第3天，14頭腹瀉仔豬均已康復(fù)，另外6頭仍腹瀉(淘汰出試驗(yàn))，在后續(xù)鞏固治療中未出現(xiàn)反復(fù)情況，康復(fù)率為70％。表1福樂寶組仔豬的試驗(yàn)效果表2超級(jí)抗敵素組仔豬的試驗(yàn)效果綜合表1、表2結(jié)果可知，超級(jí)抗敵素在灌服治療仔豬抗腹瀉方面效果好，見效快，福樂寶治療腹瀉方面效果比超級(jí)抗敵素稍差，但也具有明顯的治療效果，而且在防止腹瀉反復(fù)方面和超級(jí)抗敵素效果相當(dāng)，說明福樂寶具有較好的抗生素替代效果，可用作飼用抗生素的替代品或補(bǔ)充品。5、效果驗(yàn)證采用福樂寶作為飼料添加劑進(jìn)行動(dòng)物飼養(yǎng)試驗(yàn)，即通過傳統(tǒng)的飼養(yǎng)試驗(yàn)驗(yàn)證福樂寶是否具備抗生素替代性。于2017年3月27日到2017年4月10日在武漢天種長(zhǎng)大豬場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)選擇同批轉(zhuǎn)群、體重在10kg左右的健康丹法系長(zhǎng)白與丹法系大約克二元雜保育仔豬225頭，隨機(jī)分為3個(gè)處理組，分別為藥物組、福樂寶組、空白對(duì)照組，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25頭小豬，進(jìn)行為期14天的飼養(yǎng)試驗(yàn)。藥物組的抗生素包括：10％超級(jí)硫酸粘桿菌素，20ppm；50％吉他霉素，55ppm；有效成分計(jì)。福樂寶組含有1000ppm的福樂寶產(chǎn)品。試驗(yàn)料由廣東金新農(nóng)飼料有限公司負(fù)責(zé)生產(chǎn)和提供，均為顆粒料，試驗(yàn)料的實(shí)測(cè)值見表3。表3試驗(yàn)料的實(shí)測(cè)值試驗(yàn)料水份(％)粗蛋白(％)粗灰份(％)鈣(％)總磷(％)藥物組13.4217.705.430.850.68福樂寶組12.7418.155.460.860.71空白對(duì)照組13.0618.135.530.860.69試驗(yàn)豬的管理以天種長(zhǎng)大豬場(chǎng)實(shí)際飼養(yǎng)管理為基礎(chǔ)，助研員專人管理，各組在相同的飼養(yǎng)管理和環(huán)境條件下進(jìn)行，保持飼料新鮮，保持豬舍環(huán)境舒適，每天觀察試驗(yàn)豬采食、健康及活動(dòng)情況，發(fā)現(xiàn)病豬后為該豬作標(biāo)記號(hào)，跟蹤記錄發(fā)病日期、持續(xù)時(shí)間、治療方案、康復(fù)情況，嚴(yán)重發(fā)病要剔除試驗(yàn)欄，并稱取病豬的體重，做好日期和體重的記錄。測(cè)定以下試驗(yàn)指標(biāo)：(1)生產(chǎn)性能：日采食量、日增重、料肉比。(2)腹瀉指數(shù)：發(fā)現(xiàn)腹瀉病豬后為該豬作標(biāo)記號(hào)，跟蹤記錄發(fā)病日期、持續(xù)時(shí)間、治療方案、康復(fù)情況；嚴(yán)重發(fā)病要剔除試驗(yàn)欄，并稱取病豬的體重，做好日期和體重的記錄。根據(jù)評(píng)分結(jié)果計(jì)算每窩腹瀉指數(shù)，其計(jì)算公式為：每窩腹瀉指數(shù)＝觀察記錄分?jǐn)?shù)總和/(觀察總天數(shù)*每窩仔豬數(shù))。試驗(yàn)豬只的生產(chǎn)性能見表4所示。表4試驗(yàn)豬只生產(chǎn)性能評(píng)分表處理藥物組福樂寶組空白對(duì)照組試驗(yàn)天數(shù)141414試驗(yàn)初頭數(shù)757575試驗(yàn)初始日齡353535初均重(kg)10.199±1.21010.250±1.24510.254±1.332末頭數(shù)747574末均重(kg)15.650±0.99815.687±1.74715.600±2.054adfi(g)575±11576±24570±54adg(g)389±25388±33382±44fcr1.478±0.411.484±0.801.492±0.86腹瀉指數(shù)0.025±0.0480.028±0.0230.037±0.021備注：試驗(yàn)過程中個(gè)別豬只腳痛或跛腳以及剔除倒地病豬由表4結(jié)果可知：(1)在平均日采食量方面，藥物組為575g/頭，福樂寶組為576g/頭，空白對(duì)照組為570g/頭，藥物組與福樂寶組相差不大，福樂寶組比空白對(duì)照組增加1.05％，藥物組比空白對(duì)照組增加0.88％；(2)在平均日增重方面，藥物組為389g/頭/d，福樂寶組為388g/頭/d，空白對(duì)照組為382g/頭/天，藥物組與福樂寶組相差不大，福樂寶組比空白對(duì)照組增加1.57％，藥物組比空白對(duì)照組增加1.83％；(3)在料肉比方面，藥物組為1.478，福樂寶組為1.484，空白對(duì)照組為1.492；(4)腹瀉方面，藥物組腹瀉指數(shù)為0.025，福樂寶組腹瀉指數(shù)為0.028，空白對(duì)照組腹瀉指數(shù)為0.037。綜合以上結(jié)果得出：藥物組與福樂寶組仔豬生產(chǎn)性能均優(yōu)于空白對(duì)照組，而藥物組與福樂寶組性能相當(dāng)，充分說明，傳統(tǒng)評(píng)估方法下得出福樂寶具有較好的抗生素替代效果，可用作飼用抗生素的替代品或補(bǔ)充品。綜上所述，動(dòng)物灌服試驗(yàn)與飼養(yǎng)試驗(yàn)的評(píng)估結(jié)果基本一致，即福樂寶對(duì)仔豬腹瀉有較好的效果，說明本發(fā)明的評(píng)估方法結(jié)果準(zhǔn)確，可靠，而且相對(duì)于傳統(tǒng)方法耗時(shí)短、無需大規(guī)模試驗(yàn)場(chǎng)地，是一種快速、高效、低成本的評(píng)估方法。實(shí)施例2美佑壯(植物提取物)與超級(jí)抗敵素灌服對(duì)比試驗(yàn)美佑壯(有效成分：1.5％血根堿、0.75％白屈菜紅堿)為市售的中獸藥添加劑(湖南美可達(dá)生物資源有限公司)，是已知的可替代抗生素的飼料添加劑，考察通過灌服治療仔豬腹瀉的效果。將1g美佑壯產(chǎn)品與50ml生理鹽水混合，美佑壯微溶于水，需攪拌使其充分溶解。采用實(shí)施例1的方法對(duì)腹瀉仔豬進(jìn)行灌服，并設(shè)置超級(jí)抗敵素作為對(duì)照組，每組灌服總頭數(shù)達(dá)到20頭即可。試驗(yàn)結(jié)果分別如表5、表6所示：美佑壯組仔豬在灌服治療第3天仍有10頭仔豬腹瀉(淘汰出試驗(yàn))，針對(duì)康復(fù)的10頭仔豬繼續(xù)進(jìn)行2天的鞏固治療后無反復(fù)情況，康復(fù)率為50％；而超級(jí)抗敵素組仔豬在灌服治療后的第3天，14頭腹瀉仔豬均已康復(fù)，另外6頭仍腹瀉(淘汰出試驗(yàn))，在后續(xù)鞏固治療中，有2頭出現(xiàn)反復(fù)情況，康復(fù)率為60％，反復(fù)率為10％。表5美佑壯組仔豬的試驗(yàn)效果表6超級(jí)抗敵素組仔豬的試驗(yàn)效果綜合表5、表6結(jié)果可知，通過本發(fā)明的灌服方法評(píng)估出美佑壯治療腹瀉方面效果可與超級(jí)抗敵素相當(dāng)，說明本發(fā)明的灌服方法作為評(píng)估添加劑的抗生素替代效果是一種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、結(jié)果可靠的方法。除非特別限定，本發(fā)明所用術(shù)語均為本領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解的含義。本發(fā)明所描述的實(shí)施方式僅出于示例性目的，并非用以限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，本領(lǐng)域技術(shù)人員可在本發(fā)明的范圍內(nèi)作出各種其他替換、改變和改進(jìn)，因而，本發(fā)明不限于上述實(shí)施方式，而僅由權(quán)利要求限定。當(dāng)前第1頁12