專利名稱：一種貫月忍冬的育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種忍冬的育苗方法。
背景技術(shù)：
貫月忍冬(Zoflicera sempervirens)屬于忍冬科忍冬屬纏繞型攀緣藤本植物，原產(chǎn)北美。常綠纏繞藤本，北京植物園引種變?yōu)槁淙~性，具有生長蔓延快、抗性強(qiáng)、花期長、繁殖容易等特點(diǎn)，花色鮮艷，枝繁葉茂，單株覆蓋面廣，平面和立體效果好，是不可多得的園林觀賞樹種之一。春季在5 °C以上植物體液開始流動(dòng)，10 °C時(shí)芽開始膨大發(fā)育，15°C時(shí)植株進(jìn)入生長期，在陽光充足的露地條件下，葉色濃綠，花色鮮艷，從早春到晚秋均花開滿枝，入冬后在室內(nèi)生長的貫月忍冬葉色依然濃綠，正常開花，在室外生長的植株葉片凋落，以莖越冬。目前，關(guān)于貫月忍冬的育苗技術(shù)主要為無性繁殖(即分株、壓條、硬枝扦插、綠枝扦插)等技術(shù)，利用組培技術(shù)繁育貫月忍冬的技術(shù)及對貫月忍冬的育苗尚未有人研究，優(yōu)良品種的推廣普及尚未完成，苗木供求矛盾日益加劇，嚴(yán)重影響了貫月忍冬的園林應(yīng)用和推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有的不足提供了一種貫月忍冬的育苗方法。本發(fā)明通過以下方法實(shí)現(xiàn)上述目的。一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟
(1)移栽前準(zhǔn)備土壤若肥力不足，必須先進(jìn)行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機(jī)肥3000kg,另加尿素50kg,為預(yù)防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細(xì)耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細(xì)，平整床面后進(jìn)行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細(xì),床面中央稍高,兩側(cè)稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢；
(2)移栽以及管理將經(jīng)過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當(dāng)天要澆透定根水，如遇連續(xù)晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時(shí)排水，移栽后35天內(nèi)要架設(shè)遮陽網(wǎng)，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結(jié)合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時(shí)松土除草，以防止土壤表面板結(jié)；
所述的組培苗通過以下方法得到
①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體；
②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時(shí)間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片；
③初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為1800-19001uX，待培養(yǎng)22天左右后，新芽長至3. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
④繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè) 階段；
⑤生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在1/2MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
⑥煉苗移栽先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在28°C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。有益效果本發(fā)明對貫月忍冬采用組織培養(yǎng)技術(shù)，以嫩莖段和葉片為外植體，經(jīng)外植體滅菌、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽步驟，研究培養(yǎng)過程中試管苗的營養(yǎng)需求、激素對苗木生長分化的調(diào)控，解決貫月忍冬的微體快速增殖、誘導(dǎo)生根的重要技術(shù)問題，建立了完善的貫月忍冬組織培養(yǎng)體系，并通過移栽前后的管理達(dá)到了高效誘導(dǎo)外植體分化增殖和高質(zhì)量保證幼苗成活的目的，并且保存了母體的全部優(yōu)良性狀，遺傳性狀穩(wěn)定。這種方法可在短期內(nèi)形成大量優(yōu)良試管苗，進(jìn)行規(guī)模化、工廠化生產(chǎn)，并具體具有一下優(yōu)點(diǎn)
I、本發(fā)明針對貫月忍冬原產(chǎn)地的氣候特點(diǎn)，提高了組培過程中的培養(yǎng)溫度，并且縮短了光照周期，降低了光強(qiáng)度，從而使培養(yǎng)環(huán)境更接近其原生地的氣候，通過對初代培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基配方的精確篩選，達(dá)到了增殖速度快、遺傳性狀穩(wěn)定、繁殖系數(shù)高、試管苗生長旺盛的優(yōu)良效果。2、在煉苗移栽中通過逐漸提高光照強(qiáng)度，并且在移栽過程中，逐漸降低濕度、嚴(yán)格控制溫度，采用合適的基質(zhì)配方，最終提高了生根試管苗的成活率。3、移栽前通過對土地的改良、苗床的改造，以及移栽之后溫度、水分、光照等因素的控制，保證了貫月忍冬的移栽成活率和苗木質(zhì)量。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述各實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，對本發(fā)明并沒有限制。一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟
(I)移栽前準(zhǔn)備土壤若肥力不足，必須先進(jìn)行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機(jī)肥3000kg,另加尿素50kg,為預(yù)防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細(xì)耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細(xì)，平整床面后進(jìn)行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細(xì),床面中央稍高,兩側(cè)稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢；
(2)移栽以及管理將經(jīng)過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當(dāng)天要澆透定根水，如遇連續(xù)晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時(shí)排水，移栽后35天內(nèi)要架設(shè)遮陽網(wǎng)，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結(jié)合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時(shí)松土除草，以防止土壤表面板結(jié)；
所述的組培苗通過以下方法得到
①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體；
②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時(shí)間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片；
③初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為1800-19001uX，待培養(yǎng)22天左右后，新芽長至
3.5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
④繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
⑤生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在1/2MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
⑥煉苗移栽先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在28 °C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。經(jīng)過上述步驟的培養(yǎng)，貫月忍冬的愈傷組織的萌動(dòng)率達(dá)到了 95. 1%，增殖倍數(shù)達(dá)到了 4. 5倍，生根率達(dá)到了 100%，最終的成活率達(dá)到了 95%，而移栽成活率達(dá)到了 100%。
權(quán)利要求
1. 一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟 (1)移栽前準(zhǔn)備土壤若肥力不足，必須先進(jìn)行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機(jī)肥3000kg,另加尿素50kg,為預(yù)防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細(xì)耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細(xì)，平整床面后進(jìn)行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細(xì),床面中央稍高,兩側(cè)稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢； (2)移栽以及管理將經(jīng)過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當(dāng)天要澆透定根水，如遇連續(xù)晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時(shí)排水，移栽后35天內(nèi)要架設(shè)遮陽網(wǎng)，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結(jié)合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時(shí)松土除草，以防止土壤表面板結(jié)； 所述的組培苗通過以下方法得到 ①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體； ②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時(shí)間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料, 段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片； ③初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為1800-19001uX，待培養(yǎng)22天左右后，新芽長至·3.5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段； ④繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期Ilh/d，光強(qiáng)度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段； ⑤生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在1/2MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養(yǎng)溫度為29°C，光照周期llh/d，光強(qiáng)度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段； ⑥煉苗移栽先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在28°C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種貫月忍冬的快速繁殖方法，主要通過對貫月忍冬移栽前后的管理，特別是組織培養(yǎng)過程中初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)以及煉苗移栽的步驟，達(dá)到了增殖速度快、遺傳性狀穩(wěn)定、繁殖系數(shù)高、試管苗生長旺盛的優(yōu)良效果，貫月忍冬的愈傷組織的萌動(dòng)率達(dá)到了95.1%，增殖倍數(shù)達(dá)到了4.5倍，生根率達(dá)到了100%，最終的成活率達(dá)到了95%，移栽成活率達(dá)到了100%。
文檔編號A01G9/10GK102630563SQ20121008570
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月28日
發(fā)明者董國新 申請人:常熟市濱江農(nóng)業(yè)科技有限公司